第四节
丹参配方颗粒质量标准研究

一、丹参配方颗粒质量标准草案

丹参配方颗粒　Danshen Peifangkeli

【来源】

本品为唇形科植物丹参 Salvia miltiorrhiza Bge.的干燥根及根茎经炮制并按标准汤剂的主要质量指标加工制成的配方颗粒。

【制法】

取丹参饮片2 000g，加水煎煮，滤过，滤液浓缩成清膏，干浸膏出膏率范围为29%～49%，干燥，加辅料适量，混匀，制粒，制成1 000g，分装，即得。

【性状】

本品为黄棕色至棕褐色的颗粒；气微，味微苦、涩。

【鉴别】

取本品0.5g，研细，加水30ml使溶解，用30ml水饱和正丁醇萃取，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。取丹参对照药材1.0g，加30ml水加热回流1小时，滤过，滤液用30ml水饱和正丁醇萃取，弃去水液，正丁醇蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，同法制成对照药材溶液。再取丹酚酸B对照品，加75%甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（《中国药典》2015年版四部通则0502）试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶GF ₂₅₄ 薄层板上，以甲苯-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（2：3：4：0.5：2）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光（254nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

【检查】

应符合颗粒剂项下（《中国药典》2015年版四部通则0104）有关的各项规定。

【特征图谱】

照高效液相色谱法（《中国药典》2015年版四部通则0512）测定。

色谱条件与系统适用性

以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（100mm×2.1mm，1.6μm），以乙腈为流动相A，以0.04%磷酸溶液为流动相B，按表7-4-1中的规定进行梯度洗脱；流速为每分钟0.4ml；检测波长为280nm；柱温为30℃。理论板数按迷迭香酸峰计算应不低于100 000。

参照物溶液的制备

取丹参对照药材0.5g，置具塞锥形瓶中，加入水20ml，回流提取60分钟，放冷，摇匀，滤过，取续滤液，作为对照药材参照物溶液。另取丹酚酸B对照品和迷迭香酸对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含丹酚酸B120μg和迷迭香酸10μg的混合溶液，作为对照品参照物溶液。

供试品溶液的制备

取本品研细，取约40mg，置10ml量瓶，加入70%甲醇8ml，超声处理（功率500W，频率40kHz）10分钟，放冷，摇匀，滤过，弃去初滤液，取续滤液，即得。

测定法

分别精密吸取参照物溶液和供试品溶液各1μl，注入超高效液相色谱仪，测定，即得。

供试品色谱图中应呈现6个特征峰（图7-4-1），并应与对照药材参照物色谱峰中的6个特征峰相对应（图7-4-2），其中2个峰应分别与相应的参照物峰保留时间相同；与迷迭香酸参照物峰相对应的峰为S峰，计算各特征峰与S峰的相对保留时间，其相对保留时间应在规定值的 ±10% 范围之内，规定值为：0.29（峰 1）、0.43（峰 2）、0.56（峰 3）、1.00（峰 4）、1.04（峰 5）、1.16（峰6）。计算峰1、2、6与S峰的相对峰面积，峰1、峰2的相对峰面积之和与峰6的相对峰面积比值应不高于0.10。

【浸出物】

取本品研细，取约2g，精密称定，精密加入乙醇100ml，照醇溶性浸出物测定法项下的热浸法（《中国药典》2015年版四部通则2201）测定，不得少于13.0%。

【含量测定】

丹酚酸B

照高效液相色谱法（《中国药典》2015年版四部通则0512）测定。

色谱条件与系统适用性

以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（100mm×2.1mm，1.6μm）；以乙腈-0.1%磷酸溶液（22：78）为流动相；流速为每分钟1.2ml；检测波长为286nm，柱温为25℃。理论板数按丹酚酸B峰计算应不低于6 000。

对照品溶液的制备

取丹酚酸B对照品适量，精密称定，加甲醇-水（8：2）制成每1ml含0.1mg的溶液，即得。

供试品溶液制备

取本品研细，取约40mg，精密称定，置20ml量瓶，加水12ml，摇匀，超声处理（功率500W，频率40kHz）10分钟，放冷，加水至刻度，滤过，弃去初滤液，取续滤液，即得。

测定法

分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各1μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品每1g含丹酚酸B（C ₃₆ H ₃₀ O ₁₆ ）应为29.0～70.0mg。

