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第三节
无病苗木的培育

柑橘栽培无病毒化是现代柑橘业发展的重要特征,完善柑橘良种无病毒苗木繁育体系是柑橘产业可持续发展的关键。无病苗木的培育是指无柑橘黄龙病等病害的苗木培育,要求用无病毒母本树的接穗和砧木进行繁殖,对柑橘黄龙病等病害的防治有重要意义。

一、母本树的选择与鉴定

采穗用的母本树特性要求与“第二节 嫁接苗的培育”部分所述的相同。为确保苗木不带病,培育无病苗木所用的母树应当栽植于纱网大棚内,并经常进行鉴定。病毒鉴定可通过农业部指定的果树脱毒中心进行,如设立在广东农业科学院果树研究所的华南热带果树脱毒中心。母本树的栽培管理要按照无病程序进行,及时淘汰变异植株。一般为了保证接穗不发生变异,原则上每株采穗用的母本树采穗时间不超过3年。

二、无病苗木的培育

1.育苗基地

育苗基地包括无病毒采穗圃、指示植物鉴定圃和无病毒苗圃。无病苗木的培育主要运用纱网大棚等设施进行,要求无昆虫传播病害,整个育苗过程完全在封闭的纱网大棚内完成。如果采用露地育苗,要求有良好的自然隔离条件,有高山、大河、湖泊等自然隔离屏障,周围2千米以上无芸香科类植物。

无病母本园用纱网封闭

纱网室内无病毒采穗圃

纱网室内指示植物鉴定圃

无病苗木的育苗过程在纱网封闭的无病育苗圃内进行

2.无病苗木的培育

无病苗木一般采用营养筒(袋)等容器育苗或露地育苗,比常规大田育苗要求更高。

(1)培育砧木

①砧木种子的采集和消毒:砧木种子要采自优良纯正品种或优良单株系,无检疫性病虫害。播前要进行种子消毒,先在保温容器内倒入57℃左右的热水,将砧木种子用纱网袋装好,置于50~52℃热水中预浸5~6分钟,取出后立即投入保温容器内处理50分钟,注意使水温保持在55℃ ±0.3℃。取出后立即摊开,稍晾干,放至温室待播。凡要接触已消毒种子的人员必须先用肥皂洗手。用于柑橘无病毒苗圃的常用工具要专用,枝剪和嫁接刀在使用于每个品种材料之前,用1%次氯酸钠溶液消毒。

②播种:砧木种子播种于苗床营养土中,苗床保持地温25℃以上,相对湿度保持在80%~90%。当温度超过30℃时,立即揭膜和喷水降温。苗出土后每隔7~10天喷1次杀菌剂(多菌灵或托布津等),防治立枯病、炭疽病和根腐病等。当苗高5厘米以上时开始追施0.1%~0.2%复合肥等稀薄液肥。

③砧木苗移栽:待苗高达15厘米以上时即可移栽。

④砧木苗的管理:移栽约15天后施1次稀薄液肥,以后每个月施肥1次。砧木苗生长期间要做好病虫防治工作。

(2)采穗母本树的培育与 采穗 采穗母本树应当是经过农业部指定的鉴定机构鉴定,确认为无病才能应用。采穗母本树定植于网室内,竖立标示牌,加强水肥管理,注意促进营养生长,以培养较多的充实健壮接穗。定植后第2年开始采集接穗,采穗限期为3年。采穗工具应经过消毒处理。操作人员应当衣着干净,用肥皂洗手。

砧木苗移栽入育苗容器中,整齐摆放在育苗场

采穗母本树定植区域标示牌

(3)嫁接 砧木苗高35厘米以上、主干10厘米高处的径粗达0.7厘米时即可嫁接。嫁接工具必须用洗衣粉洗净,再用10%~20%漂白粉消毒,用清水冲净后使用。嫁接人员用肥皂洗手,衣着干净。嫁接方法与“第二节 嫁接苗的培育”部分相同。

嫁接

套袋保湿

接芽萌发

接芽抽梢

嫁接成苗

(4)苗木出圃 按照农业部行业标准《柑橘脱毒苗》的规定,出圃的无病苗木嫁接高度大于10厘米。苗木出圃时,对苗木的品种、砧木、嫁接日期、出圃时期、定植去向等情况进行详细记载。

3.茎尖嫁接脱毒育苗

茎尖嫁接脱毒育苗是目前脱毒育苗的先进技术。主要通过在无菌条件下茎尖嫁接实现脱毒。具体方法是:

(1)砧木准备 将饱满的砧木种子剥去外种皮和内种皮,在0.5%次氯酸钠溶液加0.1%吐温-20的溶液中浸泡消毒10分钟,然后用无菌水冲洗3次,在无菌环境中播于含1%琼脂的MS植物细胞培养基(灭菌)的试管内,然后置于27℃ ±l℃下黑暗中培养。幼苗生长13~14天可用作茎尖嫁接的砧木。

(2)茎尖准备 在纱网大棚内采母本树萌发的长1~3厘米的嫩梢,去掉叶片,切下尖端长约l厘米的梢段,在0.25%次氯酸钠溶液加0.1%吐温-20的溶液中浸泡消毒5分钟,用无菌水冲洗3次。在无菌环境中,在双目解剖镜下,用刀将下部叶去掉,切下生长点带2~3个叶原基的茎尖,长度为0.14~0.18毫米的茎尖备用。

(3)嫁接方法 在无菌条件下,从试管中取出砧木苗,截顶,留1.5厘米长的茎,留根4~6厘米长,去子叶和腋芽。在双目解剖镜下于砧木近顶部一侧开方形切口,即横切1刀、竖切2刀,或在茎段上部用3刀切成一个“△”切口,深达形成层,挑去3刀间皮层,将茎尖置于砧木切口,茎尖切面与砧木的横切面相贴,即完成嫁接。

茎尖培养

嫁接

嫁接小苗

(4)茎尖嫁接小苗管理 将嫁接苗放入盛有液体培养基的试管内生长。培养温度27℃,光照度1000勒,每天16小时。

(5)茎尖嫁接植株的培养 一般茎尖嫁接苗培养1个月,长出2~3片叶片,叶色变为深绿色后即可移出转接。茎尖苗经过指示植物检测或通过聚合酶链式反应(PCR)检测,属无病苗,则可作为母树进入无病毒良种库用作采穗,再进入良种繁育场繁育无病苗木。 H+c8ArXUMIyKWTFAX7NbrJheNHTWXLrLB6KRi87jyDpllspMzV+FHQp8u+6fW/sP

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