第二节
肺癌的分子诊断

近年来，肺癌基础研究不断深入，部分非小细胞肺癌被证实存在驱动基因的改变，基于驱动基因的靶向治疗也取得了明显的疗效。基因变异分子诊断具有里程碑的意义。这些基因变异主要有表皮生长因子受体（EGFR）基因突变、间变淋巴瘤激酶（ALK）基因融合重排、c-ros原癌基因1受体酪氨酸激酶（ROS1）基因重排、原癌基因酪氨酸激酶（RET）基因融合/重排、MET基因受体酪氨酸激酶（MET）基因扩增及鼠Kitten肉瘤病毒癌基因同源物（KRAS）、鼠类肉瘤病毒癌基因同源物B1（BRAF）、人类表皮生长因子受体2（HER2）基因突变等。分子诊断的优势不仅在于早期诊断，还包括预后指标及靶向治疗的预测等。

目前临床上NSCLC基因检测主要包括EGFR基因突变和ALK基因重排，前者检测方法主要包括标准测序法、扩增阻滞突变系统（ARMS）及实时定量聚合酶链反应（RT-PCR），后者检测方法主要有荧光原位杂交技术（FISH），免疫组织化学方法（IHC）和RT-PCR，随着对肺癌基因组学更加深入的研究，发现还存在很多少见的基因变异，一部分肺癌患者仅为个别基因突变，而一部分肺癌患者存在复合基因突变，仅对单基因突变的靶向治疗效果不佳。近年来高通量二代测序（NGS）技术的问世为发现少见的、同时多发的复合基因突变提供了新的方法。基于二代测序平台可一次性平行检测多个靶点基因的突变、融合/重排或扩增，测序深度达1 000X，灵敏度可达1%，精准报告突变丰度，更好地帮助临床治疗结合肿瘤异质性来选择靶向药物。

液体活检是又一种新兴的肺癌分子检测手段，为NSCLC的精准诊断和个体化靶向治疗带来了新的手段。传统的肺癌诊断主要通过外科手术切除、气管镜肺病理活检、CT引导下经皮肺穿刺活检、淋巴结活检等获取组织学标本，通过恶性胸腔积液、气管镜毛刷涂片、肺泡灌洗液、痰液、淋巴结穿刺涂片等获取细胞学标本取得确诊。液体活检是通过检测患者体液（主要是外周血，其次还有胸腔积液、心包积液、唾液、尿液等）中的循环肿瘤细胞（circulating tumor cells，CTCs）、循环肿瘤脱氧核糖核酸（cir-culating tumor DNA，ctDNA）、外泌体等肿瘤来源的生物标记物这种无创的方式，来进行肺癌的早期分子分型诊断、靶向药物选择、实时疗效评估、预后判断等。由于操作简单、相对无创、可实时多次获取等优点，这一技术已逐渐得到接受和认可。

研究者们通过DNA拷贝数、DNA测序、蛋白表达检测、miRNA表达谱、鉴定循环的肿瘤细胞和肿瘤干细胞和血清蛋白质组学等方法来探索肺癌的分子标志。将来，这些方法的联合使用及新技术的面世将帮助临床医生更好地作出肺癌早期诊断、预后及靶向治疗评价。

（钱坤　张培龙） YQ3VkdWLPHN7EJYIj2EKZ0XhLRxCbqMMWfil9FWXx8KFp5pVlLuW6wBzPJwmUMeE