第二单元
红细胞检测

第一节　概要

红细胞生理（掌握）

红细胞（RBC）是血液中数量最多的细胞成分，成熟RBC的平均寿命为120天、白细胞与血小板7～14天，衰老的RBC主要在脾破坏。

第二节　红细胞计数

红细胞（RBC）计数（掌握）

1．红细胞计数常用稀释液

（1）Hayem稀释液：由NaCl（调节渗透压）、Na ₂ SO ₄ （提高比重防止细胞粘连）、HgCl ₂ （防腐）和蒸馏水组成；

（2）枸橼酸钠稀释液：由NaCl（调节渗透压）、枸橼酸钠（抗凝作用）、甲醛（防腐）及蒸馏水组成。

2．牛鲍计数板计数RBC

（1）计数公式：红细胞/L＝N×25/5×10×200×10 ⁶ ＝N（5个中方格的RBC总数）/100×10 ¹² 。

（2）牛鲍计数板：中央5个中方格是红细胞和血小板计数区域，四角的4个大方格是白胞计数区域。

3．参考值：成年人：男性4.0～5.5×10 ¹² /L；女性3.5～5.0×10 ¹² /L；新生儿6～7×10 ¹² /L。

4．临床意义

（1）生理变化：①新生儿、精神刺激、剧烈运动、气压减低可导致红细胞增多；②妊娠期妇女和老年人红细胞常减低。

（2）病理变化：①急慢性失血、红细胞寿命缩短，造血原料不足，骨髓造血功能减退可引起贫血，造成红细胞（或血红蛋白）减少；②红细胞增多症、心血管疾病、肺部疾病、呕吐、严重腹泻、大面积烧伤以及某些药物均可引起RBC增多。

第三节　血红蛋白测定

血红蛋白（Hb）测定（掌握）

1．检测原理

（1）氰化高铁血红蛋白（HiCN）测定法：血液中除硫化血红蛋白（SHb）外的各种Hb均可被高铁氰化钾氧化成高铁血红蛋白，在540nm处测定吸光度，再换算得到Hb的浓度。

（2）十二烷基硫酸钠血红蛋白（SDS）测定法：血液中SHb外的各种Hb均可与低浓度SDS形成棕红色化合物，在538nm处测定吸光度，再换算得到Hb的浓度。评价：HiCN是目前国际推荐的参考方法，致命缺点是氰化钾有剧毒，SDS是次选方法。

（3）血红蛋白成分：HbA：α ₂ β ₂ ，占95%，含量最多；HbF：α ₂ γ ₂ ，胎儿血红蛋白，占1%；HbA ₂ ：α ₂ σ ₂ ，占2%～3%。

2．参考值：成年人：男性120～160g/L；女性110～150g/L。新生儿：170～200g/L。

3．临床意义：Hb和RBC临床意义相似，但在临床判断贫血程度上，Hb测定优于RBC计数。

4．HiCN法测定注意事项

（1）HiCN转化液应贮存在棕色有塞玻璃瓶中（不能用塑料瓶）；

（2）氰化钾有剧毒，测定后的废液应收集于广口容器中，稀释后加次氯酸钠混匀，敞开容器放置15小时以上再排入下水道；

（3）废液不能与酸性溶液混合，避免产生剧毒气体。

第四节　红细胞形态检查

考点一、正常红细胞形态（掌握）

正常红细胞形态特点：双凹圆盘形，大小一致，平均直径7.2μm，呈淡粉红色，中央1/3为生理性淡染区，胞质无异常结构，无细胞核。大小改变：小红细胞直径＜6μm；大红细胞直径＞10μm；巨红细胞直径＞15μm。

考点二、红细胞形态改变常见疾病（掌握）

球形RBC：遗传性或获得性球形红细胞增多症。

镰形RBC：镰状细胞贫血。

棘RBC：遗传性β脂蛋白缺乏症、尿毒症。

裂RBC：弥散性血管内凝血、正常人（＜2%）。

有核RBC：溶血性贫血最常见。

靶形RBC：珠蛋白生成障碍性贫血、缺铁性贫血。

缗钱状RBC：多发性骨髓瘤（MM）。

口形RBC：遗传性口形红细胞增多症、酒精中毒，正常人（＜4%）。

泪滴形RBC：骨髓纤维化和正常人。

考点三、红细胞内结构异常（掌握）

1．嗜碱性点彩红细胞：细胞胞质内出现形态不一，大小不等的蓝色颗粒（残存变性嗜碱性RNA），常用于铅中毒的筛查指标。

2．豪焦小体（H-J）小体：又称染色质小体，是位于成熟或幼稚红细胞细胞质中的紫红色小体，已证实为核的残余物，见于脾切除后等疾病。

3．卡波环：紫红色细线圈状、呈环形或“8”字形，可能是核膜残余物、纺锤体残余物或脂蛋白变性所致，见于白血病、巨幼细胞性贫血等疾病。

第五节　血细胞比容测定

血细胞比容（Hct）测定

1．参考值：温氏法：男性0.40～0.50；女性0.37～0.48。

（微量法为WHO推荐的常规方法；血液分析仪法：临床常用；ICSH定为参考方法：放射性核素法）。

2．温氏法操作要点：标本加入温氏管离心分5层：自上而下依次为血浆层、血小板层、白细胞层和有核红细胞层、还原红细胞层、带氧红细胞层。计算时读取还原红细胞层（紫黑红色）。

