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实验一
普通光学显微镜的使用和生物绘图技术

一、实验目的

1.了解显微镜的构造和各部分的性能,掌握正确的使用技术和保养措施。

2.学习生物绘图的基本方法。

二、实验原理

普通光学显微镜是一种精密的光学仪器,利用目镜和物镜两组透镜系统来放大成像。显微镜是打开微观世界大门的钥匙,带人们看到了许多过去看不到的微小生物和构成生物的基本单元——细胞。目前,光学显微镜的最大放大倍率约为2 000倍,电子显微镜的最大放大倍率超过300万倍,使我们对生物体的生命活动规律有了更进一步的认识。基础生物学教学大纲规定的实验中大部分要通过显微镜来完成,因此,显微镜性能的好坏也是做好观察实验的关键因素之一。

三、实验器材与试剂

1.仪器、用具:光学显微镜、铅笔、绘图橡皮、直尺、绘图纸等。

2.材料:南瓜茎永久装片、玉米茎横切装片、水稻茎横切装片等。

四、实验步骤

(一)普通光学显微镜的基本构造、使用方法及保护
1.显微镜的基本结构

显微镜构造复杂,种类繁多,但基本上是由机械部分和光学部分两部分构成(图2-1)。

(1)机械部分

①镜座:为显微镜最下面的马蹄形铁座,起稳定和支撑显微镜的作用。

②镜柱:镜座上的直立短柱,支撑显微镜的其他部分。

③镜臂:镜柱上方弯曲成马蹄形的部分,便于手持,镜臂和镜柱相连接处有一个能活动的倾斜关节,可使显微镜倾斜,便于观察。

④载物台:镜臂下端向前伸出的平台叫载物台,用来放置玻片标本,中央有一个圆孔,叫通光孔。通光孔左右两旁一般装有一对弹簧夹,为固定玻片之用,有的装有移片器,可使玻片前后左右移动。

图2-1 显微镜的基本结构

⑤调焦器:镜臂上装有两种可以转动的螺旋,一大一小,能使镜筒上升或下降,调节焦距。大的叫粗调焦器,升降镜筒较快,螺旋转动一圈,镜筒升降10 mm,用于调节低倍镜;小的叫细调焦器,升降镜筒较慢,螺旋转动一圈,镜筒升降0.1 mm,主要用于调节高倍镜。

⑥镜筒:镜臂上端连接的圆筒部分。有的显微镜镜筒内有一抽管,可适当抽长,一般长度是160~170 mm。上端安装目镜,下端连接物镜转换器。

⑦转换器:镜筒下端的一个能转动的圆盘叫转换器。其上可以安装几个物镜,观察时便于调换不同倍数的镜头。

(2)光学部分

①反光镜:位于镜座中央,是显微镜观察时获得光源的装置。反光镜具两面,一面为平面镜,一面为凹面镜。转动反光镜,可使外面光线通过集光器照射到标本上。平面镜使光线分布较均匀。凹面镜有聚光作用,反射的光线较强,一般在光线较弱时使用。

②接物镜:安装在转换器上,能将观察的物体进行第一次放大,是显微镜性能高低的关键性部件。一般的显微镜有2~4个接物镜镜头,每个镜头都是由一系列的复式透镜组成的,物镜上所刻4×、8×、10×、40×、100×等就是放大倍数,从形态上看,接物镜越长,放大倍数越高。低倍镜常用于搜索观察对象及观察标本全貌,高倍镜则用于观察标本某部分或较细微的结构,油镜则常用于观察微生物或动植物更细微的结构。

③接目镜:装于镜筒上端,由二、三片透镜组成,作用是把物镜放大的物体倒立实像进一步放大成为一个虚像。在目镜上方刻有5×、8×、10×、25×等放大倍数。从外表上看,镜头越长放大倍数越低。我们所观察到的标本的物象,其放大倍数是接物镜和接目镜放大倍数的乘积。

④聚光器:也叫集光器,位于载物台下方,由两块或数块透镜组成,它能聚集来自反光镜的光线,使光度增强,可以上下移动,便于调光,集光器下有一可伸缩的光圈,由十几张金属薄片组成,可以调节进入集光器光量的多少。光线过强时,可缩小光圈,反之则张大光圈。

2.显微镜的使用方法

(1)安放镜座:用右手握镜臂,左手托镜座,把显微镜放在自己的左前方,镜座距桌边约两寸,镜臂向后,镜筒向前。

(2)对光:用显微镜观察标本前,首先要对好光源。转动物镜转换器,使用低倍物镜对准通光孔,左眼从接目镜向下注视,拨动反光镜,当视野中能看见大片白色为佳,如视野阴暗不明,则需再调节反光镜和集光器,直到视野明亮均匀。若为自带电源,则在使用前打开电源开关,逐步调节光亮度旋钮,直至亮度合适。

