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升麻标准汤剂的制备工艺研究，均按照国家药典委员会起草的《中药配方颗粒质量控制与标准制定技术要求（征求意见稿）》中“标准汤剂制备”项的指导原则，参考中药药性及入药部位的分类，并参照卫生部、国家中医药管理局《医疗机构中药煎药室管理规范》的前处理方法、煎煮次数、加水量、煎煮时间等指标和参数进行相关工艺考察；采用低温浓缩和冷冻干燥，最大限度保留中药有效成分，根据研究结果，确定升麻标准汤剂的制备方法如下：
取升麻饮片100g，加水煎煮两次，第一次加9倍量水，浸泡30分钟，武火煮沸后改文火再煎煮20分钟，用350目筛网趁热过滤，滤液迅速用冷水冷却。第二次加7倍量水，武火煮沸后改文火再煎煮15分钟，用350目筛网趁热过滤，滤液迅速冷水冷却，合并两次滤液。将合并后的滤液转移至旋转蒸发仪中，减压浓缩至约100ml，搅拌均匀，分装至10ml西林瓶中，每瓶分装体积为2ml，真空冷冻干燥（真空冷冻干燥工艺参数见表9-3-1，冻干曲线见图9-3-1），取出，轧铝盖即得。升麻标准汤剂样品制备测定数据见表9-3-2。
表9-3-1 升麻标准汤剂冷冻干燥参数设置
备注：根据冻干机中标准汤剂样品的冻干效果，会调整预冻和一次干燥的时间。
图9-3-1 升麻标准汤剂冻干曲线图
表9-3-2 18批升麻标准汤剂样品测定数据
色谱柱：Agilent SB C 18 （100mm×2.1mm，1.8μm）；流动相：以乙腈为流动相 A，以 0.1% 磷酸溶液为流动相B，按表9-3-3中的规定进行梯度洗脱；流速：每分钟0.4ml；柱温：30℃；检测波长：316nm。理论板数按异阿魏酸峰计算应不低于5 000。
表9-3-3 升麻含量测定洗脱程序
取异阿魏酸对照品适量，精密称定，加稀乙醇制成每1ml约含26μg的对照品溶液。
取本品适量，研细，取约0.1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇溶液100ml，称定重量，加热回流2.5小时，放冷，再称定重量，用稀乙醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，即得。
方法学考察合格（具体内容略）。
表9-3-4 18批升麻标准汤剂异阿魏酸含量及转移率结果
续表
测定方法同“第二节”中“特征图谱”项。
1．专属性考察
精密吸取升麻标准汤剂供试品溶液、参照物溶液与空白溶剂各1μl，注入液相色谱仪，按正文中确定的色谱条件测定。结果见图9-3-2。
图9-3-2 升麻标准汤剂特征图谱专属性考察
结果：分析方法能正确检测所指认的特征峰，保留时间基本一致，本方法专属性良好。
2．精密度考察
取升麻标准汤剂（SM-T-10），按特征图谱项下供试品溶液制备方法制备供试品溶液，按特征图谱项下色谱条件连续进样6次，以3号峰异阿魏酸为参照峰，计算各特征峰的相对保留时间与相对峰面积，并计算RSD值，结果见表9-3-5。
表9-3-5 升麻标准汤剂特征图谱精密度考察结果
结果：同一份供试品溶液连续进样6次，各特征峰的相对保留时间RSD值在0.01%～0.05%范围内，各特征峰的相对峰面积RSD值在0.18%～0.25%范围内，表明该特征图谱方法精密度良好。
3．稳定性考察
取升麻标准汤剂（SM-T-10）按特征图谱项下供试品溶液制备方法制备供试品溶液，按特征图谱项下色谱条件，分别在 0、2、4、6、8、10、12、24小时进样测定，以3号峰异阿魏酸为参照峰，计算各特征峰的相对保留时间与相对峰面积，结果见表9-3-6。
