1. 能描述显微镜的组成。
2. 会使用显微镜观察上皮组织的微细结构。
1. 光学显微镜。
2. 切片:单层柱状上皮、变移上皮切片。
1. 分组示教。8~10人一组,教师边讲解边操作示范。
2. 学生练习。学生每人1台显微镜,自己观察,学生互相评估对方是否能够在低倍镜及高倍镜下观察到切片内容,教师巡视答疑。
3. 考核小结。教师任意抽查学生观察指定切片进行考核并给予评分。最后,教师归纳小结。
4. 作业布置。
(1)根据显微镜下所看内容完成实训报告。
(2)完成课后练习。
主要学习显微镜的使用及观察上皮组织的镜下形态。
1. 机械部分。
(1)镜座与镜柱:显微镜的底座呈方形、马蹄形或圆形,其上方直立的柱形突起为镜柱。
(2)镜臂:显微镜的支柱,略呈弧形,是手握持的部分。
(3)镜筒:连在镜臂的前上方,镜筒上端装有目镜,下端装有物镜转换器。
(4)物镜转换器(旋转器):可自由转动,盘上有3~4个圆孔,是安装物镜部位。转动转换器,可以调换不同倍数的物镜,当听到“咔”的一声时,表示转换到位,方可进行观察。
(5)载物台:放置切片的平台,中间有一个透光孔便于光线通过,上方还有切片夹和推进器。切片夹可用来固定切片,推进器则用来左右、前后移动切片。
(6)焦距调节螺旋:显微镜上装有粗准焦螺旋和细准焦螺旋,大螺旋(粗调手轮)为粗准焦螺旋,小螺旋(微调手轮)为细准焦螺旋。有的显微镜粗细螺旋装在同一轴上,有的则分开安置。通过粗准焦螺旋可上下移动载物台,调节物镜与载物台之间的距离,调节幅度较大,通常用在低倍镜时,可先迅速找到物像。通过细准焦螺旋也可上下移动载物台,调节物镜与载物台之间的距离,但调节幅度较小,多在运用高倍镜时使用,从而得到更清晰的物像。
2. 光学部分。
(1)目镜:镜筒的上端,镜头上一般标有“5×”“10×”“15×”等放大倍数。
(2)物镜:旋转器的下方,镜头上一般标有“10×”(低倍镜)、“40×”(高倍镜)、“100×”(油镜)3种。
3.照明部分。
(1)聚光器:载物台的下方,能聚集光线、增强视野亮度。聚光器的后方一侧有升降旋钮,通过升降聚光器可调节视野亮度;底部还装有光圈,可开大或缩小,以控制进入视野光线的多少。
(2)光源:聚光器的下方,可通过亮度调节旋钮调节亮度。
1. 取镜。取镜时,用右手握住镜臂,左手托住底座,保持镜体直立,不可歪斜。
2. 放镜。将显微镜放置在实训台上时,动作要轻,使镜臂朝向自己,离实训台边沿10 cm左右。
3. 对光调节旋转器至低倍镜时可听到“咔”的一声轻响。双眼对准目镜,打开聚光器底部光圈,调节聚光器并转动亮度调节旋钮调节亮度,直至视野的亮度适宜为止。
4. 观察。
(1)先用肉眼观察切片是否完好,观察组织在切片上所处位置。将需要观察的组织切片正放到载物台上,用切片夹固定切片,调节推进器,把切片中有标本的部分移到透光孔上。
(2)用低倍镜观察,双眼通过目镜观察,同时旋转粗准焦螺旋,当视野中出现物像时,改用细准焦螺旋调节,直到看清物像。
(3)在低倍镜下找到物像后,再转换成高倍镜观察,同时调节细准焦螺旋,直到看清物像。
(4)如果高倍镜观察后仍需放大,可先下降载物台,调节螺旋器转换成油镜。在切片上滴加1滴镜油,调节螺旋器,上升载物台,侧面观察,使油镜镜头直接与油滴接触。双眼观察,同时旋转细准焦螺旋,直到看清物像。观察结束后,需用二甲苯擦拭干净镜头与切片。
