同种骨研究组以真野副教授为中心开会研讨,是在骨移植研究组分组后的第四天。这个组的成员有真野副教授、新谷讲师、坂井助理、川野助理、菊池副手、高松副手共六人。地点是副教授室隔壁的第三研究室。
真野副教授先做了下面的开场白。
“同种骨的移植优于异种骨,这是众所周知的。同种骨移植一直是骨移植的主流,其重要程度,是异种骨研究无论如何也改变不了的。异种骨研究越是深入,越是可以证明同种骨研究的优越性。”
真野副教授肤色白皙,戴着眼镜,口齿清晰而平静地说着。表面上看不出丝毫自负。
对同种骨研究组附属于异种骨研究组的说法,他似乎并没有特别在意。
从他说的“同种骨移植一直是骨移植的主流”“异种骨研究越是深入就越能证明同种骨移植优越性”的论断,可以看出他对这次研究的热情。副教授具有学究气质,喜怒不形于色,但是,这次却出人意料地流露出对异种骨研究组的对抗情绪。
“特别是现在,在同种骨的供给日趋紧张之际,从尸体和截肢取骨是最现实而有效的方法。相信不会有整形外科医生对此抱有疑问。”
说到这儿,副教授环顾研究组成员。看来副教授是真心要进行这项研究了。坂井悄悄瞅了一眼旁边的新谷,他也在点头。且不论可行与否,这的确是获得同种骨最现实的方法,对此坂井没有异议。
“虽然大家都知道移植同种骨优于移植异种骨,但如何保存取出的骨头,以及骨移植是否会受到残肢上肿瘤细胞的影响等许多问题,尚待研究。”
副教授翻开放在桌子上的本子。
“先谈谈骨的保存法。迄今为止,其可大致分为药液浸渍法和低温保存法两种,即为了保持骨头的活性而将其浸泡于某种溶液的方法和将其在低温下保存的方法。”
这时新谷做起了笔记,于是,坂井也拿出了笔记本。
“其中的药液浸渍法很古老,可以追溯到1933年奥莱尔发表的研究论文。这是浸泡于碱液或丙酮液来保持骨头活性的方法,但后来研究者发现这种方法易使骨头变脆,不耐用。1951年,雷诺路易滋实验了浸泡于Marzoning溶液的方法,结论是效果比低温保存法差得多。”
大家都学着新谷做起笔记来。
“低温保存法有两种,1942年公布的尹克岚的方法和K大的龙村教授的方法。虽说是低温法,但也是将骨头浸泡于药液中冷冻,可以说是药液保存法和低温保存法并用。”
说到这儿,真野副教授站起身,在黑板上写起字来。
“尹克岚的方法是先在加入了磷酸的防止凝血的血液中浸泡骨头,然后将其放置在零摄氏度至五摄氏度的环境中保存。”
“所用的血液是患者自己的血液吗?”新谷问了一句。
“不,不是同一个人的血液。但血型和骨头提供者是同样的,这样有益于保存骨头的活性。”
“你所说的活性,具体来说是指什么呢?”川野问。
对于“活性”这个词,坂井也不太明白,他毕竟是骨研究的新人。
“所谓骨头的活性,简而言之,就是骨细胞是否活着的意思。将骨头切成薄片后,用显微镜进行组织学观察就会明白。保存方法和保存溶液的不同,决定了骨细胞是存活还是死灭。根据奥莱尔的研究,在加入了盐酸的血液中进行低温保存,骨头的活性最长可达63天。但这只是例外,一般来说,将保存一个星期至两个星期的骨头用于移植的例子越来越多。”
真野副教授顿了顿接着说:
“下面是关于K大龙村教授的研究。他将同种骨浸泡在各种溶液里进行观察。溶液包括盐水、葡萄糖水、I·P·K液、肝油,甚至还有保存血——血液、血清、血浆培养液等七种保存血,将它们都置于二摄氏度至四摄氏度的低温下保存。实验结果表明,一般一个月是保存的极限,一超过这个限度,浸泡在食盐水、葡萄糖水、I·P·K液等溶液中的骨头便迅速失去了活性,骨细胞遭到破坏。”
“就是说,血液和血清等接近血液成分的溶液更适于骨头的保存了?”
