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第二节
浆膜腔液的细胞成分

一、细胞成分概述

1. 与病变无关的成分

指样本采集的过程中掺杂到样本内的成分。

皮肤——鳞状上皮细胞或组织碎片;皮下组织——脂肪、骨骼肌、软骨等;器官的间质——如肺、肝脏等器官的间质成分。

2. 血液

操作过程出血或血性浆膜腔积液。

3. 浆膜腔细胞

包括:炎性细胞,如中性粒细胞、淋巴细胞及巨噬细胞等;间皮细胞;浆膜腔原发性肿瘤细胞。

4. 外源性细胞

主要有转移性肿瘤细胞;空腔脏器穿孔(hollow viscus perforation)所带入浆膜腔的细胞。

二、良性间皮细胞

见图9-1~9-12。

图9-1 良性间皮细胞(中倍、液基、巴氏染色)
胸水,注意箭头所指的间皮细胞近核胞质深染及外周胞质浅染透亮。

图9-2 良性间皮细胞(中倍、液基、巴氏染色)
腹水,注意箭头所指的反应性间皮细胞的多核现象。

图9-3 良性间皮细胞(高倍、液基、巴氏染色)
胸水,细胞形态大小规则,核居中,核膜光滑,胞质深染,为良性间皮细胞。

图9-4 良性间皮细胞(高倍、液基、巴氏染色)
胸水,间皮细胞的反应性改变,可见核分裂现象(红箭头)及细胞之间特征性的“开窗”现象(蓝箭头)。“开窗”现象是间皮细胞的特征之一。

图9-5 良性间皮细胞(高倍、液基、巴氏染色)
胸水,细胞呈片状或团状分布,核居中,胞质近核处深染,远核处浅染。

图9-6 良性间皮细胞(高倍、液基、巴氏染色)
胸水,平铺成片的间皮细胞,核形态一致。

图9-7 良性间皮细胞(高倍、液基、巴氏染色)
胸水,大多数反应性间皮细胞可呈单个分布,但有时也可紧密成团或呈乳头状结构,很容易与恶性肿瘤细胞混淆。间皮细胞的形态特点有助于两者的鉴别。

图9-8 良性间皮细胞(高倍、液基、巴氏染色)
腹水,良性的球团状细胞,避免过度诊断为肿瘤细胞。

图9-9 良性间皮细胞(高倍、液基、巴氏染色)
腹水,此胶原球是以胶原为核心,外周包绕了间皮细胞,中央也包裹了一些间皮细胞。常见于腹腔冲洗液中,也可见于良性的间皮细胞增生以及间皮瘤,但极少见于腺癌的浆膜腔液中。为良性球团状细胞,避免误判读为腺癌。

图9-10 良性间皮细胞(中倍、液基、巴氏染色)
腹腔冲洗液,细胞排列十分规则,呈蜂窝状,片状及重叠的三维立体结构。

图9-11 良性间皮细胞(高倍、液基、巴氏染色)
腹腔冲洗液,细胞核异型性较小,核膜光滑,染色质均匀,核仁小,规则排列。插图是所谓的“纤毛丛”(箭头),它们不是细胞,而是有纤毛的无核细胞碎片,可能是女性苗勒管上皮细胞的生理性脱落。

图9-12 良性间皮细胞(高倍、液基、巴氏染色)
胸水,细胞紧密相连,胞核增大,染色质粗糙,分布均匀,核仁突出,核质比增加。有时这些反应性改变很难与恶性肿瘤细胞相区别。

