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手术的顺利完成离不开参加手术的每位成员，合理分工、默契配合、互相协作是手术成功的关键。手术人员分工如下：
负责整个手术的实施及操作，需制订合理的手术计划及操作步骤。一般而言，在腹部手术中，手术者站在患者右侧，盆腔手术可站在患者左侧，以手术操作方便为宜。
站在手术者正对侧，协助手术者完成术野暴露、组织分离、结扎、止血等。
站在手术者左侧，协助暴露术野、拉钩、剪线、吸机吸引以保持术野洁净等，对于大型开腹手术，有时还需要第三助手。
目前腹腔镜手术已日趋常规化，扶镜助手的作用极为关键。一般扶镜助手站在患者两腿之间或与主刀同侧，负责术野暴露、维持镜面洁净等。
亦称洗手护士，一般站在手术者右侧器械桌旁，负责整个手术过程器械、物品、敷料的供给及传递；此外，在手术开始及结束前与巡回护士完成器械、物品及敷料的清点、核对等。
在台下负责整个手术过程器械、物品、敷料等的准备及供给，同时根据手术需要，协助完成输血、补液、照明、腹腔镜及能量平台设备连接及维护、手术标本的登记送检等。
负责手术患者的麻醉、术中监测及病情变化时的处理及抢救。应记录手术全程的患者生命体征变化数据。