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第二十章
中药提纯辅料在氨基酸类成分的提取和分离纯化中的应用

第一节 氨基酸类成分概述

氨基酸作为蛋白质的主要组成而广泛存在于动植物中,游离氨基酸也可在大量的植物中发现。有些中草药中的氨基酸也属有效成分。如使君子中的使君子氨基酸和美舌藻(又名鹧鸪菜)中的海人草酸都有驱蛔作用;毛边南瓜子中的南瓜子氨酸有治丝虫病和血吸虫病的作用;天冬、玄参和棉根中的天冬素有镇咳和平喘的作用;三七中的田七氨酸,其学名为β- N -酰-L-α,β-二氨基丙酸,具有止血活性;半夏、天南星和蔓荆子中的γ-氨基丁酸则有暂时的降血压作用。

使君子氨酸

海人草酸

南瓜子氨酸

天门素

田七氨酸

常见氨基酸以组成蛋白质的30余种氨基酸为主,都属α-氨基羧酸,具有R—CH(NH 2 )—COOH通式,多数是一元氨基一羧酸,也有一元氨基、二元氨基一羧酸和含有杂环的氨基酸等。另外,如上述的γ-氨基丁酸及某些含羟基的氨基酸则属较为少见的氨基酸。

第二节 氨基酸类成分的理化性质

由于氨基酸分子中既有羧基又有氨基,致呈两性反应,在碱性溶液中能和酸一样电离,在酸性溶液中则又如同碱一样电离,既溶于碱又溶于酸。如若调节溶液的pH达氨基酸的等电点时,则对氨基酸的电泳性能和溶解度都将产生巨大的影响;常根据这些特性进行氨基酸的分离和精制,例如目前常用的离子交换色谱法、纸电泳和凝胶电泳法等,其中凝胶电泳法中的等电点电泳更是氨基酸和蛋白质类化合物的特殊分离分析方法。

第三节 氨基酸类成分的提纯辅料及其应用方法

一、氨基酸类成分的提纯辅料

氨基酸类成分的提纯辅料包括溶剂(常用水、稀醇提取,用乙醇、氯仿、乙醚、石油醚分离纯化)、pH调节剂、离子交换树脂、吸附剂(活性炭、酸性氧化铝)、助滤剂及过滤材料等类。

二、氨基酸类成分提纯辅料的应用方法

氨基酸属强极性物质,易溶于水,难溶于有机溶剂,通常以水或稀乙醇为提取溶剂。提取中药中的氨基酸时,可将中药粗粉用水浸泡,过滤,滤液减压浓缩至1ml相当于1g中药,加2倍量乙醇沉淀去蛋白质、糖类等杂质,过滤,滤液浓缩至小体积,然后通过强酸性阳离子交换树脂。用1mol/L氢氧化钠溶液或1~2mol/L氨水洗脱,收集对茚三酮试剂呈阳性反应的部分,即为总氨基酸部分。

亦可用70%乙醇回流(或冷浸)提取,乙醇提取液经减压浓缩至小体积(应无乙醇),然后如上述通过离子交换树脂即得总氨基酸。

从中药中提取的总氨基酸提取液,还要进一步分离提纯。

从目前的发展情况看,中药中的低肽类物质或其蛋白质的水解产物已受到重视,因而这类物质的分离分析也显得重要。其主要分离方法为离子交换法,按碱性氨基酸或低聚肽可为硅胶或弱酸性阳离子交换树脂所选择性吸附,酸性氨基酸或酸性低聚肽可为酸性氧化铝或弱碱性阴离子交换树脂吸附,活性炭则对芳香环衍生的氨基酸或低聚肽有特异吸附性能等吸附规律,可将不同类别的氨基酸或低聚肽分离,然后再用色谱柱作进一步分离纯化。

第四节 氨基酸类成分提纯辅料及其应用方法的实例

一、南瓜子氨基酸的提取分离

南瓜子为葫芦科植物南瓜 Cucurbita moschata Duch的种子,从其中分离到的南瓜子氨酸是一种碱性氨基酸,故可与高氯酸(HClO 4 )形成结晶性盐从稀乙醇中析出。其提取方法如下:

二、使君子氨酸的提取分离

使君子是使君子科使君子 Quisqualis indica L.的种子,从其中提出的氨基酸即使君子氨酸,其钾盐可驱蛔。其提取方法如下: DFlw7M3OIZS7PDC3bq3TgX7U0TZNVMxCN8SSS+ce7au1EcYrU1evtKL+bnYr46Zm

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