【实验目的】
1.肉汤稀释法观察青霉素的抗菌作用。
2.练习测定青霉素抗金黄色葡萄球菌的最低浓度。
【实验原理】
青霉素的药理作用是干扰细菌细胞壁的合成。青霉素的结构与细胞壁的成分黏肽结构中的D-丙氨酰-D-丙氨酸近似,可与后者竞争转肽酶,阻碍黏肽的形成,造成细胞壁的缺损,使细菌失去细胞壁的渗透屏障,对细菌起到杀灭作用,为窄谱抗生素,对革兰阳性菌具有较强的抗菌作用。抗菌效果随药物浓度不同差别较大,达不到足够浓度抗菌疗效差,且易耐药,影响药效延误病情,所以验证抗菌浓度至关重要。
【实验条件】
金黄色葡萄球菌肉汤培养基、普通肉汤培养基、青霉素64U/mL的普通肉汤培养基。
麦氏比浊管、1mL刻度吸管(灭菌)和橡皮胶头。
【实验方法】
取9只麦氏比浊管编号,每支管中加入普通肉汤培养基1mL,在1号管内加入含64U/mL青霉素肉汤培养基1mL,混匀后吸取1mL到2号管,混匀,从2号管中再取1mL加至3号管,再吸取1mL加至4号管,以此操作直到8号管为止。9号管不加含青霉素的肉汤培养基作为对照管。然后1~9号每只管中加入0.1mL含菌量相当于麦氏比浊管第1管1.2倍的金黄色葡萄球菌(相当于1.5×10 9 /mL)。将麦氏比浊管放入35℃的温箱中16~18小时,然后观察每只麦氏比浊管的浑浊情况,并将观察结果写于实验结果中。
【实验结果】
见表1-9-1-1。
表1-9-1-1 青霉素的抑菌实验结果
【注意事项】
1.操作要在无菌状态环境中,且操作人员手要戴无菌手套。
2.在吸取药液时药量要准确,以免剂量不准带来误差。
【思考题】
青霉素使用时的注意事项有哪些?