结果：同一份供试品溶液分别在 0、2、4、6、8、10、12、24 小时进样进样测定，各特征峰的相对保留时间RSD值在0.02%～0.27%范围内，各特征峰的相对峰面积RSD值在0.10%～1.20%范围内，表明供试品溶液在24小时内稳定性良好。
4．重复性考察
取升麻标准汤剂（批号SM-T-10）适量，研细，取约0.1g，精密称定，平行6份，按特征图谱项下供试品溶液制备方法制备6份供试品溶液，按特征图谱项下色谱条件进样测定。以3号峰异阿魏酸为参照峰，计算各特征峰的相对保留时间与相对峰面积，并计算RSD值，结果见表9-3-7。
表9-3-6 升麻标准汤剂特征图谱稳定性考察结果
表9-3-7 升麻标准汤剂特征图谱重复性考察结果
续表
结果：同一份样品重复测定6次，各特征峰的相对保留时间RSD值在0.01%～0.06%范围内，各特征峰的相对峰面积RSD值在0.10%～0.56%范围内，表明该特征图谱方法重复性良好。
5．中间精密度考察
由本项目组其他分析人员在不同日期和不同色谱仪下操作，取升麻标准汤剂（SM-T-10）适量，研细，取约0.1g，精密称定，平行6份，按升麻标准汤剂特征图谱项下供试品溶液制备方法制备6份供试品溶液，按特征图谱项下色谱条件进样测定，以3号峰异阿魏酸为参照峰，计算各特征峰的相对保留时间与相对峰面积，并计算RSD值，结果见表9-3-8。
表9-3-8 升麻标准汤剂特征图谱中间精密度考察结果
结果：六个中间精密度试验样品的7个特征峰的相对保留时间RSD值在0.01%～0.12%范围内，各特征峰的相对峰面积RSD值在0.15%～1.51%范围内，表明该特征图谱方法中间精密度良好。
采用超高效液相色谱法建立升麻标准汤剂特征图谱的测定方法并进行方法学考察，对18批升麻标准汤剂样品进行特征图谱测定，最终确定了升麻标准汤剂特征图谱标准：规定升麻标准汤剂供试品溶液特征图谱中应呈现7个特征峰（图9-3-3、图9-3-4），以3号峰异阿魏酸为参照，计算各特征峰的相对保留时间和相对峰面积（表9-3-9、表9-3-10），并规定了各特征峰的相对保留时间和相对峰面积范围（表9-3-11）。
表9-3-9 升麻标准汤剂特征图谱测定结果（相对保留时间）
图9-3-3 升麻标准汤剂特征图谱及共有峰
图9-3-4 升麻标准汤剂特征图谱
峰 1：咖啡酸；峰 2：阿魏酸；峰 3（S）：异阿魏酸
（样品浓度：每1ml相当于0.021g升麻饮片）
色谱仪：Waters H-Class超高效液相色谱仪；色谱柱：Agilent SB C 18
表9-3-10 升麻标准汤剂特征图谱测定结果（相对峰面积）
表9-3-11 升麻标准汤剂各特征峰相对保留时间和相对峰面积规定范围
通过查阅文献，对各个共有峰的化学性质进行分析，选用多个对照品对其进行定位指认，并通过3D光谱进行确认，指认了其中3个峰，分别是峰1：咖啡酸朴酚，峰2：阿魏酸，峰3：异阿魏酸。具体结果见图9-3-5。
图9-3-5 升麻标准汤剂特征峰的指认
本研究对升麻标准汤剂的制备工艺进行了考察，制定了升麻标准汤剂的制备方法。根据升麻标准汤剂的出膏率及主要成分异阿魏酸的转移率，制定了升麻标准汤剂中异阿魏酸的含量及转移率范围，建立了升麻标准汤剂特征图谱标准，并对升麻标准汤剂特征图谱的特征峰相对峰面积设定了标准范围，为升麻配方颗粒生产工艺的研究提供了较全面的参考。