【性味与归经】

苦，微寒。归心、肝经。

【功能与主治】

活血祛瘀，通经止痛，清心除烦，凉血消痈。用于胸痹心痛，脘腹胁痛，癥瘕积聚，热痹疼痛，心烦不眠，月经不调，痛经经闭，疮疡肿痛。

【用法与用量】

供配方用，遵医嘱。

【规格】

每1g配方颗粒相当于饮片2.2g。

【注意】

不宜与藜芦同用。

【贮藏】

密封。

二、丹参配方颗粒质量标准草案起草说明

本研究以大生产三批丹参配方颗粒样品进行质量研究，根据国家药典委员会《中药配方颗粒质量控制与标准制定技术要求（征求意见稿）》的要求，依据《中国药典》2015年版一部、《天津市中药配方颗粒质量标准》的丹参项以及前研究丹参标准汤剂质量标准为研究基础，建立符合丹参标准汤剂质量要求的丹参配方颗粒质量标准。

标准汤剂作为衡量中药配方颗粒与传统汤剂基本一致的标准参照物，要求中药配方颗粒的质量标准应符合与标准汤剂质量标准的一致性。前研究建立了丹参标准汤剂的三大质量指标：出膏率、丹酚酸B的含量和转移率，以及特征图谱标准；并以三大质量指标为基准，对丹参配方颗粒生产工艺进行研究，通过对煎煮时间、固液分离、浓缩时间与温度、干燥方法、喷雾干燥参数、成型工艺辅料加入量及制粒工艺参数等进行考察，确定丹参配方颗粒生产工艺。

（一）药品名称

药品名称：丹参配方颗粒

汉语拼音：Danshen Peifangkeli

（二）来源

本品为唇形科植物丹参 Salvia miltiorrhiza Bge.干燥根及根茎经炮制并按标准汤剂的主要质量指标加工制成的配方颗粒。

（三）制法

丹参配方颗粒的研究以标准汤剂为对照，以出膏率、指标成分含量和转移率、特征图谱的一致性为考察指标，通过单因素实验，确定了提取、固液分离、浓缩、干燥、成型工艺，通过三批中试的验证，考察了丹参中间体及成品制备过程中的量值传递和物料平衡，最终确定了丹参配方颗粒的制备工艺。

（四）性状

根据三批丹参配方颗粒样品的实际性状描述，暂定本品性状为：本品为黄棕色至棕褐色的颗粒；气微，味微苦、涩（图7-4-3）。

（五）鉴别

丹参的化学成分主要包括脂溶性成分（二萜醌类）和水溶性成分（酚酸类）两类：脂溶性成分主要为邻醌类化合物、对醌类化合物，及其他二萜类化合物。水溶性成分主要为酚酸类化合物和糖类化合物。本研究参照《中国药典》2015年版一部、《天津市中药配方颗粒质量标准》的丹参【鉴别】项下方法制定，选用丹参对照药材、丹酚酸B作对照，以甲苯-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（2：3：4：0.5：2）为展开剂，按正文鉴别项下方法操作，结果供试品在与对照品相应位置上有对应斑点；经试验验证，方法重现性好，因此将该方法收入正文（图7-4-4）。

（六）检查

1．常规检查

按《中国药典》2015年版四部通则0104颗粒剂项下规定，对丹参配方颗粒的粒度、水分、溶化性、装量差异、微生物限度进行了检查，规定如正文。

2．其他检查

（1）重金属及有害元素：

按《中国药典》2015年版四部通则2321铅、镉、砷、汞、铜测定法（电感耦合等离子体质谱法）操作，采用电感耦合等离子体质谱仪对本品三批进行铅、镉、砷、汞、铜的测定，结果见表7-4-2。

根据2015年版《中国药典》对中药材重金属及有害元素的一般规定，除矿物、动物、海洋类以外的中药材中，铅不得过5mg/kg；镉不得过0.3mg/kg；砷不得过2mg/kg；汞不得过0.2mg/kg；铜不得过20mg/kg。由表7-4-2可见，三批丹参配方颗粒重金属及有害元素均符合药典规定的限度。暂不纳入标准正文中。

（2）有机氯农药残留量：

按《中国药典》2015年版四部通则2341农药残留量测定法（第一法有机氯类农药残留量测定法——色谱法）中9种有机氯类农药残留量测定法操作，采用气相色谱仪对本品三批进行9种有机氯类农药残留量测定，测定结果表7-4-3。

