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收集皮屑、甲屑等标本时可用无菌取样刀从皮损的活动边缘刮取，然后将收集的标本置于载玻片上，滴加一滴浮载液，酒精灯稍加热后，盖上盖玻片，轻加压后在显微镜下观察真菌菌丝和孢子（图1-2-1）。
收集病变头发标本时可用镊子拔取毛发残根，然后将收集的病发标本置于载玻片上，滴加一滴浮载液，用酒精灯稍加热后，盖上盖玻片，显微镜下观察真菌菌丝和孢子（图1-2-2）。
本方法多用于面部、皮肤薄嫩处或儿童的皮肤取材。用透明胶带贴于取材部位压紧，稍等片刻后自取材部位揭下，直接将取材面贴于已滴加浮载液的载玻片上，均匀铺平后在显微镜下检查（图1-2-3）。
收集毛囊炎、炎症丘疹性皮损标本时，避免选取脓疱性丘疹，用镊子将毛囊角栓小心挤出后压片，或先用无菌粉刺针挑破皮损，后用无菌取样刀刮取患处渗液，将收集的标本置于载玻片上，滴加相应的浮载液后盖上盖玻片，显微镜下检查（图1-2-4）。
收集眼结膜、口腔、外阴、外耳道等黏膜部位或糜烂/溃疡部位时，可采用生理盐水润湿的无菌棉拭子拭取分泌物送检，将收集的标本洗脱于已滴加浮载液的载玻片上，盖上盖玻片后显微镜下检查。
图1-2-1 刮取法
图1-2-2 拔取法
图1-2-3 粘贴法
图1-2-4 挤取法
采集前先用75%酒精消毒病变部位皮肤或病甲，选择病灶活动边缘，以无菌取样刀刮取皮屑或甲屑。刮取皮肤标本多选用钝刃的无菌连柄取样刀，刮取坚硬厚层的甲标本可选用锐利尖细的柳叶刮刀，以不出血为度。若采集水疱标本应取疱壁组织检查而非疱液；若采集浸渍发白病灶时，应先刮除表面白色、已浸软的角质，采集贴近真皮表面或病损活动边缘的皮屑；若皮肤破溃应采集病损边缘的脓液或组织等；若鳞屑量少，可先用无菌取样刀刮取后采用透明胶带粘贴法采样；若考虑甲真菌感染，应先刮除病甲上层，然后刮取正常甲与病甲交界处并贴近甲床部的甲屑。采集的皮肤、甲标本可放入商品化的黑纸盒中送检（图1-2-5，图1-2-6），不宜采用塑料容器，因其容易产生静电吸附标本中真菌成分。如需存放，不宜置于潮湿环境，以免腐生真菌或污染细菌繁殖。
疑为头癣需取病发检查时，可先在滤过紫外灯或皮肤镜下初筛，用无菌镊子拔取紫外灯下荧光阳性或皮肤镜下特殊表现的病发，病发多为断发残根、有鞘膜，或拔取无光泽病发，采集数根放入无菌容器送检。
疑为毛结节病时，用无菌剪刀剪取毛干上有结节、有膜状包被的病发送检。
疑为口腔黏膜真菌感染时，用无菌棉拭子从白色假膜处拭取分泌物送检；疑似念珠菌性食管炎，食管镜下采集红斑、白膜处标本送检排查念珠菌；支气管镜下见到红斑、白膜、溃疡，需采集局部分泌物、白膜或活检组织排查真菌感染。
疑为阴道真菌感染时，用无菌棉拭子从宫颈后穹隆处拭取豆腐渣样、乳酪样分泌物送检。男性尿道标本收集用尿道拭子伸入尿道2~4cm，轻轻转动取出，尽量多采集尿道脱落细胞和分泌物送检。
眼部标本包括眼表标本和眼内容物。疑为眼部真菌感染时，多由眼科医师取材，一般在眼科显微镜下用无菌眼科刮刀刮取结膜／角膜部位溃疡、化脓的标本；沾无菌生理盐水的无菌棉拭子拭取结膜／角膜部位的分泌物标本。
血液标本和骨髓标本通常不进行直接涂片检查，但当怀疑念珠菌、新生隐球菌、毛孢子菌和双相真菌等深部真菌感染时，可进行直接涂片检查。采集血液和骨髓标本前必须充分消毒局部皮肤，用无菌注射器抽取3~5mL的标本放入含有少量肝素的灭菌试管内，取材后立即送检，将血液和骨髓标本离心，涂片染色后镜下检查。
腰椎穿刺采集脑脊液标本时必须充分消毒局部皮肤，用无菌注射器抽取至少2mL标本放入灭菌试管内，取材后立即送检，将标本离心后取沉淀部分进行直接涂片检查。
下呼吸道标本包括清晨痰液、支气管洗液、支气管肺泡灌洗液等等，而鼻咽分泌物、唾液和口腔分泌物均不宜作为下呼吸道标本，标本量5~10mL，所取标本应置于灭菌容器中，取材后立即送检，将标本离心后取沉淀部分进行直接涂片检查。
尿液标本包括清洁中段尿、新插导管尿、耻骨上膀胱穿刺尿，需在清洁外阴后留取，标本量5~10mL，取材后立即送检，将标本离心后取沉淀部分进行直接涂片检查。在储尿袋中超过24h的尿液、长期留置尿管尿液、导尿管或其尖端中含的尿液不宜取用。
组织标本包括浅表组织、深部组织、置管部位、穿刺物，脓肿、脓液、引流，手术切口部位等。尽可能在开始治疗前收集标本，采集前应清洁皮肤表面，自感染部位和感染临近部位采集相应的组织标本。组织标本在取材后应置于含无菌生理盐水的灭菌容器内，并立即送检。若为脓肿、窦道采集的标本，先观察有无颗粒；若为活检组织，需用无菌剪刀剪碎标本，或在组织研磨器内制成匀浆；若疑为接合菌感染，勿使用研磨器研磨，可保留整块组织，或用小剪刀将组织块稍剪碎。
所有临床标本在采集后应尽快送检，置于无菌的容器里转运，最好在1~2h内进行真菌直接镜检。若需邮寄标本，应将标本置于密封的商品化黑纸盒或容器中，封入塑料密封袋里以防破裂，并详细标记标本相关信息（图1-2-5，1-2-6）。若考虑为粗球孢子菌等特殊生物安全致病菌，需与实验室人员联系，做好生物安全措施。
图1-2-5 商品化的送样黑纸盒（正反面）
图1-2-6 商品化的送样黑纸盒
