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第一场 苏格兰 1542—1548
第二场 法国 1548—1561
第三场 苏格兰 1561—1568
第四场 英格兰 1568—1587
詹姆斯五世（1512—1542） 玛丽·斯图亚特的父亲。
玛丽·德·吉斯-洛林（1515—1560） 詹姆斯五世的妻子，玛丽·斯图亚特的母亲。
玛丽·斯图亚特（1542—1587）
詹姆斯·斯图亚特，梅里伯爵（1533—1570） 詹姆斯五世与厄斯金勋爵之女玛格丽特·道格拉斯的私生子，玛丽·斯图亚特的异母兄弟，玛丽·斯图亚特执政之前与之后的苏格兰摄政王。
亨利·达恩雷（斯图亚特）（1546—1567） 亨利七世的曾外孙，母亲伦诺克斯夫人是亨利八世的外甥女。玛丽·斯图亚特的第二任丈夫，因为妻子而成为苏格兰国王。
詹姆斯六世（1566—1625） 玛丽·斯图亚特和亨利·达恩雷的儿子。在玛丽·斯图亚特死后（1587年）成为苏格兰的合法国王；在伊丽莎白死后（1603）作为詹姆斯一世登上英格兰王位。
詹姆斯·赫本，博斯威尔伯爵（1536—1578） 日后的奥克尼公爵，玛丽·斯图亚特的第三任丈夫。
威廉·迈特兰·列廷顿 玛丽·斯图亚特的国务总理。
詹姆斯·梅尔维尔 玛丽·斯图亚特所信任的外交官。
詹姆斯·道格拉斯，莫顿伯爵 梅里被杀以后任苏格兰摄政王，于1581年被处决。
马修·斯图亚特，伦诺克斯伯爵 亨利·达恩雷的父亲，指控玛丽·斯图亚特谋杀亨利·达恩雷。
约翰·诺克斯（1505—1572） “国教”传教士，玛丽·斯图亚特的主要对手。
大卫·李乔 音乐家 玛丽·斯图亚特的宫廷秘书，1566年被刺杀。
皮埃尔·德·夏特利亚尔 玛丽·斯图亚特宫廷里的法国诗人，1563年被处决。
乔治·布坎南 人文主义者，詹姆斯六世的教师，曾经撰写攻击玛丽·斯图亚特的仇恨小册子。
亨利二世（1518—1589） 自1547年起为法国国王。
凯瑟琳·德·美第奇（1519—1589） 亨利二世的妻子。
弗朗索瓦二世（1544—1560） 亨利二世的长子，玛丽·斯图亚特的第一位丈夫。
查理九世（1550—1574） 弗朗索瓦二世的弟弟，在弗朗索瓦二世死后成为法国国王。
亨利七世（1457—1509） 自1485年起为英格兰国王。伊丽莎白的祖父，玛丽·斯图亚特和达恩雷的曾外祖父。
亨利八世（1491—1547） 亨利七世的儿子，自1509年起为英格兰国王。
安妮·博林（1507—1536） 亨利八世的第二任妻子，被指控破坏婚姻，后被处刑。
玛丽一世（1516—1558） 亨利八世与阿拉贡的卡塔琳娜的婚生女，在爱德华六世死后（1553年）成为英格兰女王。
伊丽莎白（1533—1603） 亨利八世和安妮·博林的女儿，父亲在世的时候被视为私生女，但在同父异母的姐姐玛丽去世之后（1558年）成为英格兰女王。
爱德华六世（1537—1553） 亨利八世在第三次婚姻中和乔安娜·西摩所生的儿子，儿时与玛丽·斯图亚特订婚，自从1547年起为英格兰国王。
詹姆斯一世 玛丽·斯图亚特之子，伊丽莎白的继任者。
威廉·塞西尔 伯利勋爵（1520—1598） 逐渐成了伊丽莎白备受信任的国务总理。
弗朗西斯·沃尔辛汉姆爵士 国务秘书兼警务部长。
威廉·戴维逊 第二国务秘书。
罗伯特·杜德雷 莱斯特伯爵（1532—1588），伊丽莎白的情人与亲信，伊丽莎白曾提议让他迎娶玛丽·斯图亚特。
托马斯·霍华德 诺尔福克公爵，英格兰第一等贵族，玛丽·斯图亚特的追求者。
塔尔博特 施鲁斯贝里伯爵，伊丽莎白任命他监视玛丽·斯图亚特长达十五年之久。
埃米亚斯·博雷特 玛丽·斯图亚特的最后一任监牢的守门人。