第二节
治疗过程

一、签署知情同意书

医师应严格掌握患者的适应症、纳入标准及排除标准，在认真评估患者有明确适应症并符合纳入、排除标准的情况下，责任医师应明确告知患者及家属在治疗过程中及治疗结束后可能出现的并发症、意外情况等相关风险。患者在家属陪同下，签署知情同意书。

二、预培养

患者经医师评估后进行预入组，采用绿头无菌真空管采集静脉血 10ml进行T细胞预培养（大约一周时间），根据预培养T细胞的生长情况，以评估其治疗效果。如预培养效果差，则终止实施CAR-T治疗。

三、T细胞采集

临床科室责任医师会同生物治疗中心（机构）技术人员共同再评估患者接受CAR-T细胞治疗的适应症、纳入、排除标准及预培养结果后，临床科室医师开临时医嘱“外周血采血，备注：car-t培养”，由责任护士采集患者外周静脉血以分离提取T细胞，通常 60-80ml（根据患者身高、体重、细胞计数情况而定）。如患者外周血管条件差者，选择血细胞分离机直接进行T细胞分离采集。采集完毕填写患者相关信息，通知生物治疗中心或机构取标本，并与其做好标本的交接登记。

四、CAR-T细胞研制

（一）从患者外周静脉血分离、纯化获取T细胞，利用基因工程技术对T细胞进行修饰加工，加入（嵌合）一个能特异性地识别肿瘤细胞，并且能同时刺激T细胞增殖活化的抗原受体，T细胞则被修饰成为了CAR-T细胞。

（二） CAR-T细胞的质量检测 CAR-T细胞生成以后，通过流式细胞技术检测CAR的阳性率，同时对细菌、内毒素血源相关性疾病（HIV、HBV、HCV、TP）等进行检测，确保培养出的CAR-T细胞符合临床使用标准。

五、CAR-T细胞输注

1.输注前预处理 输注前 5-10 天需对患者进行淋巴细胞清除性化疗，为CAR-T细胞在体内扩增创造有利的免疫环境，同时减少体内肿瘤细胞数量，减轻CAR-T细胞治疗后发生细胞因子释放综合征的机率及严重程度。化疗方案根据患者之前的治疗情况进行个性化制定，通常为：于-5，-4，-3，-2 日早晨，氟达拉滨 25mg/m2；于-2天早晨增加环磷酰胺 900mg/ m2。

化疗第一天晨间（化疗药物输注前）用紫头管采静脉血 20ml送生物治疗中心（机构）进行相关指标检测。

2.CAR-T细胞输注 化疗结束后间隙 2 天，待化疗药物代谢完后再予CAR-T细胞回输，回输前采静脉血 5ml。为进一步保证患者的安全，CAR-T细胞回输可分三天进行，分别回输总剂量的 10%，30%和 60%。

六、CAR-T细胞输注后的监测与处理

严密监测回输后有无并发症，积极采取相应的预防、处理措施。做好患者相关信息的登记，后续的观察与随访。