(3)低倍镜的使用:将要观察的玻片标本放在载物台上,将标本与通光孔重合,沿顺时针方向旋转粗准焦螺旋,把镜筒徐徐降到物镜头差不多接近玻片标本(约半厘米)为止。在目镜中可见一模糊实像,边观察边用细准焦螺旋调节镜筒高度,直至物像清晰。

(4)高倍镜的使用:如果要观察视野内某部分更细微的结构,在低倍镜中观察不清,则需要用高倍镜观察。将要观察的部位调节至视野中心,转动镜头转换器,换高倍镜,转动细准焦螺旋调节到目镜中的像清晰。高倍镜的视野小,光线暗,观察时可以适当调节进光量,使视野清晰。如光线太弱,可放大光圈的口径或调节光亮度旋钮。

(5)油镜的使用:高倍镜下观察的标本,如果放大倍数还不够,可用油镜,同样要先在高倍镜下观察,把要观察的部分放在视野的中心。观察到清晰的物像之后,在盖玻片上表面的中央滴一小滴香柏油,再换上油镜头,使油镜头与香柏油接触,然后一边观察,一边转动细准焦螺旋以看清物像。用油镜观察完毕后,转开油镜,必须用擦镜纸沾二甲苯擦去镜头上的香柏油。

(6)关闭电源:观察结束后,降下载物台,取掉载玻片,将光源调至最弱后关闭电源。

3.显微镜的保养

(1)取显微镜时,必须右手握住镜臂,左手托住镜座,轻拿轻放。

(2)显微镜的使用,一定要按操作方法和步骤使用,不要随便转动粗细准焦螺旋,以免机器损伤,调节失灵。

(3)载物台要保持干净,不要让水、酸、碱或其他化学药品流到载物台上,以免生锈或腐蚀。

(4)观察标本时,一定要先用低倍镜观察,再用高倍镜,低倍镜能看清,就不必用高倍镜。

(5)不能用硬纸擦透镜,必须用干净的擦镜纸或细软纱布,朝一个方向擦拭透镜,以免损坏镜头。

(6)避免阳光直射,注意防潮湿、防灰尘,经常保持镜体和镜体箱的干燥和清洁。

(二)生物绘图
1.生物绘图的方法

生物绘图的方法有多种,最常见的是线条衬阴法和点点衬阴法。点点衬阴法即将图形画出后,用铅笔点出圆点,以表示明暗和深浅,给予立体感。在暗处点要密,明处要疏,但要求点要均匀,点点要从明处点起,一行行交互着点,物体上的斑纹描出再点点衬阴。线条衬阴法又称涂抹阴影法,是依靠线条的疏密来表示阴暗和深浅。点点衬阴法要求不能用涂抹阴影的方法代替点点。

2.生物绘图的步骤

(1)作图前先了解作图的要求,认真观察标本,搞清实物标本的结构特点,确定好比例。严禁潦草、马虎对待,生物绘图法的精髓就是忠于事实,切忌抄书或凭空想象。

(2)掌握好比例和位置,用HB铅笔轻轻将图的大体轮廓画出。

(3)在草图的基础上修正细节,此时要用2H和3H铅笔,线条要流畅,打点衬影,点要匀称,点线不要重复描绘。

(4)按注图要求绘图,写上图名及班级、姓名、放大倍数等。

3.生物绘图的要求

(1)具有高度的科学性,不得有科学性错误。形态结构要准确,比例要正确,要求有真实感、立体感且美观。

(2)图面要力求整洁,铅笔要保持尖锐,尽量少用橡皮。

(3)绘图的线条要光滑、匀称,点点要大小一致。

(4)绘图要完善,字体用正楷,大小要均匀,不能潦草。注图线用直尺画出,间隔要均匀,且一般多向右边引出,图注部分接近时可用折线,但注图线之间不能交叉,图注要尽量排列整齐。

五、实验注意事项

1.使用显微镜时,目镜、物镜上落有灰尘时严禁用手指擦拭,需用专用的擦镜纸擦拭,防止汗水污损镜头。

2.严禁自行拆卸显微镜,防止零件丢失及损坏。

3.生物绘图法中除了轮廓线以外,其余表现物体立体感、大小、厚度、形态的唯一形式是打点,使用HB铅笔打点来表现光线明暗。打点要圆,不可拖尾,更不能忽大忽小,也不可两点重合成短线。

六、作业

1.低倍镜与高倍镜的用途各是什么?哪个镜头看的范围更大?造成这种差异的原因是什么?

2.为何在使用高倍镜前要将观察的部位调节至视野中央?

3.使用生物绘图法绘制任意装片1/4的图像。 rZMHhgM2U42y4S7jRFlmbPNpJco0fxMfKpFMJs473/TXy1qB/cUH8/B9KNQZ5fHE

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