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前不久，在生化检验过程中，发现一患者ALT 437.2U/L、AST -9.7U/L，查看历史结果，发现前一天ALT 30U/L、AST 24U/L，引起笔者重视。查看一下仪器报警信息和反应曲线，ALT报警提示“*”，AST报警提示“G”；然后用蒸馏水稀释2倍，ALT 1 108.4U/L，AST 50.1U/L，ALT报警提示“F”，AST报警提示“*”；接下来，用蒸馏水稀释5倍，ALT 430.8U/L，AST 1 126.7U/L，AST报警提示“F”；再接下来，用蒸馏水稀释10倍，ALT 222.3U/L，AST 600U/L，AST报警提示仍然是“F”；最后，用蒸馏水稀释20倍，ALT 107U/L，AST 290.5U/L，ALT、AST均无报警提示。
与临床医生沟通，得知患者主诉是发热伴咳嗽2d，但是此患者病情发展较迅速，入院当天：ALT 30U/L、AST 24U/L、CRP 54.93mg/ml、PCT 0.18ng/ml、WBC 14.72×10 9 /L、PT 13.2s、APTT 28.2s、FIB 3.72g/L、CREA 81.36μmol/L。一天后复查：ALT 2 154U/L、AST 5 810U/L、CRP 102.3mg/ml、PCT 14.17ng/ml、WBC 22.28×10 9 /L、PT 82.8s、APTT 74s、FIB 1.28g/L、CREA 363.4μmol/L。可能是某种病原体感染肺部，发生脓毒血症，导致感染性休克，最终引起感染性多器官功能障碍综合征致患者死亡。虽该患者病情发生发展相当快，没有来得及做更深入的研究，但本文意在分享AST、ALT底物耗尽现象的识别及防范重要性。
本案例中，患者AST结果是负值，而且有既往结果和错误报警信息，引起了检验人员的重视。试想，假设该患者没有同步检测AST，只检测ALT项目，结果不是负值，而且也没有既往结果和错误报警信息，很有可能会将错误的结果发出去。为了防止这种现象发生，笔者建议生化仪器中需要提前设置好参数，完善底物耗尽监测和报警提示功能。当然，合适的参数设置极其重要，例如，对于反应过程吸光度呈升高的酶类项目，我们应该在参数设置画面设置合理的高限值；相反，对于吸光度呈下降趋势的项目，应该设置合理的低限值。同时，我们在选择试剂时，一定要注意试剂本身的质量，认真评估试剂的线性范围。所以，在平时工作中，生化项目设置线性范围参数和DM2中间件报警提示十分必要作用，本文就是根据错误提示及时发现了底物耗尽的问题。相比而言，底物耗尽的处理却是很简单的，只需要用生理盐水（或去离子水）进行适当的稀释，然后乘以相应稀释倍数即可。值得一提的是，标本稀释并不是无限制的，稀释倍数越大引起的稀释效应和误差可能就越大，一般而言阅读试剂说明书推荐的最大稀释倍数，严禁超试剂说明书范围使用，当然实验室应对试剂最大稀释倍数进行有效验证（临床可报告范围）。本文笔者选择5倍稀释的ALT换算结果作为最终结果，20倍稀释的AST换算结果作为最终结果。最终报告结果为ALT 2 154U/L，AST 5 810U/L。
通过AU5800线性范围和DM2中间件参数设置，最大可能地对AST、ALT底物耗尽现象进行及时的识别和防范，最大限度的发挥全自动生化仪的功能，在平时工作中减少一些不必要的麻烦和提高结果的准确性，实现了分析的准确性和保证了检验质量。笔者认为AST、ALT底物耗尽现象有常见的两种情况：①样本中酶的活性远超线性范围，底物几乎是瞬间被耗尽，零级反应期极短，设定的常规吸光度读数点完全不在零级反应期内，即反应界限内的吸光度点数零，此时甚至可能会测出负值（很容易就能发现）；②样本中酶的活性超过线性范围较多，底物在较短时间内是被耗尽，零级反应期较短，设定的常规吸光度读数点大部分不在零级反应期内，此时会造成结果严重偏低（不易发现，故可能导致严重后果）。
为了避免底物耗尽带来的误差，笔者建议：①在审核报告时，要综合考虑整张报告单各个项目的结果，对有疑问或者矛盾的项目结果，查看反应曲线进行评估；②可以根据设置好的底物耗尽相关参数，查看仪器自动报警信息和代号，寻找解决方法；③及时与临床医生沟通，结合患者的情况评估检测报告是否存在偏差。
正如赵可伟专家所说：在生化检验工作中经常会遇到特殊病例。本文通过把项目反应曲线和仪器报警信息以及DM2中间件提示相结合，进行报道AST、ALT底物耗尽现象的识别及防范，能够帮助更多检验人通过阅读本病例，学习并重视底物耗尽现象，从而减少报告错误和提高检验结果的准确性。
（苏 镜 赵可伟）