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第二节 常用实验动物的给药方法

药理学实验中,常常需要用药物对实验动物进行常规处理,这涉及实验动物的给药方法。较常见的给药方法有摄取给药法、注射给药法、涂布给药法和吸入给药法,其中前两种方法较为常用。

一、摄取给药法
1.自动摄取法

把药物放入饲料或溶于动物饮水中让动物自动摄取。此法的优点是操作简便,不会因操作损伤动物。由于不同个体因各种原因其饮水和摄食量有差异,摄入的药量难以控制,不能保证剂量准确。饲料和饮水中的药物容易分解,难以做到平均添加。该方法一般适用于对动物疾病的防治或某些药物的毒性实验,复制某些与食物有关的人类疾病动物模型。

2.灌胃给药法

灌胃给药能准确掌握给药量、给药时间、发现和记录药效出现时间及过程。但灌胃操作可能对动物造成损伤,熟练的灌胃技术可减轻对动物的损伤。

动物灌胃用灌胃器,灌胃器由注射器和灌胃管构成,灌胃管由尖端磨平后稍加弯曲的注射器针头制成。小鼠的灌胃管长4~5cm,直径约1mm;大鼠的灌胃管长6~8cm,直径约12mm。灌胃管插入深度大致是从口腔至最后一根肋骨后缘,成年动物插管深度一般是小鼠3cm、大鼠和豚鼠5cm、家兔15cm。

(1)小鼠、大鼠 左手拇指和食指捏住鼠颈部皮肤,并用小指和无名指夹住尾部固定,使鼠腹部向上,右手持灌胃器经口角将灌胃管插入口腔,用灌胃管轻压鼠上腭部,使口腔和食管成一直线,再将灌胃管沿上腭缓缓插入至预定深度,如稍感有阻力且动物无呼吸异常,可将药物注入(图1-2-2-1)。如动物挣扎得厉害、憋气,则应抽出重插。如灌胃管插入气管,动物可能立即死亡。药液注完后轻轻退出胃管,操作宜轻柔,以防损伤食管及膈肌。灌注量小鼠为0.1~0.3mL/10g,大鼠为1~2mL/100g。

图1-2-2-1 小鼠灌胃法

(2)豚鼠 一操作者以左手从动物背部把后肢伸开,握住腰部和双后肢,用右手拇指、食指夹持两前肢。另一操作者右手持灌胃器沿豚鼠上腭壁滑行,插入食管,轻轻向前推进约5cm,插入胃内。

插管时亦可用木制或竹制的开口器,将9号导尿管穿过开口器中心的小孔插入胃内。将导管外口端置于水杯中,若有连续气泡,说明插入了呼吸道,应立即拔出重插,如无气泡,即可注入药物,注药完毕后再注入生理盐水2mL,以保证给药剂量的准确。灌胃完毕后,先退出胃管,后退出开口器。拔插管时,应慢慢抽出,当抽到近咽喉部时应快速拉出,以防残留的液体进入咽喉部,反流入气管。灌胃量为每次每只4~7mL。

(3)家兔 用兔固定箱,可一人操作。如无固定箱,则需两人协作进行。一人坐好,腿上垫好围裙,将家兔的后肢夹于两腿间,左手抓住双耳,固定其头部,右手抓住其两前肢;另一人将开口器横置于家兔口中,把兔舌压在开口器下面(图1-2-2-2),将9号导尿管自开口器中央的小孔插入,慢慢沿上腭壁插入约15cm。插管完毕将胃管的外口端放入水杯中,切忌伸入水中过深,如有气泡从胃管逸出,说明胃管在气管内,应拔出重插。如无气泡逸出,则可将药物推入,并以少量清水冲洗胃管,以保证给药剂量的准确。灌胃完毕后,先退出胃管,后退出开口器。灌胃量为每次每只80~150mL。

图1-2-2-2 家兔开口器及灌胃法

二、注射给药法
1.皮下注射法

在处理好动物注射部位的皮肤后,左手将注射部位附近的皮肤提起,右手握住注射器,斜向刺入。刺入后左手放开皮肤,先用左手将针芯回抽,若无血液流入注射器则表明并未刺伤血管,则可将注射器针芯徐徐推进,将预定剂量的药物注入。若注射针头已刺伤血管,则应将针头拔出,重新注射。

(1)小鼠 用左手拇指和中指将小鼠颈背部皮肤轻轻提起,食指轻按其皮肤,使其形成一个三角形小窝,右手持注射器从三角窝下部刺入皮下,轻轻摆动针头,如易摇动则表明针尖在皮下,回抽无血后可将药液注入。针头拔出后,以左手在针刺部位轻轻捏住皮肤片刻,以防药液流出,大批动物注射时,可将小鼠放在鼠笼盖或粗糙平面上,左手拉住尾部,小鼠自然向前爬动,此时右手持针迅速刺入背部皮下,推注药液。注射量为0.l~0.3mL/10g。

