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第五节
动物实验的一般要求和相关的认证与审查

一、动物实验的一般要求

(一)动物实验实施与人员

1.在动物实验实施前,动物实验负责人应向使用动物实验设施机构的实验动物福利与使用管理委员会提交审查申请,获得审查意见后方可实施。

2.动物实验人员应具有良好的职业道德规范、基本技能和良好的心理素质,并无过敏史,尤其要对动物的皮毛、血液、尿液、粪便等无过敏反应;同时,应进行实验动物与动物实验技能等级的培训,从事特殊操作的人员必须取得相关资质后方可从事相关工作,从事动物实验的人员应定期进行健康检查,检查结果应符合所从事动物实验工作的要求。

(二)实验动物与实验条件

1.动物实验使用的实验动物应符合微生物、寄生虫、遗传等质量控制的要求,非标准的实验用动物应依照国家相关法律法规,排除对人类具有危害的病原体,动物的外观、行为及生理指标无异常;使用遗传工程动物,应明确其遗传背景。

2.开展动物实验的环境条件应符合实验动物和动物实验设施标准;并根据不同的实验目的配置相关仪器设备,如动物麻醉、心电监护、称重、保定等必要的动物专用设备,以及必要的个体防护用品。动物实验饲养所使用的配合饲料应符合相应实验动物的营养标准,除特殊实验或特殊品种的动物饲养需要调整的成分之外,其他营养成分应符合相应实验动物配合饲料的营养要求。高脂、高糖、高营养等特殊饲料应在相应条件下贮存,并在保质期内使用。垫料、饮水符合相应级别的实验动物微生物控制要求。

(三)动物实验的过程管理与规范

1.动物实验过程管理 对实验过程和设施运行进行定期监督检查,监督实验设施运行状态和实验进展情况,执行适应的标准操作规程(SOP)和相关管理规定情况,以保证实验结果的可靠性、可重复性,动物实验室应保存动物实验过程和设施运行记录。

2.动物实验的基本规范 要规范动物实验,必须实施优良实验室操作规范(GLP),使用背景清晰的实验动物,并标明动物种类、级别、数量、性别、年龄、购买日期等相关资料。运输动物应符合善待实验动物的要求。动物实验时,动物保定要科学合理,在使用保定装置前,应对动物进行适应性训练。在满足实验要求的前提下,应尽量缩短保定时间。实验结束后,要根据动物品种、年龄、研究目的、安全性等选择使用安死术。动物处死后,必须对动物死亡进行确定,并应进行无害化处理。

(四)实验记录与档案管理

1.动物实验记录必须及时、真实、准确、完整、易于辨认;实验记录不得随意修改,如必须修改,须由修改人签字,并注明修改时间和原因,计算机、自动记录仪器等打印的图表和数据资料等,应妥善保存其拷贝或复印件。

2.动物实验研究结束后,原始记录的各种资料应整理归档。

二、AAALAC认证

AAALAC是致力于通过自愿的评估和委托程序,提高动物的福利,并在科学研究中人道地使用和管理动物。这一认可体系世界上许多国家都认同,被喻为“黄金标准(gold standard)”。取得该协会的认可,即表明该机构实验动物设施、管理及实验动物福利方面符合国际标准与规范。AAALAC认证的申请、评估过程对促进申请单位自身实验动物和动物实验管理水平的提高等具有十分重要的作用和意义。

根据AAALAC认可规则,AAALAC本身并不制定有关实验动物管理及使用的规范。在美国国内,以美国国家学术研究委员会编写的《实验动物饲养管理和使用手册》(现行修订版)作为制定具体认证标准的基本指南;在美国之外,则依据申请单位所在国家的法规及惯例制定标准。AAALAC的规范程序是《实验动物饲养管理和使用手册》中规定的动物管理和使用方案评审的要点。

1.申请使用动物的理由和目的。

2.对申请的动物种类和数量阐明理由,对申请的动物数量应尽可能按统计学方法阐述。

3.使用较少伤害性的操作措施、其他动物种类、离体器官、细胞或组织培养物或计算机模拟等替代方法的可行性或适宜性。

4.参与实际操作的从业人员有足够的训练和经验。

5.特殊的饲养管理条件。

6.适当的镇静、镇痛和麻醉措施(疼痛或伤害性的分级可能有助于方案的制定和评审)。

7.实验项目不必要的重复。

8.多项重大手术操作的实施。

9.预先设想有关适时干预、从研究项目中撤换动物或者因剧痛或精神紧张而采取安乐死术等的判断准则和处理方式。

10.手术后的护理。

11.对动物施行安乐死术或处置的方法。

12.从业人员工作环境的安全。

实验动物的使用方案还可包含以往未曾遇到过的或可能会引起无法确切控制的疼痛或压抑的操作措施。这类操作包括动物保定、多项重大活体外科手术、饮食限制、佐剂使用、以死亡作为终点的研究、有害刺激物的使用、皮肤或角膜刺激实验等。

