5.B _el 06亚型鉴定1例

一、简要病史

患者，女性，34岁，因“子宫肌瘤”入院，手术备血时发现ABO正反定型不一致。孕3产1，既往无输血史，无家族遗传性疾病史。

二、实验室检查

（一）血型血清学常规检查

1.血型鉴定

ABO正反定型不一致，RhD阳性，结果见表1-9。

2.抗体筛查

阴性。

（二）血型血清学特殊检查

1.吸收放散试验

患者红细胞检出B抗原。

2.唾液型物质凝集抑制试验

只检测出H物质，无A和B血型物质。血型血清学结果：初步判断为B亚型，其血清学格局符合B _el 表型。

（三）血型分子生物学检测

1. ABO 基因PCR-SSP分析

结果见图1-6，患者 ABO 基因型为 B / O ₂ 型。

2. ABO 基因测序

对患者 B 基因第6、7外显子基因测序进行分析，参照ISBT红细胞免疫遗传学和血型术语予以 ABO 等位基因的命名，按惯例以 ABO * A1.01 等位基因标准序列为参考序列，该患者存在8个核苷酸杂合，即297A/G、526C/G、657C/T、703G/A、796C/A、803G/C、905A/G和930G/A。与 B.01 基因序列比较，仅存在c.905A>G突变（图1-7）。检索血型抗原基因突变数据库 ^［1］ ，该序列与 BEL.06 和 BX.02 基因的序列完全一致，由于该患者的血清学结果与B _el 亚型一致，所以其基因定为 ABO * BEL.06 ^［2］ 。

三、诊疗经过

患者入院第2天行子宫肌瘤剔除术，术前备O型洗涤红细胞，手术过程顺利，出血200mL，术中未输血。

四、相关知识链接

1900年Landsteiner发现了人类第一个血型—ABO血型系统 ^［3］ 。 ABO 基因有7个外显子和6个内含子，包含编码序列1062个碱基 ^［4］ 。 A101 和 B101 两个等位基因高度同源，两者在氨基酸编码区仅有7个核苷酸的差异，其中297A>G、657C>T和930G>A均位于密码子的摇摆位置，不引起氨基酸的改变；526C>G、703G>A、796C>A和803G>C引起4个氨基酸的替换，从而使得酶特异性发生显著变化 ^［5-6］ 。

1964年，Reecl等发现1例需通过吸收和放散试验才能证明红细胞上有A抗原存在的个体，命名为A _el 型。同样需通过吸收和放散试验才能证明红细胞上有B抗原存在的个体，被命名为B _el 型 ^［7］ 。B _el 型是较少见的ABO亚型，血型测定时极易误判为O型。临床若将有弱抗原的献血者的红细胞错误定型为O型而输注给O型患者，则可能会引起严重的输血反应 ^［8］ 。但将B _el 型患者误定为O型，输注O型红细胞，通常不会引起明显的不良反应。

五、案例点评

本案例采用常规血清学方法不能正确鉴定ABO血型，很容易误定为O型，通过吸收放散试验确定其红细胞上含有B抗原，但是唾液中不含有B物质，与B _el 亚型血清学特征相符。 ABO 基因分型证实存在 B 基因。通过 ABO 基因测序存在297A/G、526C/G、657C/T、703G/A、796C/A、803G/C、905A/G和930G/A杂合，与 B.01 基因序列比较仅存在c.905A>G突变，而且该患者的血清学结果与B _el 亚型一致，所以定为B _el 06。

ABO亚型经常在ABO正反定型不一致或者凝集强度改变的情况下发现，其在临床输血中引起定型和配血困难，严重影响输血的安全性和有效性，在临床上应引起重视。当ABO血型正反定型不一致或者血清学检测结果不符合孟德尔遗传规律，应采用分子诊断技术进行辅助诊断，保证临床输血安全。

参考文献

1.PATNAIK S K, HELMBERG W, BLUMENFELD O O. BGMUT: NCBI dbRBC database of allelic variations of genes encoding antigens of blood group systems［J］. Nucleic Acids Res, 2012, 40(Database issue): 1023-1029.

2.杜文竹，章旭.ABO亚型Bel06的分子生物学鉴定［J］.中国当代医药，2015，22（30）：166-167+170.

3.YAMAMOTO F, MCNEILL P D, YAMAMOTO M, et al. Molecular genetic analysis of the ABO blood group system: 3. A(X)and B(A)alleles［J］. Vox Sang, 1993, 64(3): 171-174.

4.YAMAMOTO F, MCNEILL P D, KOMINATO Y, et al. Molecular genetic analysis of the ABO blood group system: 2. cis-AB alleles［J］. Vox Sang, 1993, 64(2): 120-123.

5.周英，李健，吕文彬，等.Bel亚型的血型血清学特征及其遗传背景分析［J］.中国生物制品学杂志，2009，22（11）：1130-1131+1144.

6.段福才，王明禄，周克礼，等.ABO血型B2和AB2亚型血清学特征及人群分布研究［J］.中国实验血液学杂志，2010，18（5）：1331-1334.

7.DREXLERHG, UPHOFFCC. Mycoplasma contamination of cell cultures: Incidence, sources, effects, detection, elimination, prevention［J］. Cytotechnology, 2002, 39(2): 75-90.

8.王燕菊，蒋学兵，陈丽，等.Bel亚型1例报告［J］.北京医学，2015，37（2）：164. 0uIYAqmLS7bHMTqSvtyeQhhwDqCUiNi970U7IWMCq1Pllc1GB8rvChQW1yaTh3/a