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第一单元
血液样本采集和血涂片制备

第一节 血液生理概要

血液的组成及生理功能(掌握)

1.组成:血液由血细胞(红细胞、白细胞、血小板)和血浆组成。血清与血浆相比,血清缺少一部分凝血因子,如Ⅰ(纤维蛋白原)、Ⅱ(凝血酶原)、Ⅴ、Ⅷ等凝血因子。

2.血液性质:

(1)血量:血浆占55%,血细胞占比45%。

(2)酸碱度:pH7.35~7.45。

(3)血浆渗透压:290~310mOsm(kg·H 2 O)。

(4)健康成年人全血黏度为生理盐水的4~5倍。

(5)比密:1.050~1.060,男性:1.055~1.063;女性:1.051~1.060。

3.生理功能:运输功能、协调功能、维护机体内环境稳定和防御功能。

4.血液特性:红细胞的悬浮稳定性、黏滞性、凝固性。

第二节 采血方法和采血管选择

考点一、采血方法(掌握)

1.静脉采血法:成年人静脉采血常选肘部静脉(压脉带捆绑不超过1分钟)。

2.真空采血法:真空采血法是一种新的静脉采血法,又称负压采血法。真空采血装置有套筒式、头皮静脉式两种。

3.皮肤采血法:通常选择耳垂或手指部位。WHO推荐血常规检查采集左手无名指指端内侧血液,婴幼儿可选择大拇趾或足跟内外侧缘血液,严重烧伤患者可选择皮肤完整处。

方法评价:真空采血法是ICSH推荐的采血方法,也是临床常用的采血方法。

考点二、常用真空采血管比较(掌握)

表1-1-1 常用真空采血管比较

第三节 抗凝剂选择

常见抗凝剂原理及其用途(熟练掌握)

表1-1-2 常用抗凝剂比较

第四节 血液涂片制备

血涂片的制备(掌握)

1.手工推片法:涂片时,推片与载玻片保持25°~30°夹角。

2.厚血膜涂片法:临床上常用厚血膜法检查疟原虫与微丝蚴。

3.良好血涂片标准:厚薄适宜、头体尾分明、细胞分布均匀、血膜边缘整齐、两侧有一定空隙、血膜占玻片的2/3。

4.方法学评价:手工推片法用血量少、操作简单,是应用最广泛的方法。此外,疟原虫、微丝蚴等检查可采用厚血膜涂片法。

5.质量控制:血细胞比容增高,血液黏度较高时,应小血滴、小角度、慢推,反之亦然。新载玻片必须用1mol/L的盐酸清洗后才能使用。

第五节 血液细胞染色

考点一、瑞氏染色(掌握)

瑞氏染色是血涂片最常用、最经典的染色方法,对细胞质和颗粒染色效果好。

1.染液组成:碱性亚甲蓝、酸性伊红、甲醇(作为溶剂及固定细胞形态)。

2.原理:物理吸附和化学亲和作用。

3.染色效果:最适pH为6.4~6.8。若缓冲液偏酸,则红细胞和嗜酸性粒细胞偏红,细胞核呈淡蓝色或不着色。若缓冲液偏碱,细胞染色染成灰蓝色,颗粒深暗;嗜酸性粒细胞可染成暗褐色,甚至棕黑色;中性颗粒偏粗,染成紫黑色。

4.注意事项:(1)在距玻片另一端2cm处结束涂抹为宜;(2)血涂片上有染料颗粒沉积,可滴加甲醇,然后立即用流水冲洗;(3)染色过淡,可复染,复染时先加缓冲液再加染液;(4)新鲜配制的染液染色效果差,应贮存一段时间,时间越久,染色效果好。

考点二、吉姆萨染色(掌握)

吉姆萨染色对细胞核和寄生虫着色较好。

1.染液组成:天青、伊红、甲醇、纯甘油。

2.原理:同瑞氏染色。

记忆方法:血红蛋白,嗜酸性颗粒(碱性蛋白质):具有嗜酸性——伊红结合;细胞核蛋白、淋巴细胞、嗜碱性粒细胞胞质(酸性蛋白质):具有嗜碱性——亚甲蓝结合。 G0XcVifgCKYn+wVXRwXfbQbVXLCZeqCNF9BPFA2xtGKAbITuIcboeGBDbptaC8DI

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