“是的。但是即使浸泡在血液中,一过十五周,骨细胞就会完全坏死,无法使用。不过,浸泡在血浆,特别是肝磷脂血浆中的骨细胞存活超过了十五周,最长的超过了一百二十天。”
大家发出了“啊”的感叹声。在座的都是些对骨头不太关心的人,而在听副教授介绍的过程中渐渐对骨头产生了兴趣。
“低温保存法也有着悠久的历史。经验告诉人们,保存活物最好置于低温中。所以,很早以前人们就开始了实验。以低温保存法的名义最早进行的实验是1947年发表的布什的方法。他在研究报告中指出,将同种骨保存在零下二十四摄氏度的低温里,骨细胞存活了八十四天,最后他将其移植到了人体中。实验结果显示,保存一个月以内的骨头和自身骨没有太大的区别。”
“无论怎样低温保存,同种骨和自身骨能够完全一样吗?”新谷提出了疑问。
“原则上没什么不一样的,但是,由于低温的缘故,有机成分起了变化,形成了排斥反应的抗原。因移植的母床状态不同,临床数据也有相应变动,这些都要考虑进去。”
副教授的回答非常简洁。
“自从这个研究报告发表以来,许多研究者提倡低温保存,冯·拉克曼提出了骨库即骨银行的提案。随着移植骨重要性的增长,欧美各国陆续建立了骨银行,只要提出申请,就能够立刻得到骨头。”
“是以国家或者市町村为单位的吗?”
“不,还没有发展到那样的程度。骨头大多是保存在专科医院的冷冻保存室里,由专人管理。骨头和血液不同,不能从一般人身上采集,使用也只限于整形外科,所以在医院内小规模保存就够了。”
“在我国,存在拥有骨库的医院吗?”
“很遗憾,还没有像欧美那样完备的骨库,但是每个整形外科的科室都有低温保存库,保存骨头的医院正在各地陆续出现。”
真野副教授坐回椅子上。
“以上概要地介绍了药液浸渍法和低温保存法的有关文献,在此首先遇到的问题,是这两种保存法哪种更好。”
大家同时点头。这的确是令人感兴趣的地方。
“要说药液浸渍法最早是从将同种骨浸渍于溶液会使骨头的特异性,即使引起排斥反应的蛋白成分消灭或减弱这一想法出发的。可以说,如果忽略了这一点,就会引起或大或小的排斥反应,导致骨移植治疗效果降低。事实上,主张必须浸渍于药液的学者认为,低温保存法将骨头干燥地保存是没有意义的,所以反对低温保存法。”
“可是像刚才布什的方法那样,不是也有仅仅靠低温保存法而成功的例子吗?”
“的确如此,‘仅仅靠冷冻不行’的断言太早了。事实上,骨皮质中,没有造成排斥反应的抗原成分,这在波伊尔等人的研究中已经得到了证实。另外,研究者们的低温保存法的追踪实验结果表明,正如布什所说,什么溶液也不用泡,只靠低温保存的骨头,术后也没有特别的排斥反应,临床效果不错。”
“我对一个词有点疑问,是否必须说成‘低温’呢?还是应该说成‘冷冻’呢?”
“从广义上说是‘低温’,但实际上说‘冷冻’更准确。因为其温度几乎都在零摄氏度以下。”
“冷冻保存法,不是比药液浸泡法要简单易行吗?”
“冷冻保存确实更简单。我们科室保存肋骨所使用的就是冷冻保存法。”
“冷冻保存法的成功率大约是多少呢?”
“尹克岚认为,保存同种骨是75%,自身骨是70.2%,同种骨和自身骨都没有太大的变化。此外,康帕斯等人在零下五摄氏度保存了三十六例骨样,全部成功。在1950年发表的维尔松、哈巴特、西卡特莫利等人的临床报告中也显示了同样的结果。”
“这么说来,造成同种骨排斥反应的抗原成分,在冷冻保存中几乎都被分解了?”
“或者被分解,或者同种骨里所含的抗原比预想中少。总之,在目前的情况下,对同种骨来说,根据其临床数据和特点,冷冻保存法比药液浸渍法要优越得多。”
真野副教授换了一口气,又扫视了大家一遍,说道:
“因此,本教室即将开始的研究,首先由川野君和高松君负责从遗体取骨的工作。为此要和病理科与解剖科进行交涉。可能的话,要尽量采集长管骨和扁平骨,用药液或冷冻等保存法进行保存实验,研究出最好的方法。”
川野和高松点了点头。
“新谷君、坂井君和菊池君三人负责从截肢取骨。从咱们科的截肢中采集就可以了,比较简单。还有,从地下室浸泡在福尔马林里的残肢中,选取比较新鲜的骨头,研究骨头上遗留的细胞活性和肿瘤细胞动向。”
新谷默默地点了下头。
“这里最重要的,当然是肿瘤细胞的动向。截肢后这些肿瘤细胞会怎么样?是否会分布到健康的残肢的末端部位呢?假如是这样,截肢后残肢上的肿瘤细胞会存活多长时间?是否会死灭?经过冷冻保存,它们会在零下多少摄氏度的环境中死灭?这些问题都要研究。”
“对骨头的组织学上的观察,我没什么自信。”川野助理说。
“我会教给你的。所有骨头的标本最后都要由我过目。”
“从尸体取骨这件事,是否可以请您跟解剖科和病理科那边打个招呼呢?”
“我当然会的。”
“截下的残肢要从哪一年查起呢?”
“尽量从近期的查起。光是今年,就有六条残肢吧?”
真野副教授再次环顾大家,他的眼镜反射着白光。