余某,女,33岁,孕27周,于2018年2月12日来浙江中医药大学附属第一医院产检体检时示总胆汁酸(total bile acid,TBA)为21μmol/L,余肝功能指标未示明显异常,且无瘙痒等其他相关症状,医嘱静脉注射腺苷蛋氨酸1 000mg/d,适当卧床取侧卧位以增加胎盘血流量,定期复检肝功能、血胆汁酸了解病情。
余某于同年2月19日复查示TBA为50.3μmol/L,余肝功能指标无殊,且无瘙痒等其他相关症状,医嘱同前。
为防病情恶化,时隔两天,2月22日余某再次于浙江中医药大学附属第一医院复查TBA,结果示33.9μmol/L。
主治医生及患者对三次TBA的结果差异表示不解,三次测定均为空腹,生活方式、用药习惯等均无较大改变,结果却有较大差异,特别是第二次TBA的结果(>40μmol/L),临床上提示病情较重。
同事将2月19日标本找出来进行重测,TBA结果为34.7μmol/L,今天的标本复测后差异不大。
浙江中医药大学附属第一医院检验科使用的TBA试剂为新更换的B厂家试剂,方法为酶循环法,使用前进行过试剂性能验证,在精密度、正确度、分析测量范围和可报告范围等方面均表现良好。
初步怀疑为仪器样本针或试剂针的携带污染,查询仪器数据,前一吸取标本的TBA在正常范围内,前一吸取R1试剂为游离脂肪酸(NEFA),前一吸取R2试剂为L-γ-谷氨酰基转移酶(GGT)。
经临床测试发现,携带污染主要来自于R1试剂针的NEFA试剂,可能是NEFA试剂中含有高浓度的胆酸钠成分,当试剂针携带极其微量NEFA试剂成分,就会造成严重的携带污染。于是,在TBA吸取前添加R1针的碱性液特殊清洗,携带污染排除。
循环酶法测定TBA,具有方法简便、灵敏度高、对仪器管道无污染等优点,使测定的自动化程度越来越高,也为临床大规模开展检测创造了条件。但是,在使用全自动生化分析仪过程中,试剂针总是要同各种不同的试剂接触。一般的生化项目分析仅需要几微升体积的标本,而试剂的加样体积往往需要几十至几百微升,按常规的清洗,难以彻底清洗干净。如果前一分析项目的试剂组分中含有对后一分析项目中待测物质有干扰的成分,而待测物质的浓度与之相比又很微量时,极易造成分析项目之间的携带污染。
由于试剂针携带造成TBA结果假性增高的报道屡见,有报道称可能由于试剂中胆酸钠成分,有学者发现试剂中的抗坏血酸氧化酶成分会干扰TBA测定,干扰项目常见于总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、肌酐(Cr)等。NEFA干扰TBA测定的报告还未见到,原因也不很明确,笔者认为,可能跟NEFA使用Trinder反应有关,有待进一步研究。
(许江燕)
[1]陈继中,李旭光,唐吉斌.试剂携带污染对血清总胆汁酸测定结果的影响及消除措施 [J].检验医学,2006,21(3):228-230.
[2]魏利平.20项生化项目对总胆汁酸测定的项目间污染分析[J].检验医学与临床,2013,6(10):1431-1433.