第二节
土茯苓药材和饮片研究

一、药材来源

土茯苓为百合科植物光叶菝葜 Smilax glabra Roxb.的干燥根茎。夏、秋二季采挖，除去须根，洗净，干燥；或趁鲜切成薄片，干燥。本研究共收集了20份药材（TFL-YC-01～TFLYC-20），采自主产区、道地产区，经广东一方制药有限公司质量中心鉴定，研究样品均为《中国药典》2015年版一部“土茯苓”项下规定的品种。

二、饮片炮制

照《中国药典》2015年版一部“土茯苓”项下进行炮制，取土茯苓原药材，除去杂质，用水浸泡，洗净，润透，切薄片，干燥，即得土茯苓饮片（TFL-YP-01～TFL-YP-20）。

三、药材及饮片质量标准

（一）性状

土茯苓药材略呈圆柱形，稍扁或呈不规则条块，有结节状隆起，具短分枝，长5～22cm，直径2～5cm。表面黄棕色或灰褐色，凹凸不平，有坚硬的须根残基，分枝顶端有圆形芽痕，有的外皮现不规则裂纹，并有残留的鳞叶。质坚硬。切片呈长圆形或不规则，厚1～5mm，边缘不整齐；切面类白色至淡红棕色，粉性，可见点状维管束及多数小亮点；质略韧，折断时有粉尘飞扬，以水湿润后有黏滑感。气微，味微甘、涩。

土茯苓饮片呈长圆形或不规则的薄片，边缘不整齐。切面黄白色或红棕色，粉性，可见点状维管束及多数小亮点；以水湿润后有黏滑感。气微，味微甘、涩。见图6-2-1。

（二）检测

按照《中国药典》2015年版一部“土茯苓”项下有关要求，对上述土茯苓药材及饮片进行检测，所有样品均符合规定，测定结果见表6-2-1、表6-2-2。

（三）特征图谱

1．色谱条件

以 Agilent SB C ₁₈ （100mm×2.1mm，1.8μm）为色谱柱；以乙腈为流动相A，以0.2%冰醋酸溶液为流动相B；按表6-2-3规定进行梯度洗脱；流速为每分钟0.4ml；柱温为30℃；检测波长为291nm；进样量为1μl。理论板数按落新妇苷峰计算应不低于15 000。

2．参照物溶液制备

取落新妇苷对照品、黄杞苷对照品适量，精密称定，加60%甲醇制成每1ml各含50μg的混合溶液，即得。

3．供试品溶液制备

取本品粉末（过二号筛）约0.8g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入60%甲醇100ml，称定重量，加热回流1小时，取出，放冷，再称定重量，用60%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

4．方法学验证

方法学考察合格（具体内容略）。

5．特征图谱的建立及共有峰的标定

（1）药材特征图谱的建立及共有峰的标定：

按土茯苓药材及饮片特征图谱方法，分别精密吸取参照物溶液和供试品溶液各1μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

供试品色谱中应呈现5个特征峰（图6-2-2、图6-2-3），其中2个峰应分别与相应参照物峰保留时间相对应；与落新妇苷参照物峰相应的峰为S峰，计算各特征峰与S峰的相对保留时间（表6-2-4），其相对保留时间应在规定值的±10%范围以内，规定值为：0.93（峰1），1.19（峰 3），1.24（峰 4）。

（2）饮片特征图谱的建立及共有峰的标定：

按土茯苓药材及饮片特征图谱方法，分别精密吸取参照物溶液和供试品溶液各1μl，注入液相色谱仪，测定，即得（图6-2-4、图6-2-5、表6-2-5）。

本研究对20批土茯苓药材、饮片，按《中国药典》2015年版标准进行检验，其检验结果均符合《中国药典》2015年版质量标准相关规定。并且增加了重金属及有害元素的检查项和特征图谱检验标准，以提高对外源性有害物质的限量检测标准，增强土茯苓药材的整体控制水平，提高了企业内控质量标准。20批土茯苓药材、饮片的重金属铅低于5mg/kg，镉低于0.3mg/kg，砷低于2mg/kg，汞低于0.2mg/g，铜低于20mg/kg。根据20批土茯苓药材、饮片、标准汤剂的研究结果，最终规定了土茯苓药材、饮片特征图谱中应具有5个特征峰，指认了峰1为新落新妇苷、峰2为落新妇苷、峰3为新异落新妇苷、峰4为异落新妇苷、峰5为黄杞苷。