第二节
浓缩血小板血浆的分类

为规范浓缩血小板制品的命名，2009年Dohan Ehrenfest等提出，根据PRP中所含的白细胞和纤维蛋白含量，将其细分为以下4类：

1.纯浓缩血小板血浆（pure PRP，P-PRP）

第一次离心时只吸取白膜层，所得PRP中只含有少量白细胞。

2.含白细胞的浓缩血小板血浆（leukocyte and PRP，L-PRP）

第一次离心时保留全部白膜层和白膜下1～2mm红细胞层，提取的PRP中含有较多白细胞。

3.浓缩血小板纤维蛋白基质（platelet-rich fibrin matrix，PRFM）

PRP加入激活剂后孵化可形成稳定的凝胶，内含丰富浓缩的产物。PRFM含较低的血小板浓度，体积更大，包含血浆和蛋白质，内含纤维蛋白产生的基质捆绑生长因子和细胞有利于迁移。这些因素使其在较长时间内能够缓慢释放生长因子。

4.含白细胞的浓缩血小板纤维蛋白（leukocyte and platelet-rich fibrin，L-PRF）

采血时不添加任何抗凝剂并立即离心，血液自然凝结后分三层，下层为红细胞，上层为无细胞血清层，中间层为L-PRF凝块，浓缩含血小板和白细胞生长因子。此过程未添加激活剂，无任何化学添加物。

过去学者们曾将凝胶状的PRP制品笼统地称为血小板凝胶（platelet gel，PG）。2010年，Dohan Ehrenfest等发表文章指出：血小板浓缩物的定义和分类是非常重要的问题，PRF和L-PRF只以非常致密的纤维蛋白凝胶形式存在，而PRP凝胶没有这么坚固和致密。因此，他们认为P-PRP或L-PRP的活性形式应该简单地命名为“P-PRP凝胶”和“L-PRP凝胶”，以区别于PRF制品。

但无论如何分类，有两个重要组成词语就是“浓缩”和“血小板”，也就是说，所有的这类制品一定具备这两点，才具有人们可期的修复、再生与康复的治疗作用。

从浓缩血小板血浆定义和作用的机制来考虑，不应简单地把PRF作为二代的PRP。制作方法上PRF确比PRP简单，由于不添加凝血酶激活剂，理论上更安全。实际应用中，PRP也可使用其他激活剂如葡萄糖酸钙和氯化钙，或者不激活缓慢释放活性成分。PRF为一次离心法制作而成，制作时间短，且自然凝固，所以PRF的纤维结构比凝血酶激活形成的PRP凝胶更加稳定和牢固。

应该讲，PRP与PRF各具优势，在不同的疾病条件下，能发挥自己独特的特点。在治疗某些微环境条件欠佳的疾患时，可能存在一次离心制作血小板的回收率低、生长因子浓度低、生长因子释放慢，极端微环境下，生长因子等活性产物会受影响而无法达到理想的浓度。各亚型的浓缩血小板血浆制品应该在今后的临床治疗与康复中满足不同的治疗与康复需求，在不同组织、不同条件下“精准”发挥最佳效果。

事实上，从2012年开始，浓缩血小板的分类就在不停改变，如Delong提出PAW分类系统，P代表血小板的绝对数量（the absolute number of platelet），A代表血小板激活方式（the manner in which platelet Activation occurs），W代表白细胞浓度高低（the presence or absence of white cell）。2015年，Mautner基于前两者的分类系统，加入红细胞的指标，提出了PLRA分类系统，P（platelet）代表血小板浓度，L（leukocyte）代表白细胞浓度，R（red blood cell）代表红细胞浓度，A（activation）代表激活。2016年，Magalon等提出了一个更全面的DEPA分类，D（dose）代表剂量，E（efficient）代表效率，P（purity）代表纯度，A（activation）代表激活。2017年，Lana加入更多指标，提出MARSPILL分类系统，更加细化和完善了浓缩血小板制品的分类。其中M（machine/handmade）代表机器制备或手工制备，A（activation）代表激活，R（red blood cell）代表红细胞，S（spin）代表离心次数，P（platelet）代表血小板，I（image guidance）代表是否使用影像引导，L（leukocyte）代表白细胞，L（light activation）代表是否光激活。2018年，国际血栓与止血学会（International society on thrombosis and haemostasis，ISTH）在科学标准化委员会（SSC）会议上，组成一个血小板生理学SSC专家工作组，目的是制定一系列统一的质控标准，规范血小板在再生医学中的使用。①根据是否激活分成：A.没有激活的PRP；B.激活的PRP；C.做冻融准备；②依据样本中血小板计数范围将浓缩血小板被分成 3 类：A.血小板数量＜ 900×10 ³ μl ^-1 ；B.血小板数量（900～1 700）×10 ³ μl ^-1 ；C.血小板数量＞1 700×10 ³ μl ^-1 ；③根据制备方法分为3类：A.重力离心技术；B.标准细胞分选器；C.自体选择性过滤技术（血小板提取法）。2019年，Gutierrez提出PRP制品的命名应考虑其变量，这将使不同的组间结果比较成为可能，且对于质量评估和注意事项十分重要。不仅考虑到血小板、白细胞、红细胞、甚至对激活、破裂情况也在变量计算之中。

（程　飚　刘宏伟　袁　霆） 7A6ez4ui+crXZotv/oQf8iD7Yymb91ADPS7Xf4zcku8objc+IBe56LgYXgx50zxZ