中药配方颗粒标准汤剂与质量标准研究（第1册）最新章节_程学仁著

第三节
白芍配方颗粒标准汤剂研究

一、白芍标准汤剂的制备

本研究根据《中药配方颗粒质量控制与标准制定技术要求（征求意见稿）》中“标准汤剂制备”项的指导原则，参考中药药性及入药部位的分类，并参照卫生部、国家中医药管理局《医疗机构中药煎药室管理规范》的前处理方法、煎煮次数、加水量、煎煮时间等指标和参数并进行相关工艺考察；采用低温浓缩和冷冻干燥，最大限度保留中药有效成分群，制成白芍标准汤剂的冻干粉，供质量标准实验研究。根据研究结果，确定白芍标准汤剂的制备方法如下：

取白芍饮片100g，加水煎煮两次，第一次加9倍量水，浸泡30分钟，煎煮30分钟，用325目筛网趁热过滤，滤液迅速用冷水冷却。第二次加7倍量水，煎煮25分钟，用325目筛网趁热过滤，滤液迅速冷水冷却，合并两次滤液。将合并后的滤液转移至旋转蒸发仪中浓缩，浓缩至清膏含固率约为12%，分装至10ml西林瓶中，每瓶分装体积为2ml，半加塞，分装完毕后转移至真空冷冻干燥机中冻干（真空冷冻干燥工艺参数见表10-3-1，冻干曲线见图10-3-1），取出，轧铝盖，即得。白芍标准汤剂样品制备测定数据见表10-3-2。

表10-3-1　白芍标准汤剂冷冻干燥参数设置

图10-3-1　白芍标准汤剂冻干曲线图

表10-3-2　白芍标准汤剂研究汇总表

续表

二、含量测定

（一）色谱条件

以 Agilent ZORBAX SB C ₁₈ （150mm×4.6mm，5μm）为色谱柱；以乙腈 -0.1%磷酸溶液（14：86）为流动相；流速为每分钟1.0ml；柱温为30℃；检测波为230nm；进样量为10μl。理论板数按芍药苷峰计算应不低于2 000。

（二）对照品溶液的制备

精密称定芍药苷对照品8.340mg，置100ml量瓶中，加甲醇制成每1ml含79.4μg的溶液，摇匀，即得。

（三）供试品溶液的制备

取白芍标准汤剂约0.1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，超声处理30分钟（功率250W，频率40kHz），放冷，再称定重量，用甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

（四）方法学验证

方法学考察合格（具体内容略）。

（五）测定结果（表10-3-3）

表10-3-3　31批白芍标准汤剂芍药苷含量及转移率结果

续表

其中有4批白芍标准汤剂的转移率分别为98.89%、109.86%、98.31%、99.19%，属于异常值，应不纳入转移率结果分析。

三、特征图谱

测定方法同“第二节”中“特征图谱”项。

（一）方法学考察

1．专属性考察

精密吸取白芍标准汤剂（BS-T-23）特征图谱项下供试品溶液、参照物溶液与空白溶剂各10μl，注入液相色谱仪，按色谱条件测定，记录色谱图（图10-3-2）。

图10-3-2　白芍标准汤剂特征图谱专属性考察

结果：白芍标准汤剂6个色谱峰不受阴性空白溶剂的干扰，其中标准汤剂中特征图谱芍药苷峰与参照物溶液的保留时间一致，本法具有良好的专属性。

2．精密度考察

取白芍标准汤剂（BS-T-23）特征图谱项下供试品溶液，按照特征图谱项下色谱条件重复进样6次，进样体积10μl。以芍药苷峰为参照峰，计算相对保留时间与相对峰面积，结果见表10-3-4、表10-3-5。

表10-3-4　白芍标准汤剂精密度考察结果（相对保留时间）

表10-3-5　白芍标准汤剂精密度考察结果（相对峰面积）

结果：各色谱峰相对保留时间RSD值在0.11%～0.17%范围内，相对峰面积的RSD值在0.16%～0.58%范围内，该特征图谱方法精密度良好。

3．稳定性考察

取白芍标准汤剂（BS-T-23）特征图谱项下供试品溶液，按照色谱条件，分别在 0、2、4、8、12、24小时进样，进样体积 10μl。以芍药苷峰为参照峰，计算相对保留时间与相对峰面积，结果见表10-3-6、表10-3-7。

表10-3-6　白芍标准汤剂稳定性考察结果（相对保留时间）

表10-3-7　白芍标准汤剂稳定性考察结果（相对峰面积）

结果：24小时内各色谱峰相对保留时间RSD值在0.07%～0.44%范围内，相对峰面积RSD值在0.34%～2.15%范围内，该供试品溶液在24小时内稳定。

4．重复性考察

取同一批白芍标准汤剂（BS-T-23）约0.1 g，精密称定，平行6份，按白芍标准汤剂特征图谱项下方法制备供试品溶液，并按色谱条件，分别进样测定。以芍药苷峰为参照峰，计算相对保留时间与相对峰面积，结果见表10-3-8、表10-3-9。

表10-3-8　白芍标准汤剂重复性考察结果（相对保留时间）

表10-3-9　白芍标准汤剂重复性考察结果（相对峰面积）

结果：在平行6个供试品溶液中白芍标准汤剂6个色谱峰中，1，2，3，4，6-五没食子酰葡萄糖相对峰面积RSD较大，其余色谱峰相对峰面积RSD在0.04%～1.91%范围内。

5．中间精密度考察

由本项目组其他分析人员在不同日期和不同色谱仪下操作，取同一批白芍标准汤剂（BS-T-23）约0.1g，精密称定，平行6份，按白芍标准汤剂特征图谱项下方法制备供试品溶液，分别进样10μl。以芍药苷峰为参照峰，计算相对保留时间与相对峰面积，结果见表10-3-10、表10-3-11。

表10-3-10　白芍标准汤剂中间精密度考察结果（相对保留时间）

表10-3-11　白芍标准汤剂中间精密度考察结果（相对峰面积）

结果：不同分析人员在不同日期和不同色谱仪下操作，1，2，3，4，6-五没食子酰葡萄糖相对峰面积RSD较大，其余色谱峰相对峰面积RSD在0.13%～7.36%范围内。

（二）测定结果

按高效液相色谱法建立特征图谱的测定方法，对31批白芍标准汤剂特征图谱测定，最终确定了白芍标准汤剂特征图谱标准：规定白芍标准汤剂供试品溶液特征图谱中应呈现6个特征峰（图10-3-3、图10-3-4），以参照物峰相应的峰为S峰，计算各特征峰与S峰的相对保留时间和相对峰面积（表10-3-12、表10-3-13），规定了各特征峰范围（表10-3-14）。