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二、检验诊断

【检验项目】

1.血常规

(1)检测方法:自动血液细胞分析仪法。

(2)标本:EDTA-K 2 抗凝全血。

(3)临床诊断价值和评价:急性单纯疱疹病毒感染后,外周血白细胞数轻度升高,以中性粒细胞为主。白细胞数升高不是单纯疱疹病毒脑炎的特异指标,生理性因素和大部分细菌性感染、尿毒症、烧伤、手术后、传染性单核细胞增多症、白血病等都有不同程度的白细胞升高。

2.脑脊液常规

(1)外观及压力:HSE时,脑脊液压力增高,外观清亮或微显混浊,重症病例可见脑脊液黄变。

(2)细胞计数及分类:细胞数一般为(50~100)×10 6 /L,可高达1000×10 6 /L,以淋巴细胞为主,可出现红细胞。

(3)蛋白质测定:HSE患者脑脊液蛋白正常或轻度增高,通常为0.8~2.0g/L。

(4)葡萄糖及氯化物测定:脑脊液葡萄糖和氯化物含量正常。

3.单纯疱疹病毒抗体

(1)检测方法:可用补体结合试验、血凝抑制试验、ELISA等方法检测抗单纯疱疹病毒IgM和IgG抗体。

(2)标本:血清、脑脊液。

(3)参考范围:正常人血清和脑脊液抗单纯疱疹病毒抗体阴性。

(4)临床诊断价值、方法学评价、问题:测定单纯疱疹病毒IgM特异性抗体,可以作出早期诊断。单纯疱疹病毒IgG特异性抗体为既往感染的指标。诊断HSE需要血和脑脊液的抗体测定,可根据下列标准作出诊断:①病程中2次及2次以上抗体滴度呈4倍以上;②单份脑脊液抗体滴度大于1∶80;③单份血清/脑脊液抗体滴度≤40。目前临床上常用ELISA检测单纯疱疹病毒IgM或IgG,具有高度的敏感性和特异性。

4.单纯疱疹病毒抗原

(1)检测方法:免疫荧光(IF)法、免疫酶法(IEA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)。

(2)标本:脑活检标本(免疫荧光技术和免疫酶法)、脑脊液(ELISA)。

(3)参考范围:阴性。

(4)临床诊断价值、方法学评价、问题:脑脊液或脑活检标本中检出单纯疱疹病毒是诊断HSE的早期指标。免疫荧光技术和免疫酶法有较高的敏感度,但都需要脑活检标本,临床应用有一定限制。ELISA具有高度的敏感性和特异性,检测的标本是脑脊液,故临床上应用较多。

5.脑脊液HSV-DNA

(1)检测方法:多元巢式PCR或荧光定量PCR直接扩增HSV-DNA。

(2)标本:脑脊液。

(3)参考范围:阴性。

(4)临床诊断价值和评价:PCR扩增检测HSV-DNA适用于早期检测诊断,具有极高的敏感性和特异性。有免疫缺陷的患者血清学试验可阴性,临床表现亦不典型,PCR检测HSV-DNA尤其重要。现已有作者报道用荧光定量PCR法(FQ-PCR)定量检测脑脊液中HSV-DNA,所得定量结果准确率极高。

【应用建议】

1.HSE诊断有一定的困难,脑电图异常及影像学表现可以协助诊断,但确诊有赖于血清和脑脊液的病毒免疫学及病毒分子生物学检查。

2.脑脊液常规和生化为必检项目,借此有助于鉴别细菌性、结核性及真菌性脑膜炎。HSE时脑脊液红,白细胞数增多(WBC≥5×10 6 /L),可见异常淋巴细胞,糖和氯化物正常。

3.HSE确诊申请检验项目

(1)脑脊液中的HSV抗原检测:若脑脊液中HSV抗原为阴性,则可排除HSE。

(2)血和脑脊液中HSV抗体检测:血和脑脊液HSV抗体比值小于40∶1有诊断价值;或第二、三次测定脑脊液HSV抗体比第一次呈4倍以上阳性亦可确诊,要求两次检验间隔一周以上。

(3)脑脊液中的HSV-DNA检验亦可早期确诊,标本最好为第二周内采取。

4.脑组织活检或病理发现组织细胞核内包涵体,或原位杂交发现HSV病毒核酸;头颅CT或MRI发现颞叶局灶性出血性脑软化灶;脑电图以颞、额区损害为主的脑弥漫性异常均可作为实验室诊断HSE依据。

(陈晓丽 李小龙) d1zFriWj83clJCx+5cH2splL/U8AVpNoZIeYjZ2KBSc6uqTmBwPokLH3aHWNV/yR

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