第六节　红细胞平均指数

考点一、红细胞平均指数（掌握）

考点二、贫血形态学分类及意义（掌握）

第七节　红细胞体积分布宽度

考点一、红细胞体积分布宽度（掌握）

1．红细胞体积分布宽度（RDW）：反映样本中RBC体积大小的异质程度（客观指标），常用变异系数（CV）表示。

2．参考值：11.6～14.6%。

3．临床意义：贫血形态学分类：根据RDW和MCV将贫血分为小细胞均一性、小细胞不均一性、正常体积均一性、正常体积不均一性、大细胞均一性、大细胞不均一性。红细胞直方图波峰（主峰）左移：小细胞、MCV↓；波峰右移：大细胞、MCV↑。峰底变宽：不均一，RDW↑；峰底变窄：均一性，RDW正常。

考点二、贫血MCV/RDW分类法（掌握）

第八节　网织红细胞计数

网织红细胞（Ret）计数

1．原理：网织红细胞是介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间的过渡细胞，属于未完全成熟的红细胞。胞质内残存嗜碱性物质核糖核酸（RNA），可被新亚甲蓝、煌焦油蓝等染料活体染色呈网状或颗粒状结构而得名。

2．分类：

（1）网织红细胞根据形态特征和成熟程度分为4型：Ⅰ型（丝球型）、Ⅱ型（网型）、Ⅲ型（破网型）和Ⅳ型（点粒型）。

（2）正常人外周血可见Ⅲ型和Ⅳ型，Ⅲ型占20%～30%，Ⅳ型占70%～80%，若骨髓增生明显，可出现Ⅰ、Ⅱ型。

3．参考值：显微镜计数法：成年人0.008～0.02或（25～85）×10 ⁹ /L；新生儿0.02～0.06。

Ret绝对值（×10 ⁹ /L）＝红细胞×Ret百分数（%）。

4．临床意义

（1）是反映骨髓造血功能的重要指标，当骨髓Ret增多，而外周血Ret减少时，提示释放障碍。Ret增多：常见于溶血性贫血；Ret减少：常见于再生障碍性贫血。

（2）观察贫血疗效：缺铁性贫血（或巨幼细胞性贫血）给予铁剂（叶酸和维生素B ₁₂ ）治疗，3～5天Ret开始上升，7～10天达到峰值，2周左右开始下降。Ret是判断缺铁性贫血铁剂治疗有效的最快速指标。

5．操作方法

（1）操作步骤：2滴10g/L煌焦油蓝溶液和2滴全血立即混匀，37℃放置15～20分钟，推片制片后，在油镜下计数至少1000个红细胞中网织红细胞数。

（2）计算公式：①常规法：1000个红细胞中的网织红细胞数/1000×100%；②Miller窥盘计数公式：大方格B内的网织红细胞数/（小方格A内的红细胞数×9）×100%。该方法为ICSH推荐方法。

第九节　点彩红细胞计数

嗜碱性点彩红细胞（掌握）

1．操作方法

（1）计数：选择合适部位，用油镜计数1000个红细胞中嗜碱性点彩红细胞数。

（2）计算：嗜碱性点彩红细胞分数＝计数的嗜碱性点彩红细胞/1000。

2．临床意义

增高常见于：①中毒（铅、汞等）；②各类贫血，如溶血性贫血、巨幼细胞性贫血、恶性贫血等。

第十节　红细胞沉降率测定

红细胞沉降率（ESR）（掌握）

1．原理：ESR是离体抗凝全血静置后，红细胞在单位时间内沉降的速度，分3期：①缗钱状红细胞形成期；②快速沉降期；③细胞堆积期。

2．魏氏法：魏氏法为ICSH推荐方法。

3．参考值：魏氏法（正常成年人）：男性0～15mm/h；女性0～20mm/h。

4．影响因素：小分子蛋白质如清蛋白、卵磷脂等使血沉减慢；大分子蛋白质如纤维蛋白原、急性反应蛋白、免疫球蛋白、巨球蛋白、胆固醇和甘油三酯等使血沉加快。 iDl1S9/xfllSdN6WVfvn0AjDJcsZbyWIbE8jVbjORSZO8l5RyJAJe2NrA3hy4Yxk