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患者，女性，34岁，汉族，孕38 +4 周，因“妊娠期血小板减少”提前入院待产，常规血型鉴定时发现B抗原减弱。既往无输血史、妊娠史。
ABO血型鉴定，B抗原减弱，见表1-7。
表1-7 ABO血型鉴定结果
血型血清学结果考虑B亚型，但无法确认亚型类别。
患者 ABO 基因型为 B / O1 型。
ABO 基因位点扩增方法及扩增引物序列参考文献 ［1-3］ ，直接测序分析发现第6外显子存在261delG，分析存在O基因，第7外显子存在425 T/C、526C/G、657C/T、703A/G、796C/A、803G/C和930G/A 7个位点杂合。
多个克隆验证，序列比对得到两个等位基因 ABO * B3.05 和 ABO * O.01.01 。参照ISBT红细胞免疫遗传学和血型术语予以 ABO 等位基因的命名，按惯例以 ABO * A1.01 等位基因标准序列为参考序列，B3.05等位基因序列与 A1.01 等位基因比对存在297A>G、425T>C、526C>G、657C>T、703A>G、796C>A、803G>C和930G>A 8个位点基因突变； B3.05 等位基因序列与 B1.01 等位基因比对仅第425位碱基为T>C突变（c.425T>C），导致第142位蛋氨酸替换为苏氨酸（p.Met142Thr）。B3.05等位基因序列与 A1.01 等位基因和 B.01 等位基因比对结果，见表1-8。先证者直接测序与基因克隆425碱基突变峰图，见图1-5。
分子生物学结论：该患者ABO血型基因型为 ABO * B3.05 / O.01.01 。
表1-8 B3.05 等位基因序列及 A1.01 等位基因和 B.01 等位基因比对结果
注：AA pos.Amino acid position；AAvar.Amino acid variation；NC.No change。
图1-5 先证者直接测序与基因克隆nt425碱基突变峰图
注：A.
A1.01
等位基因；B.先证者直接测序的基因序列；C.先证者基因克隆的基因序列
患者入院第1天，血小板46×10 9 /L，应用糖皮质激素和免疫球蛋白治疗，同时输注AB型血小板2U，未发生输血不良反应。入院第3天行子宫下段剖宫产术，术前常规备O型洗涤红细胞和AB型血小板，术中未输血，患者术后未发生出血现象。
目前发现的 ABO 等位基因已达到350多个，其中 B 3 等位基因13种。NCBI血型抗原基因突变数据库显示 ［4］ ，425位碱基T>C突变有两种等位基因，分别是 ABO * AEL.06 ［5］ 和 ABO * B3.05 ［6］ 。含有c.425T>C突变的 AEL . 06 等位基因导致A糖基转移酶活性的明显下降，产生仅能在吸收放散试验中才能检出的A el 表型。 B 基因的c.425T>C突变导致B 3 表型。
B 3 亚型通常具有独特的混合外观凝集特性，表现为B 3 的红细胞与抗-B或抗-AB反应时，在显微镜下呈现一些小的凝集团，而凝集团块周围伴大量的游离红细胞。据报道B 3 亚型在中国台湾地区具有较高频率 ［1］ ，而在中国大陆地区B 3 变异型频率较低 ［7］ 。许先国等 ［8］ 报道2例个体的 B305 等位基因是与A 1 的等位基因（ A1.01 或 A1.02 ）组合遗传而表现为B 3 亚型。B 3 亚型血清学出现混合外观凝集的原因至今尚不明确。对B 3 红细胞进行进一步的血清学和细胞学研究，结合其 ABO 基因遗传基础，将有助于进一步了解这类血型的形成机制。
本案例患者在血清学上表现为比正常B抗原凝集稍弱、H抗原增强，未出现B 3 亚型特异性的混合外观表现，因此很难通过血型血清学结果做出B 3 的判断，最终通过分子生物学检测确认为 ABO * B3.05 / O.01.01 ［9］ 。B 3 患者输血时很难找到同型血液，由于B 3 血液中通常不含抗-B，选择输注B型血液成分即可。本例患者由于妊娠期血小板减少症，选择输注了AB型单采血小板，可能不是最佳的选择。虽然输注AB型单采血小板相对更安全，但由于患者血液中含有抗-A抗体，会与血小板上的A抗原结合，导致血小板被过早清除。因此，条件允许情况下，还是建议优先输注B型单采血小板，以获得更好的输注效果。
1.戚新，章旭，刘显智，等.1例ABO血型cisAB06亚型的基因序列分析［J］.中华医学遗传学杂志，2013，30（2）：172-175.
2.李归冀，章旭.两例ABO变异型Bw亚型的分子遗传学分析［J］.中华医学遗传学杂志，2013，30（6）：733-735.
3.林凤秋，章旭，李剑平.α-1，3半乳糖基转移酶基因905A>G突变的研究［J］.中华医学遗传学杂志，2014，31（1）：82-84.
4.PATNAIK S K, HELMBERG W, BLUMENFELD O O. NCBI dbRBC database of allelic variations of genes enoming antigens of blood group systems［J］.Nucleic Acids Res, 2012, 40(Database issue): 1023-1029.
5.YU Q, DENG Z H, WU G G, et al. Molecular genetic analysis gr a novel Ael allele of the ABO blood group system［J］. J Hum Genet, 2005, 50(12): 671-673.
6.许先国，洪小珍，刘瑛，等.一种新的B3变异型相关的B糖基转移酶基因M142T突变研究［J］.中华医学遗传学杂志，2009，26（3）：254-257.
7.向东，刘曦，郭忠慧，等.上海地区中国人群中ABO亚型的研究［J］.中国输血杂志，2006，19（1）：25-26.
8.杰夫·丹尼尔.人类血型［M］.朱自严，译.北京：科学出版社，2007.
9.李归翼，章旭.ABO变异型B305血型基因亚型的鉴定及序列分析［J］.中国实验血液学杂志，2016，24（5）：1563-1566.