1. 正常间皮细胞

浆膜腔液中最重要的成分之一是间皮细胞,常见单个散在或松散平铺成片,有时也可聚成小的细胞团。在超微结构上,间皮细胞因胞质中有桥粒和中间丝(似鳞状上皮细胞),以及具有细而长的微绒毛而有别于转移性肿瘤细胞。识别间皮细胞的几个重要特征:①微绒毛的结构使间皮细胞胞质边界模糊,单个细胞呈现“光环”(或称为“花边”、“围裙”)样表现;②在两个或多个细胞之间的“开窗”现象(相邻细胞的交界处存在空隙);③间皮细胞的中间丝聚集于细胞质的中间部分,使得近核周的胞质深染,近胞体外缘的胞质浅染。此外,胞质丰富并有空泡,呈碱性深染。间皮细胞的核通常居中或轻度偏位,圆形或卵圆形,可有多核细胞,可见红染的小核仁,核膜光滑,染色质分布均匀呈颗粒状。

2. 反应性间皮细胞

细胞形态特征:除了具有正常间皮的一些特点外,反应性间皮较正常间皮大,多为圆形或卵圆形,偶尔也可呈不规则形。胞核增大,居中或偏位,染色质不规则、粗大而浓染,可见突出的嗜酸性核仁、核分裂象;胞质可多可少,嗜碱深染,常较均匀,偶见空泡;尚可有多核细胞。反应性间皮细胞聚集成团时外观可呈球形或扇形,具光滑的轮廓,也可见“开窗”现象。

浆膜腔积液的形成总是因某种病理过程所致(如:肺梗死、炎性、化疗或放疗等),任何一种病理性因素均可引起间皮细胞不同程度的反应性改变,表现为增生、双核或多核,核增大,核质比高,染色质粗、浓染,还可见核分裂,有时这种反应性改变可使间皮细胞外观酷似恶性细胞,易导致假阳性诊断,应注意鉴别。

有的间皮细胞胞质空泡样,与组织细胞难以区分,好在二者均非恶性细胞,无须刻意鉴别。偶尔还能见到间皮细胞胞质中含单个变性空泡,酷似“印戒细胞”,则必须加以鉴别。注意:间皮细胞胞质的空泡是细胞变性后产生的;而真正的印戒样腺癌细胞的“空泡”由黏液构成,胞核被挤到细胞边缘呈月牙状。

反应性间皮偶尔也可出现假乳头状结构,酷似恶性肿瘤,判读时应谨慎。一般而言,在良性浆膜腔液中极少出现大量的聚集成团的间皮细胞,若出现大量上皮样细胞团时应高度怀疑恶性肿瘤。鉴别困难时可借助免疫组织化学染色。

3. 浆膜腔冲洗液(washing fluid of serous cavity)中的间皮细胞

最常见于妇科手术中的腹腔冲洗液,主要用于对妇科恶性肿瘤(卵巢及子宫内膜)的分级,发现潜在的恶性肿瘤,评估对治疗的反应,以及对非妇科恶性肿瘤(如胰腺及消化道)的分级。腹腔冲洗液是用生理盐水冲洗盆腔及凹陷处之后的回收液。冲洗液与积液的不同在于,冲洗液中的间皮细胞是因为机械力的作用而剥脱的,因而可见到大量成片的间皮细胞,呈蜂窝状排列或折叠为三维立体结构等,其细胞形态的不典型性表现与前述反应性间皮相似,核膜光滑、核染色质分布均匀呈细颗粒状等良性特征有助于与恶性细胞鉴别。

4. 确认间皮细胞的方法

(1)免疫组织化学染色:CK7、Vimentin阳性,EMA弱阳性;CR(Calretinin)、CK5/6、WT-1、D2-40阳性;CEA、MOC-31、Ber-EP4、CD15(Leu-M1)阴性。

(2)电镜:电镜检查可见胞质内具有桥粒(desmosomes)、核周张力丝(perinuclear tonofilament)及细长的微绒毛(long slender microvilli)等结构。

三、炎性成分

1. 中性粒细胞(neutrophils)

以中性粒细胞为主的积液提示急性炎性反应,包括感染性和非感染性的。

2. 嗜酸性粒细胞(eosinophils)

