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2.6 EPS提取与测定方法

微生物分泌的胞外聚合物EPS包括PN、PS、腐殖酸和油脂,其中PN和PS为EPS主要成分。EPS有助于细胞间黏附,显著影响好氧颗粒污泥的形成过程 [148-150] 。EPS具有动态的双层结构,细胞外层紧密结合型EPS(tightly bound EPS,TB EPS)和分散在TB EPS外的松散结合型EPS(loosely bound EPS,LB EPS) [151]

EPS提取采用修正后的热提取法 [152,153]

(1)LB EPS提取。取30 mL污泥混合液,置于50 mL离心管内,在8000 r/min下离心5 min,弃去上清液,在下层污泥中加入15 mL 0.05%的NaCl溶液(与反应器内盐度相近),摇匀后,再用0.05%的NaCl溶液稀释至原体积,0.05%的NaCl溶液要提前加热到70℃,确保稀释后的混合液达到50℃。稀释后的污泥迅速在漩涡震荡混合器上震荡1min,而后在4000r/min下离心10 min。在上清液中提取LB EPS。

(2)TB EPS提取。用0.05%的NaCl溶液稀释剩余污泥至原体积,在60℃水浴加热30 min,随后在4 000 r/min下离心15 min,上清液用于测定TB EPS,同时测定MLSS和MLVSS以备后续计算。

PN含量利用修正的Lowry法测定 [154] ,标准样品为牛血清蛋白。

(1)试剂配置。试剂一:5.72g/L NaOH和28.62g/L NaCO 3 ;试剂二:9.17 g/L CuSO 4 ;试剂三:35 g/L C 4 H 4 O 6 KNa·4H 2 O;试剂四:试剂一、试剂二和试剂三体积比100:1:1(现配现用);试剂五:稀释后福林酚试剂(福林酚与去离子水体积比5:6),4℃保存。

(2)测定方法。取2.5 mL样品于10 mL比色管中,注入3.5 mL试剂四,旋转混合后,加入0.5 mL试剂五,旋转混合45 min后,在750 nm下测定吸光度,以去离子水作空白对照。石英比色皿厚度为0.5 cm。本书中PN-LB PN+TB PN。

PS含量利用蒽酮法测定,标准样品为分析纯葡萄糖。

(1)蒽酮试剂配置。在100mL体积比为94.5%的H 2 SO 4 中加入125mg蒽酮,摇匀至完全溶解,冷却后置于4℃保存备用,现配现用。

(2)测定方法。取2 mL样品置于10 mL比色管中,注入1 mL蒽酮试剂,混合均匀后,在100℃水浴锅中加热14min,随后在4℃下冷却5 min,然后,在625 nm下测定吸光度,以去离子水作空白对照。石英比色皿厚度为0.5 cm。

本书中,PN-LB PN+TB PN,PS-LB PS+TB PS。 WZH9QK6MoKEkC1dMiiH7QxYnZUXC+rduSUkL1lcI5E2tZfjDcCijIo28EQhA90A2

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