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2018年11月3日，患者钟某检测电解质。在贝克曼AU480全自动生化仪上检测无机磷（P）结果为6.75mmol/L，为危急值。经检查，该标本为清亮透明无块状凝集，符合检测要求。贝克曼AU480全自动生化仪测定反应曲线，与正常反应曲线基本一致，且检查室内质控在控。但使用日立7600全自动生化分析仪复查结果为3.79mmol/L，与贝克曼AU480结果存在较大差异。再次用贝克曼AU480复查，结果为6.6mmol/L，与第1次测定的结果基本相符。
2018年12月21日，患者唐某，因“腰背部疼痛1年余，加重1个月”之主诉入住我院中医康复科。入院诊断：①骨质疏松伴脊柱压缩骨折；②高血压病。入院生化检测，发现球蛋白和β 2 -微球蛋白异常增高，血红蛋白偏低。两台生化仪无机磷比对试验，贝克曼AU480结果为2.37mmol/L，日立7600结果为0.99mmol/L（图3-13），结果存在巨大差异。与临床进行沟通怀疑为多发性骨髓瘤，建议做相关性检查。最后确诊为多发性骨髓瘤。
图3-13 案例1血清无机磷对比检测结果
2019年1月7日，患者李某，因“心悸、气促1年余，加重4个月”之主诉入住我院心血管内科。入院诊断：①冠状动脉粥样硬化心脏病；②胃炎？入院检测出现球蛋白和β 2 -微球蛋白异常增高，血红蛋白偏低。两台生化仪无机磷比对试验，贝克曼AU480结果为7.45mmol/L，日立7600结果为2.18mmol/L（图3-14），结果存在较大差异。与临床医生沟通，怀疑为多发性骨髓瘤，建议做相关性检查。后确诊为多发性骨髓瘤。
图3-14 案例2血清无机磷对比检测结果
室内质控：两台全自动生化仪均使用是昆涞质控品，且使用的批号和批次相同。贝克曼AU480无机磷两个水平累计的靶值分别是0.997mmol/L和2.674mmol/L，日立7600无机磷两个水平累计的靶值分别是1.012mmol/L和2.702mmol/L，两台仪器累计靶值无明显差异。说明两台仪器无机磷检测系统结果具有可比性，可以排除两台仪器检测系统异常（图3-15）。
图3-15 AU480与日立7600质控比较
日立7600测定结果反应曲线：无机磷采用的是磷钼酸法，为一点终点法，测量反应会在短时间内达到反应终点。观察发现，日立7600在检测该标本无机磷反应曲线存在明显异常，整个反应过程中吸光度一直呈上升趋势，始终没有达到反应终点，反应存在干扰。
干扰物质有外源性和内源性之分。通过临床咨询，排除了外源性干扰原因。该患者为多发性骨髓瘤患者，大多数多发性骨髓瘤患者血液中会存在大量的单克隆免疫球蛋白或轻链（又称为本周蛋白），其特点是在pH4.5～5.5时，加热至40～60℃（通常为56℃）会发生凝固，继续加热至90～100℃会发生溶解，而温度下降至56℃时会恢复凝固。在仪器测量过程中，温度为37℃，接近40℃，考虑在检测过程中发生了单克隆免疫球蛋白或者轻链凝固沉淀，从而对整个结果造成了干扰。
试纸条测定无机磷试剂的pH为4.5，为酸性，满足本周蛋白沉淀的条件。取该患者标本和正常对照标本加入无机磷试剂，观察是否发生凝固沉淀。通过实验，发现该患者标本出现了明显的浑浊沉淀，对照组标本是清亮透明的。证明在检测过程中出现了标本凝固沉淀，对检验结果造成了干扰。因此，本实验证明多发性骨髓瘤的患者因血液中存在高单克隆免疫球蛋白或者轻链，对酸性的无机磷试剂在检测过程中存在明显影响。
AU480和日立7600使用的是相同的试剂及参数，其检测结果差异可能主要是仪器加样方式造成。日立7600生化分析仪先加样本再加试剂，试剂加入时的温度为2～8℃，整个反应液的起始温度比较低，缓慢孵育至37℃。在这个过程中单克隆免疫球蛋白或者轻链会缓慢凝固沉淀出来，造成反应曲线一直缓慢上升，在测量终点时并没有完全凝固沉淀出来，所以造成的干扰较小。贝克曼AU480生化分析仪先加试剂，孵育之后再加样本。整个反应液的起始温度相对较高，单克隆免疫球蛋白或者轻链会迅速全部凝固沉淀出来，造成反应曲线短时间内达到了终点，与正常反应曲线基本一致，但是造成了更大的干扰。
在实际工作中，如果发生高单克隆免疫球蛋白对测定结果的干扰，通常可以用稀释、沉淀、超滤或干化法等方法对标本进行处理。对于区县基层医院最优选的方法为稀释法。
（宛 剑 编，
顾大勇 审）