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第二章
血细胞的免疫表型

血细胞的生成过程中,除形态学有特征性的变化可以通过形态学染色而鉴别识别外,还有一些功能性的结构变化,这些多是蛋白分子层面的变化,因而普通形态学染色无法观察到,但通过免疫标记技术可以清晰显示出来。这些成分和形态学特征一样,可以显示细胞分化、发育的过程以及是否属于正常发育或病理性变化。因此将这些血细胞胞膜或胞内分子称为分化抗原。各种分化抗原组成各类血细胞表达谱,称为血细胞的免疫表型(immunophenotype)。

分化抗原是造血细胞在正常分化成熟的过程中,不同系列、不同分化阶段及活化过程中出现或消失的细胞表面标志。人类白细胞分化抗原(human leukocyte differentiation antigen,HLDA)工作组对分化抗原进行统一编号,依据以单克隆抗体鉴定为主的聚类分类法,将抗体识别的同一种分化抗原归为同一个分化群(cluster of differentiation,CD),这就是CD的由来。

一、概述

流式细胞术(详见本书第五章)检测血细胞免疫表型是将免疫表型分析技术提高到系统和高信息量的阶段,尤其适用于血液病进一步分类的诊断与鉴别诊断,同时提供更多的预后参考信息。血细胞的免疫表型分化发育规律具体如下。

1.粒细胞分化抗原变化规律

粒细胞各期抗原表达特点见表2-1。

表2-1 粒细胞各期抗原表达特点

注:-,阴性;dim,弱阳性;+/-,部分阳性、部分阴性;+,阳性;++,强阳性;+++,极强阳性。

2.单核巨噬细胞分化抗原变化规律

单核巨噬细胞各期抗原表达特点见表2-2。

表2-2 单核巨噬细胞各期抗原表达特点

注:-,阴性;dim,弱阳性;+/-,部分阳性、部分阴性;+,阳性;++,强阳性。

3.淋巴细胞分化抗原变化规律
(1)T细胞各期抗原表达特点见表2-3。

表2-3 T细胞各期抗原表达特点

注:-,阴性;dim,弱阳性;+/-,部分阳性、部分阴性;+,阳性;++,强阳性。

(2)活化T细胞变异表型见表2-4。

表2-4 活化T细胞变异表型

(3)B细胞各期抗原表达特点见表2-5。

表2-5 B细胞各期抗原表达特点

注:-,阴性;dim,弱阳性;+/-,部分阳性、部分阴性;+,阳性;++,强阳性。

淋巴结套区主要由初级滤泡的小B细胞构成,除表达成熟B细胞标志外,还表达IgM、IgD、CD21和 CD23。

4.红细胞分化抗原变化规律

红细胞起源于骨髓造血干细胞,在EPO等细胞因子作用下经红系祖细胞阶段,分化成为原始红细胞、早幼红细胞、中幼红细胞、晚幼红细胞,最后晚幼红细胞通过脱核而成为网织红细胞。

红细胞各期抗原表达特点见表2-6。

表2-6 红细胞各期抗原表达特点

注:-,阴性;dim,弱阳性;+,阳性;++,强阳性。

5.巨核细胞分化抗原变化规律

巨核细胞各期抗原表达特点见表2-7。

表2-7 巨核细胞各期抗原表达特点

注:-,阴性;dim,弱阳性;+/-,部分阳性、部分阴性;+,阳性;++,强阳性。

二、结果的临床解读

血细胞免疫表型是指用抗原、抗体特异性结合显示的方法对骨髓、外周血、体腔液、淋巴组织中的正常或异常血细胞进行针对膜表面、胞质内分化抗原或功能性分子、蛋白的表达进行检测、分析、解读,包括对正常血细胞亚群分析、异常血细胞的系列归属,分化阶段、功能状态、抗原表达谱的分析及特异性表型标志物准确计数特殊血细胞等。在基因的调控下,血细胞在分化、发育和成熟过程中,血细胞的免疫表型为规律性的变化。在血液病时血细胞免疫表型的规律性会发生异常改变。

目前,在血液肿瘤的诊断、疗效观察中血细胞免疫表型检测已成为常规检查项目,对血液病肿瘤及亚型的诊断、分型具有重要价值,是MICM[细胞形态学(morphology)、免疫学(immunology)、细胞遗传学(cytogenetics)和分子生物学(molecular biology)]综合诊断中重要条件和技术之一,并且可为疗效和预后评估提供信息。在髓系肿瘤中,白血病细胞的免疫表型表达谱是疾病诊断的重要组成部分,可协助临床对急性髓细胞性白血病(acute myelogenous leukemia,AML)及亚型明确诊断,特殊的表型特征还可能提供细胞遗传学信息,如表达CD19/CD56的AML有可能存在t(8;21)及 RUNX RUNX1(ETO)融合基因。血细胞免疫表型应用在淋巴细胞肿瘤,可协助鉴定细胞的系列(B、T或NK细胞)及其克隆性,同时提供预后信息、靶向治疗的靶点,如存在CD20阳性的B细胞肿瘤,可选择CD20抗体药物用于靶向治疗;CD19阳性的B细胞肿瘤,其CD19可作为CAR-T治疗的靶点。血细胞免疫表型检测获得的表型表达谱可提供血液肿瘤治疗后微小残留病(minimal residual disease,MRD)检测的标志物信息。

成熟红细胞中CD55、CD59的缺失是阵发性睡眠性血红蛋白尿症(paroxysmal nocturnal hemoglobinuria,PNH)的特征之一。CD3、CD4、CD8、CD56/16、CD19 组合在一起进行淋巴细胞亚群检测可了解免疫细胞数量和组成结构,用于机体免疫状态评估、先天性或获得性免疫缺陷病诊断。

(岳保红) bKbTA/5zlfZnxMESt1EerLudOJtYipKKVk4jbYZiDQ2tx12R8bc6mH1O8c+bFWG0

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