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Chuanbeimu（Pian）
FRITILLARIAE CIRRHOSAE BULBUS CONCISUS
本品为百合科植物太白贝母 Fritillaria taipaiensis P.Y.Li 或瓦布贝母 Fritillaria unibracteata Hsiao et K.C.Hsia var. wabuensis （S.Y.Tang et S.C.Yue）Z.D.Liu，S.Wang et S.C.Chen 的新鲜鳞茎的炮制加工品。
【炮制】 取鲜川贝母，除去杂质，切厚片，晒干。
【性状】 本品为不规则形或类圆形的厚片。表面类白色或浅棕黄色。切面白色或类白色。质硬而脆，富粉性。气微，味微苦。
【鉴别】 （1）本品粉末类白色或浅黄色。淀粉粒甚多，广卵形、贝壳形、肾形、椭圆形、长圆形或不规则圆形，有的边缘不平整或略作分枝状，直径5～64μm，脐点短缝状、点状、人字状、星状或马蹄状，层纹隐约可见或明显。表皮细胞类长方形，垂周壁微波状弯曲，偶见不定式气孔，圆形或扁圆形。螺纹导管和网纹导管直径5～64μm。
（2）取本品粉末10g，加浓氨试液10ml，密塞，浸泡1小时，加二氯甲烷40ml，超声处理1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇0.5ml使溶解，作为供试品溶液。另取贝母素乙对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（《中国药典》2020年版通则0502）试验，吸取供试品溶液1～6µl、对照品溶液2µl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-浓氨试液-水（18∶2∶1∶0.1）为展开剂，展开，取出，晾干，依次喷以稀碘化铋钾试液和亚硝酸钠乙醇试液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
（3）聚合酶链式反应-限制性内切酶长度多态性方法。
模板DNA提取 取本品0.1g，依次用75%乙醇1ml，灭菌超纯水1ml清洗，吸干表面水分，置乳钵中研磨成极细粉。取20mg，置1.5ml离心管中，用新型广谱植物基因组DNA快速提取试剂盒提取DNA［加入缓冲液AP1 400µl和RNA酶溶液（10mg/ml）4µl，涡旋振荡，65℃水浴加热10分钟，加入缓冲液AP2 130µl，充分混匀，冰浴冷却5分钟，离心（转速为每分钟14 000转）10分钟；吸取上清液转移至另一离心管中，加入1.5倍体积的缓冲液AP3/E，混匀，加到吸附柱上，离心（转速为每分钟13 000转）1分钟，弃去过滤液，加入漂洗液700µl，离心（转速为每分钟12 000转）30秒，弃去过滤液；再加入漂洗液500µl，离心（转速为每分钟12 000转）30秒，弃去过滤液；再离心（转速为每分钟13 000 转）2分钟，取出吸附柱，放入另一离心管中，加入50µl洗脱缓冲液，室温放置3～5分钟，离心（转速为每分钟12 000转）1分钟，将洗脱液再加入吸附柱中，室温放置2分钟，离心（转速为每分钟12 000转）1分钟］，取洗脱液，作为供试品溶液，置4℃冰箱中备用。另取川贝母对照药材0.1g，同法制成对照药材模板DNA溶液。
PCR-RFLP反应 鉴别引物：5'-CGTAACAAGGTTTCCGTAGGTGAA-3'和5'-GCTACGTTCTTCATCGAT-3'。PCR反应体系：在200µl离心管中进行，反应总体积为30µl，反应体系包括10×PCR缓冲液3µl，二氯化镁（25mmol/L）2.4µl，dNTP（10mmol/L）0.6µl，鉴别引物（30µmol/L）各0.5µl，高保真Taq DNA聚合酶（5U/µl）0.2µl，模板1µl，无菌超纯水21.8µl。将离心管置PCR仪，PCR反应参数：95℃预变性4分钟，循环反应30次（95℃ 30秒，55～58℃ 30秒，72℃ 30秒），72℃延伸5分钟。取PCR反应液，置500µl离心管中，进行酶切反应，反应总体积为20µl，反应体系包括10×酶切缓冲液2µl，PCR反应液6µl，Sma I（10U/µl）0.5µl，无菌超纯水11.5µl，酶切反应在30℃水浴反应2小时。另取无菌超纯水，同法上述PCR-RFLP反应操作，作为空白对照。
电泳检测 照琼脂糖凝胶电泳法（《中国药典》2020年版通则0541），胶浓度为1.5%，胶中加入核酸凝胶染色剂GelRed；供试品与对照药材酶切反应溶液的上样量分别为8µl，DNA分子量标记上样量为1µl（0.5µg/µl）。电泳结束后，取凝胶片在凝胶成像仪上或紫外透射仪上检视。供试品凝胶电泳图谱中，在与对照药材凝胶电泳图谱相应的位置上，在100～250bp应有两条DNA条带，空白对照无条带。
【检查】 水分 照水分测定法（《中国药典》2020年版通则0832 第二法）测定，不得过13.0%。
总灰分 不得过5.0%（《中国药典》2020年版通则2302）。
【浸出物】 照醇溶性浸出物测定法（《中国药典》2020年版通则2201）项下的热浸法测定，用稀乙醇作溶剂，不得少于9.0%。
【含量测定】 对照品溶液的制备 取西贝母碱对照品适量，精密称定，加三氯甲烷制成每1ml含0.2mg的溶液，即得。
标准曲线的制备 精密量取对照品溶液0.1ml、0.2ml、0.4ml、0.6ml、1.0ml，置25ml具塞试管中，分别补加三氯甲烷至10.0ml，精密加入水5ml、再精密加入0.05%溴甲酚绿缓冲液（取溴甲酚绿0.05g，加0.2mol/L氢氧化钠溶液6ml使溶解，加磷酸二氢钾1g，加水使溶解并稀释到100ml，即得）2ml，密塞，剧烈振摇1分钟，转移至分液漏斗中，放置30分钟。取三氯甲烷液，用干燥滤纸滤过，取续滤液，以相应的试剂为空白，照紫外-可见分光光度法（《中国药典》2020年版通则0401），在415nm的波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。
测定法 取本品粉末（过三号筛）约2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加浓氨试液3ml，浸润1小时，加三氯甲烷-甲醇（4∶1）混合溶液40ml，置80℃水浴加热回流2小时，放冷，滤过，滤液置50ml量瓶中，用适量三氯甲烷-甲醇（4∶1）混合溶液洗涤药渣2～3次，洗液并入同一量瓶中，用三氯甲烷-甲醇（4∶1）混合溶液稀释至刻度，摇匀。精密量取2～5ml，置25ml具塞试管中，水浴上蒸干，精密加入三氯甲烷10ml使溶解，照标准曲线的制备项下的方法，自“精密加入水5ml”起，依法测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中西贝母碱的浓度，计算，即得。
本品按干燥品计算，含总生物碱以西贝母碱（C 27 H 43 NO 3 ）计，不得少于0.050%。
【性味与归经】 苦、甘，微寒。归肺、心经。
【功能与主治】 清热润肺，化痰止咳，散结消痈。用于肺热燥咳，干咳少痰，阴虚劳嗽，痰中带血，瘰疬，乳痈，肺痈。
【用法与用量】 3～10g；研粉冲服，一次1～2g。
【注意】 不宜与川乌、制川乌、草乌、制草乌、附子同用。
【贮藏】 置通风干燥处，防蛀。
起草单位：
广州白云山潘高寿药业股份有限公司
广州德泉生物科技有限公司
复核单位：
广东省药品检验所