实验三
植物细胞有丝分裂标本制作与观察

一、实验目的

1.掌握对植物组织、细胞的固定、离析和压片方法。

2.了解有丝分裂的全过程及其染色体的动态变化情况。

3.掌握有丝分裂各时期的特征。

二、实验原理

有丝分裂是细胞均等增殖的过程，是体细胞分裂的主要方式。在有丝分裂过程中，细胞内每条染色体都能复制一份，然后分配到子细胞中，因此两个子细胞与母细胞所含的染色体在数目、形态和性质上均是相同的，在各种生长旺盛的植物组织中均存在着有丝分裂。

三、实验器材与试剂

1.仪器、用具：显微镜、恒温箱、载玻片、盖玻片、计时器、玻璃皿、剪刀、刀片、镊子、滴管等。

2.材料：洋葱根尖。

3.试剂：15% HCl和95%酒精的混合液（1∶1）、0.01g/mL醋酸洋红溶液。

四、实验步骤

1.洋葱根尖的培养

在实验前3~4天，取洋葱一个，放在广口瓶上。瓶内装满清水，让洋葱的底部接触到瓶内的水面。放在温度为25℃的培养箱内培养，每天换水两次，使洋葱的底部总是接触到水。待根长5cm时，可取生长健壮的根尖制片观察。

2.装片的制作

（1）解离：下午2时是洋葱有丝分裂的高峰期，可在此时剪取洋葱的根尖1 mm~2 mm,立即放入含15%HCl和95%酒精混合液（1∶1）的玻璃皿中，在室温下解离3min~5min后取出根尖。

（2）漂洗：待根尖酥软后，用镊子取出，放入盛有清水的玻璃皿中漂洗约10min,以洗去解离液，便于染色。

（3）染色：把洋葱根尖放进盛有0.01g/mL醋酸洋红溶液的玻璃皿中，染色3min~5min。

（4）制片：用镊子将这段洋葱根尖取出，放在载玻片上，加一滴清水，用镊子尖把洋葱根尖弄碎，盖上盖玻片，用拇指垂直轻压盖玻片，以使细胞分散开。

3.洋葱根尖细胞有丝分裂的观察

（1）低倍镜观察：把制作成的洋葱根尖装片先放在低倍镜下观察，慢慢移动装片，要找到分生区细胞，它的特点是：细胞呈正方形，排列紧密，有的细胞正在分裂。

（2）高倍镜观察：找到分生区细胞后，把低倍镜移走，换上高倍镜，用细准焦螺旋和反光镜把视野调整清晰，直到看到清晰细胞物像。仔细观察，可先找出处于细胞分裂中期的细胞，然后再找出前期、后期、末期的细胞。注意观察各个时期细胞内染色体变化的特点。在一个视野里，往往不容易找全有丝分裂过程中各个时期的细胞。如果是这样，可以慢慢地移动装片，从邻近的分生区细胞中寻找。

五、实验注意事项

1.解离充分是实验成功的必备条件，解离过度，细胞结构被破坏。

2.根尖取材时要注意去除根尖乳白色根冠，取根尖分生区2~3 mm。

3.注意显微镜下观察到的都是死细胞，不能看到细胞分裂的动态变化。

六、作业

1.绘出所观察到的有丝分裂图像，并总结植物细胞有丝分裂各个时期的特点。

2.实验过程中需要注意哪些事项？ R/Jn53ZnIL0hpDYJxenPHGGwy2pGZMuKawNEBpOiZCLamjC/jX46UIoLnfexdzgD