三、IACUC审查

IACUC的全称为Institutional Animal Care and Use Committee(研究机构实验动物使用与管理委员会)。美国是最早提倡IACUC的国家,随后加拿大、欧洲国家等也相继出台了有关IACUC的一些要求和做法。不同国家对IACUC的组成要求有所差异,名称也不尽相同,但其行使的职责基本一致。近几年来,我国很重视和提倡IACUC,称“实验动物福利与使用管理委员会(简称管委会)”,并颁布制定国家标准《实验动物福利伦理审查指南》(GB/T 35892-2018)。成立IACUC的宗旨是确保各机构在执行各项动物实验项目时,以人道的方式来管理及使用实验动物,并符合法规政策的要求。IACUC是动物实验福利审查、监督、保障机构,同时也保障动物实验结果的真实、准确和科学性,代表社会对动物福利的关照,代表机构、社会、管理部门、研究人员、项目等多方利益。由IACUC负责审查动物实验研究以确保动物福利的观念,已成为学术界的一种共识。

(一)IACUC福利伦理审查原则

动物伦理作为生命伦理的重要组成部分,动物伦理审查不仅仅是动物福利审查,也关系到科研成果对人类社会意义的审查、科研人员自身安全的福利审查。为维护实验动物福利和动物实验者利益,综合评估动物伦理必须遵循以下原则。

1.动物保护原则 饲养、使用或处置各类实验动物必须有充分理由;综合评估实验目的、方法与造成动物的痛苦、死亡,禁止无意义滥养、滥用、滥杀实验动物;制止没有科学意义和社会价值或不必要的动物实验;优化动物实验方案,使用高质量的实验动物,减少不必要的动物使用数量,杜绝不必要的重复实验;在不影响实验结果的科学性情况下,用可替代的实验方法代替实验动物进行科学实验。

2.动物福利原则 保证实验动物生存过程中享有最基本的五项基本福利原则:免受饥渴的自由,免受痛苦、伤害和疾病的自由,免受恐惧和不安的自由,免受生活不适的自由,表达所有自然行为的自由。

3.伦理审查原则 善待动物,防止或减少动物的应激、痛苦和伤害;尊重动物生命,采取痛苦最少的方法处置动物,实施人道终点;保证从业人员的安全;动物实验方法和目的符合人类的道德伦理审查标准和国际惯例。

4.利益平衡原则 以当代社会公认的道德伦理审查价值观,兼顾动物和人类利益;在全面、客观地评估动物所受的伤害和应用者由此可能获取的利益基础上,负责任地出具实验动物或动物实验伦理审查报告。

5.独立工作原则 保持科学、独立、客观、公正和透明,不受来自政治、商业和自身利益等各个方面因素的干扰。

(二)IACUC福利伦理审查要点

1.实验动物许可证、实验人员上岗证。

2.动物来源、合格证、运输方式、饲料、笼具等。

3.实验动物选择合理性:实验动物的选择原则,数量是否合理,品种品系、性别等。

4.实验研究意义、目的:是否重复研究。

5.使用动物理由是否充分。

6.实验步骤:实施实验因素是否有必要,对实验动物的伤害是否轻、时间是否短,是否有同位素污染,是否有生物安全因素,是否使用化学有毒、有害试剂,给药方法途径,采样的部位、数量、频率、间隔时间是否合理,是否有限制饲料和水,限制活动方式、时间,肿瘤大小是否有限制,是否染毒剂,是否有脏器穿刺,有伤害时是否掌握疼痛分级和应急。

7.存活手术:人员水平,手术准备,麻醉人员水平,建议复合麻醉,手术对动物的伤害程度判断,同样手术在同种动物的情况,是否多次手术,手术后的护理情况(如止痛)。

8.实验过程中输液、镇静、消炎、换药固定等。

9.实验中疼痛和紧迫反应分级,应急措施准备。根据实验动物临床体征判断,有无刺激、紧张和疼痛。使用麻醉、镇静、镇痛措施所选择的药物种类、剂量、途径和给药时间、间隔等记录。

10.麻醉止痛药物有效期(注意观察动物的表现)、药物的批号、说明是否失效、保存方法等。

11.仁慈终点和安乐死:仁慈终点指终止实验以解除动物疼痛和疾苦的时间点作为安乐死启动的时间点。采用CO 2 、过量麻醉药物等安乐死方法,确定动物的处死标准。

12.尸体处理:动物尸体的储存、运输和委托处理的合同等。

13.生物安全:使用生物、化学等危险品,如何加强人员和环境的防护,包括毒试剂、生物危害、辐射安全等危险试剂使用,生物材料是否来源清晰,动物组织细胞等使用和保存情况;安全保证、兽医保证等制度及执行情况。

14.动物传染病来源:如组织、细胞、抗体等是否有传染源。

15.饲养特殊要求:如使用软料长牙、磨牙棒等。 Q9JSHHwSJoTet/52cIEvtuGCCWzXG5ZVIjpJXQCLDWGZWTuPuk8t95IqzRPX76r+

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