血细胞化学染色(掌握)
1.过氧化物酶(POX)染色
(1)POX染色阳性结果:为胞质内出现棕黑色颗粒。
(2)染色反应:嗜酸性粒细胞为强阳性;自早幼粒细胞至成熟中性粒细胞均呈阳性反应;单核细胞系呈阴性或弱阳性;嗜碱性粒细胞、淋巴细胞系等其他系统细胞均为阴性。
(3)鉴别:①急性粒细胞白血病时,白血病细胞多呈强阳性反应;急性单核细胞白血病时呈阴性反应或弱阳性反应;②急性淋巴细胞白血病,原始和幼淋巴细胞则为阴性反应;③成熟的中性粒细胞POX活性增高见于再生障碍性贫血、感染(特别是化脓菌感染)、急性和慢性淋巴细胞白血病;活性减低见于急性和慢性粒细胞白血病、急性单核细胞白血病、MDS等。
2.过碘酸-雪夫(PAS)染色
(1)PAS染色阳性结果:胞质内出现红色颗粒、块状或呈弥漫性红色。
(2)主要鉴别:①红血病和红白血病呈(+),巨幼细胞性贫血呈(-);②骨髓异常增生综合征(MDS)呈(+),再生障碍性贫血呈(-);③戈谢病呈(++++),尼曼-匹克病呈(±),且空泡中心为阴性反应。
3.碱性磷酸酶(NAP)染色
(1)原理:偶氮偶联法,细胞胞质内出现灰黑色沉淀为阳性反应。
(2)染色反应:成熟中性粒细胞呈阳性反应,其他血细胞均呈阴性反应。
(3)NAP积分鉴别作用:①慢性粒细胞白血病(↓,常为“0”)与类白血病反应(↑);②再生障碍性贫血(↑)与阵发性睡眠性血红蛋白尿(↓);③急性粒细胞白血病(↓)和急性淋巴细胞白血病(↑);④细菌性感染(↑)与病毒性感染(无变化);⑤真性红细胞增多症(↑)与继发性红细胞增多症(无变化);⑥原发性血小板增多症(↑)与继发性血小板增多症(无变化);⑦恶性组织细胞病(↓)与反应性组织细胞增多症(无变化)。
4.氯乙酸ASD萘酚酯酶染色
(1)阳性结果为胞质内出现红色沉淀。
(2)粒细胞特异性染色:NAS-DCE几乎仅存在于粒细胞,其特异性高,又称为粒细胞酯酶。以早幼粒和中幼粒细胞阳性反应最强。
5.α-醋酸萘酚酯酶(α-NAE)染色
(1)α-NAE染色阳性结果:细胞形成不溶性棕黑色颗粒沉淀。
(2)染色反应:部分原始白血病细胞阳性反应可被氟化钠抑制,其他系细胞不被抑制。
(3)鉴别:急性单核细胞白血病时,反应呈阳性,可被氟化钠抑制;其他系白血病呈阳性反应时,不被氟化钠抑制。
6.酸性磷酸酶(ACP)染色
(1)ACP染色阳性反应:细胞形成不溶性红色沉淀为阳性反应。
(2)鉴别:①戈谢细胞(+)与尼曼匹克细胞(-);②T淋巴细胞(+)与B淋巴细胞(-);③多毛细胞白血病时多毛细胞、淋巴肉瘤细胞和慢性淋巴细胞白血病的淋巴细胞,ACP染色都为阳性,但前者耐L-酒石酸的抑制作用,后两者可被L-酒石酸的抑制。
7.铁染色
(1)阳性反应:细胞内形成蓝色的亚铁氰化铁沉淀。
(2)正常血细胞的染色反应:①细胞外铁:存在于骨髓小粒中,为(+)~(++);②细胞内铁:铁粒幼红细胞是指胞质中出现蓝色铁颗粒的幼红细胞,正常细胞铁粒幼红细胞阳性率为12%~44%,以I型多见。环形铁粒幼红细胞是指幼红细胞胞质内蓝色颗粒在5颗以上,围绕核周1/3以上者。
(3)临床意义:主要用于鉴别缺铁性贫血(细胞内铁和外铁均减低)和铁粒幼红细胞贫血(细胞外铁和内铁均升高,出现较多环形铁粒幼细胞)。