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1.血气测定应以动脉血为准，肝素（100U/ml）抗凝。
2.采血部位。可通过动脉穿刺或留置导管采集血标本进行血气分析，间断测定；也可以使用放置在血管内的传感器连续测定。①动脉穿刺：通常可通过经皮穿刺桡动脉采集动脉血。应尽可能避免穿刺肱动脉和股动脉。经皮穿刺常会引起患儿躁动，可能导致PaO 2 测量结果低于稳定状态时。也可穿刺颞动脉、脐动脉。动脉导管未闭（patent ductus arteriosus，PDA）可以导致右上肢和头面部/颈部PaO 2 高于身体其他部位。②毛细血管和静脉采血：如果患儿灌注很差或采血困难，可从动脉化的毛细血管采样，但结果解释要慎重，一般不用于危重新生儿评估。毛细血管样本会严重低估PaO 2 ，不能用于判断氧合情况。毛细血管采血不能准确反映新生儿动脉血氧的值，但可用于监测状态稳定的新生儿的PCO 2 和酸碱平衡情况。③静脉采血：对于评估动脉PaO 2 是无用的，但是与毛细血管采血一样可以监测PCO 2 和酸碱平衡趋势。静脉采血样本不能用于危重新生儿的评估。④留置动脉测压管：留置动脉测压管可以在不引起新生儿的躁动情况下反复多次采样，也可以持续监测动脉血压。对于新生儿，首选的置管部位是脐动脉或桡动脉，也可选择足背动脉。临床上常在严重气体交换障碍（例如，严重的RSD或持续性肺动脉高压）或休克时留置动脉导管。⑤持续血管内血气监测：间歇采样分析很难跟踪病情变化，增加采血次数会导致早产儿严重失血。持续血管内PaO 2 监测是可行的，结果可靠，但是这些电极的准确性随时间而受影响，这是由于纤维蛋白的沉积所致。已有可以持续监测PO 2 、PCO 2 、pH和温度的血管内导管。在穿刺的时候会有很多困难，但是可以提供持续的血气分析数值。
3.采血应在患儿安静时。
4.样本采集后不应与空气接触，并立即送检，于10分钟内测定，如不能立即送检应置于4℃冰箱中待检，但亦应在2小时内检测。气体通过塑料注射器发生扩散可能造成误差。如果在15分钟内进行分析且样本放在冰袋内保存，这种误差通常不明显。
5.采集的血液中混有气泡、使用肝素作为抗凝剂，以及采血使用的注射器类型，都可影响动脉血气的结果（PaO 2 和PaCO 2 ）。当注射器中气泡占血液体积超过1%～2%时可能产生误差，造成动脉PaO 2 假性偏高，并低估真实的动脉PaCO 2 。可通过无振荡地轻轻去除气泡，以及尽快分析样本来减小误差。
6.酸性的肝素仅使pH发生小幅变化，但肝素溶液的稀释作用能导致PaCO 2 明显降低，这种变化直接取决于肝素溶液量与血液量的关系。因此，肝素溶液的用量应尽量少，或者使用含干肝素的注射器。