5.整理。观察结束后,下降载物台取下切片,显微镜擦拭干净后,将物镜转成“八”字形,同时把聚光镜降下,以免物镜和聚光镜发生碰撞危险。
6.注意事项。
(1)搬动显微镜要慎拿轻放,使用显微镜要严格遵守规程。
(2)观察时应同时睁开两眼。右手书写者,以左眼从接目镜观察,以右手操纵粗、细调节器。用右眼和右手配合进行绘图或文字描述。
(3)显微镜必须经常保持清洁。机械部分可用纱布或绸布擦净;光学部分(反光镜除外)只能用擦镜纸轻轻擦拭,严禁用手或其他物品擦拭,以防污损。
(4)油镜使用后,应立即用擦镜纸蘸取少量清洗剂将镜头擦净。
(5)显微镜部件不得拆卸或互相调换,若有故障,应立即报告指导教师进行处理,不得自行修理。
(6)显微镜用毕,将显微镜恢复原样(转动旋转盘,使载物台中央的圆孔或低倍镜置于镜筒下方;转动调节轮,使载物台降至最低,罩上袋子),放回原处。
(7)由于制片关系,在视野中可能出现多个细胞重叠在一起、模糊不清或细胞折边等现象,因此,需寻找分离的单个完整的细胞进行观察。
(8)打扫实训室卫生前,必须将显微镜放入柜中,以免灰尘沾污。
1. 观察单层柱状上皮。
(1)肉眼观察小肠上皮切片,找到标本一侧有紫蓝色锯齿状结构,即为小肠黏膜部分。
(2)低倍镜下可见黏膜面有许多指状突起,为绒毛。绒毛表面有一层细胞,其细胞单层排列,为单层柱状上皮;柱状细胞间夹有空泡状结构,为杯状细胞。
(3)调至高倍镜下观察,可见细胞呈高柱状,单层排列,境界不清,核长卵圆形,长轴与细胞长轴一致,位于细胞基底部,胞质染成红色。杯状细胞胞质呈空泡状,核位于胞质下方,多为三角形,染色深呈紫蓝色。
2. 观察变移上皮。
(1)低倍镜下可在膀胱的腔面找出一层染色较蓝的上皮。
(2)调至高倍镜下观察,可见空虚时的膀胱上皮。上皮细胞层次较多,各层细胞形态也不同:基部的呈立方状或矮柱状;中间数层呈倒梨形或多边形;近表面的细胞体积大呈立方形,有的含2个核,着色深。扩张时的膀胱上皮变得很薄,只有2~3层细胞,细胞呈扁平或不规则形。
专业:_____ 班级:_____ 组别:_____ 姓名:_____
日期:_____ 指导教师:____ 分数:_____
1.人体形态结构和生理功能的基本单位是( )。
A.细胞
B.组织
C.器官
D.系统
2.将低倍镜换成高倍镜后,一个视野内( )。
A.细胞数目增多,体积变大,视野变暗
B.细胞数目减少,体积变小,视野变亮
C.细胞数目增多,体积变小,视野变亮
D.细胞数目减少,体积变大,视野变暗
3.功能完好的显微镜,把低倍镜换成高倍镜后( )。
A.先用粗准焦螺旋,再用细准焦螺旋
B.只用粗准焦螺旋
C.缓缓调节细准焦螺旋
D.先用细准焦螺旋,再用粗准焦螺旋
4.上皮组织的结构特点是( )。
A.细胞排列疏松
B.上皮细胞无极性
C.细胞间质多
D.细胞多,间质少
5.不属于单层上皮的是( )。
A.内皮
B.假复层纤毛柱状上皮
C.变移上皮
D.单层柱状上皮
6.分布于呼吸道内的上皮是( )。
A.假复层纤毛柱状上皮
B.单层立方上皮
C.单层柱状上皮
D.复层扁平上皮
图1-1 显微镜的结构
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画出单层柱状上皮镜下形态。
图1-2 单层柱状上皮镜下形态
染色方法:______ 放大倍数:______