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分光光度法所采用的仪器称为分光光度计。紫外-可见分光光度计按其光学系统可分为单光束和双光束分光光度计、单波长和双波长分光光度计。分光光度计主要由光源、单色器、样品池、检测器和记录器组成，如图4-4所示。
图4-4 单光束分光光度计流程图
在紫外检测中，一般要求光源能够发射足够强度的连续光谱，具有良好的稳定性，辐射能量随波长无明显变化，使用寿命长。常用的光源有两种：钨灯和氘灯。钨灯是可见区和近红外区最常用的光源，它是一种热光源，发射的是连续光谱，使用的波长范围为300~2500nm。氘灯是一种气体放电灯，可使用范围160~360nm,其在接通电路时会放电发光。
单色器是一种将光源的混合光分解为单色光，并能任意改变波长的装置，它是分光光度计的核心，通常由入射狭缝、准直镜、色散原件、物镜和出射狭缝等构成。其中，色散原件是关键。紫外-可见分光光度计均采用棱镜或光栅作为色散原件，它们能将复合光分解为各种波长的单色光。
样品池，又称吸收池，用于盛放溶液。根据材料分为玻璃样品池和石英样品池。其中，玻璃样品池用于可见光区光谱测定，石英样品池用于紫外和可见光区光谱测定。样品池的两个光学面必须平整光洁，使用时不能用手触摸。
检测器的作用是将透过样品池的光信号转变为电信号输出，其输出信号的大小与透过光的强度成正比。常用的检测器有光电池、光电管、光电倍增管、二极管阵列等。其中，光电倍增管应用最为广泛，具有响应速度快，可检测10 -8 ~10 -9 s的脉冲光。
经光电倍增管转变的电信号，再经适当放大，可被记录器记录。随着计算机技术的发展，现在的分光光度计一般采用计算机实现自动控制、记录和数据处理。