第二节　强心苷对离体蛙心的强心作用

【实验目的】

1.学习离体蛙心灌注技术。

2.观察强心苷对离体蛙心的强心作用及其与钙离子的协同作用。

【实验原理】

强心苷是一类选择性作用于心脏的药物，具有正性肌力作用。强心苷类与心肌细胞膜上的Na ⁺ -K ⁺ -ATP酶结合后，使酶活性下降，使细胞内Na ⁺ 增加，通过Na ⁺ -Ca ²⁺ 交换，使细胞内Ca ²⁺ 增加，从而增强心肌的收缩力。

【实验动物】

青蛙。

【实验条件】

1.药品

0.025%毒毛花苷K、任氏液、低钙任氏液、1%氯化钙溶液。

2.器材

BL-420生物功能实验系统、张力传感器、探针、蛙板、蛙心夹、斯氏蛙心插管、铁架台、双凹夹、试管夹、手术器械、烧杯（5mL、50mL）、注射器（1mL）、吸管。

【实验方法】

1.离体蛙心标本制备

（1）取青蛙1只，用探针破坏脑和脊髓，仰位固定于蛙板之上。剪开胸廓、心包膜暴露心脏，穿线结扎右主动脉，于左主动脉穿线备用。

（2）在左主动脉上剪一“V”形小口，将有任氏液的蛙心插管插入，并在心脏收缩时（主动脉瓣开放）通过主动脉球，转向左后方插入心室，见到插管内的液面随着心搏上下波动后，将松结扎紧并固定于套管小钩上。用滴管吸去套管内血液，换2～3次任氏液至洗净余血，以防止套管堵塞。

（3）剪断两根动脉，持套管提起心脏，从静脉窦以下把其余血管一起结扎，分离周围组织，在结扎处下剪断血管，使心脏离体。用任氏液连续换洗直至无血色，套管内保留1.5mL左右的任氏液。

2.固定离体蛙心

将蛙心套管固定于铁架台，用系有长线的蛙心夹夹住心尖，线的另一端连接张力传感器，打开BL-420生物功能实验系统，适当调节张力，描记正常的心脏搏动曲线。

3.给药并观察

待心脏活动稳定后，依次加入下列药物，注意观察心率、振幅、节律的变化。

（1）套管内换入等容积低钙任氏液，制作心功能不全的病理模型。

（2）当心肌收缩显著减弱时，向套管内滴加0.025%毒毛花苷K0.1～0.2mL，并观察其正性肌力作用。

（3）作用明显时，再向插管内加入1%氯化钙0.1mL。

（4）待作用稳定后，每隔30秒向插管内加0.025%毒毛花苷K0.1mL，直至心脏停搏。

【实验结果】

见表1-7-2-1。

【注意事项】

1.制备标本时，应小心插管，避免损伤心脏（包括静脉窦）。

2.勿混用加药滴管，加药量根据反应敏感情况，应由小到大，加药后立即用滴管搅匀。

3.随时滴加任氏液于心脏表面，以保持心肌细胞存活。

【思考题】

1.强心苷增强心肌收缩力的机制是什么？

2.强心苷有哪些临床用途？ BrtMB0sK/LNWPbeM/kd4atP5mQQ7KMeMf/qXZjkV/bLSsa6yoI/+MhQIPlUZhdKZ