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隐藏在自来水中的秘密

【案例经过】

一段时间以来，临床科室的一位老主任总是觉得检验科“淀粉酶”检测结果有问题。一天，他送了一份尿标本到检验科做“尿淀粉酶”检测，检测结果是17U/L，这回他拿到了证据，直接把检验科告到了院长处。院长把检验科主任和临床生化室组长等人员召到了办公室，看到那位老主任坐在沙发一端，大家丈二和尚摸不着头脑。还是院长先开口：“大家先坐下，这件事情检验科需要高度重视。”接着他让老主任把事情原委讲了一遍。原来，老主任近段时间一直怀疑检验科“淀粉酶”检测不准确，为验证自己的想法，他接了一杯自来水以尿的名义送检验科化验，结果竟然检测出淀粉酶为17U/L。由此证实自己的判断是对的。院长要求检验科尽快查找问题产生的原因，并及时整改上报。

检验科主任、生化室组长带着问题回到科室，思考问题原因。

【沟通体会】

经仔细核查该份标本当日生化检验情况，该样本系采用VITROS 350干化学分析仪检测，室内质控在控，当日检测的所有淀粉酶除该份标本结果低于参考值外，绝大多数在参考区间，少部分结果超过上限，未发现其他异常情况。那么，自来水里何以会检测出淀粉酶呢？带着这个疑问，生化室组长找出了干片法测定淀粉酶的试剂说明书。

VITROS 350淀粉酶测定原理：淀粉酶测定干片（速率法）为涂覆在聚酯基材上的多层分析成分。在37℃条件下滴加10μl患者样品在干片上，通过扩散层均匀地分布到试剂层，扩散层含有反应所需的已染色淀粉底物（染剂共价结合到支链淀粉）。样品中的淀粉酶催化该已染色淀粉的水解反应，生成更小的染色糖类。然后，这些染色糖类分散到试剂下层，分别在2.3min和5min时，通过反射光光度法在540nm波长测定试剂层中已染色糖类的反射强度，两次干片反射强度读数的差与样品中的淀粉酶活性成正比。

试剂说明书指出AMY测定的参考区间及可报告范围见表5-1。

对于超出报告范围的应做样本稀释：使用等渗盐水稀释，重新分析，结果乘以稀释倍数，获得原始样本中淀粉酶活性的估算值。

要了解该方法需要先理解酶促反应的一些特性，在反应刚开始时有一段延迟期，在该期内，酶刚与底物接触，反应产物的增加或底物的消耗较少，吸光度（或反射光）的变化不明显。待反应进行一段时间后，反应进入线性期（也称为零级反应期），此时底物浓度仍处于过量状态，在此阶段产物的增加或底物的消耗达到一个稳定的状态，即单位时间内底物的消耗量或产物的生成量是恒定的，此时的反应速度与底物浓度无关，只与酶活性有关，通过检测这段时间的产物生成量或底物消量来计算出酶的活性。随着时间的延长，底物因酶的催化消耗、产物的增加而出现逆反应，反应的产物可能有抑制酶反应的作用，酶促反应缓慢，反应速率变慢，偏离了线性反应期，进入一级反应期，不成线性。速率法就是通过测量零级反应线性期内的吸光度（或反射光）变化来得到被测物浓度或活性值。

为了计算酶活性浓度，必须根据线性反应期的反应速率才能准确计算出酶活性浓度，否则将导致酶活性误差。在底物浓度远大于酶浓度时，酶促反应随酶浓度的增加而增加，即反应速率与酶的浓度成正比。在病理情况下，酶浓度过高时，底物过早而且过多地被消耗，影响酶活性测定，故需用生理盐水或其他缓冲液进行适当的稀释。在延滞期、非线性反应期所测得的结果不准确，一般偏低。

由此原理可知，酶促反应毕竟仍属于化学反应。不论该反应体系中酶和底物的配比如何，VITROS 350干化学分析仪均会在设定的时间内（2.3min和5min时）读取两次干片反射光强度，计算其读数差值，换算为淀粉酶活性。自来水中虽不含“淀粉酶”，但在该反应中，仪器仍可以“测出”其活性，只不过其活性明显偏低，正如试剂说明书所提示的超出可报告范围，检测数值已不可靠。

真相清楚了，检验科主任和生化室组长带着相关资料找到临床老主任做了解释说明，面对如此结果，老主任表示自己太过于武断，现在终于恍然大悟。

“临床意识”强调检验科工作必须与临床医疗工作相结合，检验工作人员不仅要具备基础医学知识和实验技能，还要学习临床医学知识，要不断提高自身的学术水平和完善知识结构，要多走出实验室，与医护人员合作，参加临床会诊与查房，共同探讨疾病的病因学特点发展规律，病情变化与实验室指标的关系。当临床对检验质量提出疑问时，应立即对这方面的工作和有关职责进行审核，看问题出在哪里，及时制定纠正措施，以最快的速度改进。就检验医生而言，对于检验方法、检验结果，不仅要知其然，还要知其所以然。不能仪器做出什么结果就机械地报告什么结果，应根据质量控制情况分析结果的准确性，排除影响结果的各种因素后，才能给临床提供可靠的数据。

正如周林华专家所说：检验结果会有误差，病情也是千变万化，不能单靠某个检测结果分析病情，临床医生若遇到有疑问的数据请及时联系检验科，必要时重复检测，尤其对于一些似乎与病情不相符的数据更要核实，防止贻误诊治。

不能排除有的医生单凭自己的经验就断定检验结果有问题，而有些检验人员也凭自己的资历认为检验结果绝对正确，这都是不可取的。医学本来就是一门不断探索的学科，有时很难说谁对谁错。检验人员要善于与临床沟通，临床医生也可相信检验科，不要因为偶尔的检验结果误差而全盘否定检验科的工作，应该客观地看待每个问题。

（刘春林　周林华） PufZXoSFQsgf+GfJ9E+hiYV0v7dWYw8ip6g7z8Ntk95x9ENICzd7SIzajSRDLsEq