积液中嗜酸性粒细胞计数大于10%时可称为嗜酸性粒细胞增多,可见于肺炎、肺梗死、肿瘤、变态反应及寄生虫感染等。

3. 巨噬细胞(macrophages)

巨噬细胞是积液中的常见成分,其大小与间皮细胞相似,因此有可能将巨噬细胞误认为是间皮细胞。鉴别:巨噬细胞核偏位,呈肾形;胞质浅染,有空泡,含吞噬体;多为单核,而少见多核巨噬细胞。图9-13为多核巨噬细胞。

图9-13 多核巨噬细胞(高倍、液基、巴氏染色)
腹腔冲洗液,多核巨噬细胞为良性成分。

4. 淋巴细胞(lymphocytes)

是积液中的常见成分,为炎症反应性的细胞。鉴别:白血病或淋巴瘤的异型淋巴细胞。

四、其他良性病变

1. 充血性心衰(congestive heart failure)积液

充血性心衰时的浆膜腔积液以漏出液为主,表现为大量中性粒细胞、淋巴细胞及退变的巨噬细胞,间皮细胞常呈片状及团状。

2. 肺梗死(pulmonary infact)积液

肺梗死时的浆膜腔积液以渗出液为主,含有成片、成团的反应性或增生性间皮细胞,还可见奇形怪状的巨噬细胞、吞噬含铁血黄素的巨噬细胞。

3. 特发性嗜酸性积液(idiopathic eosinophilic effusion)

特发性嗜酸性积液为渗出液,含丰富的嗜酸性粒细胞、淋巴细胞,少量间皮、巨噬细胞或浆细胞。

4. 肝硬化腹水(cirrhosis of the liver)

肝硬化腹水常为漏出液,含少量巨噬细胞及间皮,无炎性成分;并发腹膜炎时则为渗出液。

5. 子宫内膜异位症(endometriosis)积液(图9-14~9-16)

图9-14 输卵管子宫内膜异位(高倍、液基、巴氏染色)
腹腔冲洗液,细胞紧密排列呈乳头状结构。妊娠时这些细胞十分活跃而表现出明显的异型性。

图9-15 输卵管子宫内膜异位(高倍、液基、巴氏染色)
腹腔冲洗液,细胞形态大小规则一致,胞质少,核质比较高,核膜光滑,核染色质细而均匀,核仁不明显,有时容易误诊为恶性肿瘤。

图9-16 输卵管子宫内膜异位(高倍、液基、巴氏染色)
腹腔冲洗液,它最具特征性的形态是紧密聚集的细胞排列成乳头状,细胞多为单层排列,极少见单个细胞。

浆膜腔子宫内膜异位症时可产生血性积液,为渗出液。涂片可见子宫内膜细胞、吞噬含血铁黄素的巨噬细胞。在女性腹腔冲洗液样本中,最具特征性的子宫内膜细胞形态:细胞紧密聚集成乳头状结构,多为单层排列,极少见单个细胞散在;细胞形态规则、大小一致,胞质少而碱染,核质比大;核偏位,圆形或卵圆形,核膜光滑,染色质细而均匀,核仁不明显;常见细胞围绕着砂粒体而容易被误判为恶性肿瘤。妊娠时这些细胞十分活跃而表现出明显的异型性,特别值得警惕。

图9-17~9-19为肠内容物污染图片。

图9-17 肠内容物污染——细菌及真菌(高倍、液基、巴氏染色)
腹水,因肠内容物进入腹腔而致的细菌及真菌(红箭头)。

图9-18 肠内容物污染——植物纤维(中倍、液基、巴氏染色)
腹水,箭头所指的块状物为植物纤维,肠内容物进入腹腔所致。

图9-19 肠内容物污染——动物纤维(高倍、液基、巴氏染色)
腹水,箭头所指的块状物为动物纤维,肠内容物进入腹腔所致。 c1YSnSQDToJ2OMC7bc0eaZqngcqFjJ5RFzj4tII0mN4sFH0wtQAjxvstpeZwh5co

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