(2)大鼠 注射部位可在背部或后肢外侧皮下。操作时轻轻提起注射部位皮肤,将注射针头刺入皮下,一次注射量约为1mL/100g。

(3)豚鼠 注射部位可选用大腿内侧、背部、肩部等皮下脂肪少的部位。通常在大腿内侧,注射针头与皮肤成45°的方向刺入皮下,确定针头在皮下推入药液,拔出针头后,拇指轻压注射部位片刻。

(4)家兔 注射方法参照小鼠皮下注射法。

2.腹腔注射法

动物腹部向上固定,腹腔穿刺部位一般多在腹白线偏左或偏右的下腹部。

(1)小鼠 左手固定动物,使鼠腹部面向捉持者,鼠头略朝上。右手持注射器朝头部方向进行穿刺,注射针与皮肤面成45°刺入下腹部,针头刺入皮肤后进针3mm左右,当感到落空感时表示已进入腹腔,回抽无肠液、尿液后即可注射(图1-2-2-3)。注射量为0.1~0.2mL/10g。应注意切勿使针头向上注射,以防针头刺伤内脏。

图1-2-2-3 小鼠腹腔注射法

(2)大鼠、豚鼠、家兔 皆可参照小鼠腹腔注射法。但应注意家兔在腹白线两侧注射,离腹白线约1cm处进针。大鼠注射量为1~3mL/100g。

3.静脉注射法

静脉注射应根据动物的种类选择注射的血管。小鼠和大鼠多选用尾静脉,家兔多选用耳缘静脉,豚鼠可选用前肢皮下头静脉、后肢小隐静脉注射。因为静脉注射是通过血管给药,所以只限于液体药物。如果是混悬液,可能会因悬浮粒子较大而引起血管栓塞。

(1)小鼠、大鼠 多采用尾静脉注射。鼠尾静脉有3根,左、右两侧及背侧各1根,两侧尾静脉较易固定,应优先选择。注射时,先将动物固定于固定器内(图1-2-2-4),可采用筒底有小口的玻璃筒、金属或铁丝网笼。将全部尾巴露在外面,以右手食指轻轻弹尾尖部,必要时可用45~50°C的温水浸泡尾部或用75%乙醇反复擦拭尾部,以达到消毒、扩张血管、软化表皮角质的目的。以拇指与食指捏住尾部两侧,使尾静脉充盈明显,以无名指和小指夹持尾尖部,中指从下托起尾巴固定之。用4号针头,针头与尾部成30°刺入静脉,推动药液无阻力,且可见沿静脉血管出现一条白线,说明针头在血管内,可注药。如遇到阻力较大,皮下发白且有隆起时,说明针头不在静脉内,须拔出针头重新穿刺。注射完毕后,拨出针头,轻按注射部位止血。一般宜从尾尖端开始,逐渐向尾根部移动,以备反复应用,一次注射量为0.05~0.1mL/10g。

图1-2-2-4 小鼠尾静脉注射法

(2)豚鼠 可选用多部位的静脉注射,如前肢皮下头静脉、后肢小隐静脉或雄鼠的阴茎静脉等,豚鼠的耳缘静脉也可注射,一般前肢皮下头静脉穿刺易成功。豚鼠的静脉管壁较脆,注射时应特别小心。一次注射量不超过2mL。

(3)家兔 一般采用耳缘静脉注射,兔耳缘静脉沿耳背后缘走行(图1-2-2-5)。将覆盖在静脉皮肤上的兔毛仔细拨去或剪去,可用水湿润局部,将兔耳略加搓揉或用手指轻弹血管,使兔耳血流增加,并在耳根压迫耳缘静脉,使其瘀血而发生血管怒张。注射者用左手食指和中指夹住静脉近心端,拇指和小指夹住耳缘部分,以左手无名指和小指放在耳下作垫,待静脉充盈后,右手持注射器使针头尽量由静脉末端刺入,顺血管方向平行、向心端刺1~1.5cm,放松左手拇指和食指对血管的压迫,右手试推注射器针芯,若注射阻力较大或出现局部肿胀,说明针头没有刺入静脉,应立即拔出针头;若推注阻力不大,可将药物徐徐注入。注射完毕后,与血管平行地将针头抽出,随即以棉球压迫针眼止血。

实验过程中如需反复静脉给药,也可不抽出针头,用动脉夹将针头与兔耳固定,换一有肝素生理盐水的注射器接上,防止血液流失和凝固,以备下次注射时使用。

图1-2-2-5 家兔耳缘静脉注射法

三、涂布给药法

涂布给药法是将药物涂擦在实验动物的皮肤上,主要用于鉴定药物经皮肤的吸收作用、局部作用或致敏作用等。药物与皮肤接触的时间可根据药物性质和实验要求而定。

四、吸入给药法

吸入给药法是通过特殊的吸入装置,使药液呈气雾状喷出,经实验动物口、鼻吸入后,进入支气管和肺泡吸收而发挥作用。 ad8ScBpV/ffP3TxovmgYr91bzAhoPKCpyWMcA3Ik4gVMX0ZBroR8bCuHvNzlw6bC

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