根据《中国药典》2015年版对中药材有机氯类农药残留量的一般规定，六六六（总BHC）不得过0.2mg/kg；滴滴涕（总DDT）不得过0.2mg/kg；五氯硝基苯（PCNB）不得过0.1mg/kg。由表7-4-3可见，三批丹参配方颗粒中有机氯农药残留量均符合药典规定的限度。暂不纳入标准正文中。

（七）浸出物

按醇溶性浸出物测定法（《中国药典》2015年版四部通则2201浸出物测定法）项下的热浸法测定，对三批丹参配方颗粒进行测定，测定结果为16.30%、22.94%、16.76%。本研究仅测定了三批样品数据，缺乏样品的代表性，有待后续积累更多数据进行完善，参考广东一方制药有限公司的历史数据和本研究三批大生产数据，暂定丹参配方颗粒醇溶性浸出物不得少于13.0%。

（八）特征图谱

参照丹参标准汤剂特征图谱标准，对丹参配方颗粒特征图谱进行研究。

取三批丹参配方颗粒，按正文色谱条件，测定三批丹参配方颗粒特征图谱，结果见图7-4-5、表7-4-4。

将三批丹参配方颗粒HPLC 特征图谱使用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》进行匹配，以4号峰迷迭香酸为校正峰，生成对照图谱，建立丹参配方颗粒对照特征图谱（图7-4-6）。

（九）含量测定

参考丹参标准汤剂含量测定项、《中国药典》2015年版一部以及《天津市中药配方颗粒质量标准》丹参项含量测定项标准，建立丹参配方颗粒的含量测定方法。

取三批丹参配方颗粒，按照【含量测定】项下供试品制备方法制备供试品溶液，按正文项下色谱条件进行测定，测定三批丹参配方颗粒丹酚酸B含量，结果为38.82mg/g、47.36mg/g、33.95mg/g。结合丹参药材、饮片质量及丹参标准汤剂中丹酚酸B含量测定结果，暂定本品每1g含丹酚酸 B（C ₃₆ H ₃₀ O ₁₆ ）应为 29.0～70.0mg。

（十）性味与归经、功能与主治、用法与用量、注意

同正文。

（十一）规格

按照制法中制成总量计算，每1g配方颗粒相当于饮片2.2g。

（十二）贮藏

根据颗粒剂易吸潮特点以及稳定性试验结果，包装应密封。

三、小结

本研究以丹参标准汤剂质量标准为依据，针对有效成分丹酚酸B作为含量测定指标成分，采用UPLC法，测定本品中丹酚酸B含量，根据标准汤剂的含量规定范围以及出膏率、成品的制成量换算，得到丹参配方颗粒的含量规定范围为每1g含丹酚酸B（C ₃₆ H ₃₀ O ₁₆ ）应为29.0～70.0mg，三批大生产丹参配方颗粒的含量均在标准汤剂含量规定值范围内；建立了特征图谱方法和标准，选取6个共有峰，并进行了指认，分别为：丹参素（峰1）、原儿茶醛（峰2）、咖啡酸（峰 3）、迷迭香酸（峰 4）、紫草酸（峰 5）、丹酚酸 B（峰 6），并对峰 1、峰 2、峰 3、峰 4、峰 5、峰6进行量值传递分析，三批大生产丹参配方颗粒均在标准汤剂相对峰面积规定值范围内，说明本研究可以用于丹参配方颗粒的整体性质量控制。此外，采用TLC法，针对丹参的酚酸类成分，选择丹参对照药材、丹酚酸B为对照进行专属性鉴别。除了进行定性定量分析外，还采用ICP进行重金属及有害元素的测定、采用GC进行农药残留量的测定，以期积累数据纳入质量标准，确保本品临床使用的安全性。经方法学考察，检测方法均符合要求，检测数据稳定可靠。

三批大生产配方颗粒的各项指标均在标准汤剂规定质量范围之内，即三批大生产量值传递过程与标汤均一致。说明丹参配方颗粒与丹参标准汤剂物质基础一致，保证了丹参配方颗粒全过程的量值传递平衡。 Wu7ii9M9IhKG/oHjhOMrxn3Y3gTmdzmYkq9bdbyL+bvm3oRsZ12cqRXbsbGCQmKe