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CADASIL目前实验室常规检查项目较少，其实验室诊断主要依据分子生物学技术如 Notch-3 基因突变检查以及病理检查。
1.脑脊液细胞计数及分类
（1）检测方法：显微镜镜检法。
（2）标本：脑脊液、脑池液、脑室液。
（3）参考范围：无色透明，白细胞0～5×10 6 /L，以单核细胞为主，红细胞为0。
（4）临床诊断价值和评价：大多数病例无色透明，尤其是24小时后仍无色透明则支持缺血性脑血管病，CADASIL病也不例外。细胞数大多正常，但出现梗死时，白细胞增多，通常小于50×10 6 /L，如果梗死继发出血，CSF中可出现红细胞，甚至血性（红细胞在1000×10 6 /L）。
（5）方法学评价和问题：见其他相关章节。
2.脑脊液总蛋白
（1）检测方法：双缩脲干化学法、磺柳酸-硫酸钠比浊法。
（2）标本：脑脊液、脑池液、脑室液。
（3）参考范围：蛋白定性（Pandy试验）阴性，定量试验蛛网膜下腔CSF为0.15～0.5g/L，脑池液为0.1～0.25g/L，脑室液为0.05～0.15g/L。
（4）临床诊断价值、方法学评价、问题：CADASIL患者的脑脊液总蛋白一般会增高，尤其是在皮质下梗死发作时，但一般不超过1g/L。双缩脲干化学法具有快速、准确、重复性较好的特点，适合急诊检验；磺柳酸-硫酸钠比浊法为早期蛋白定量方法，该法线性范围窄，重复性差，影响因素较多，一般适合门诊或基层单位使用。
3.同型半胱氨酸（HCY）
（1）检测方法：酶免疫化学发光法。
（2）标本：EDTA抗凝血血浆、脑脊液。
（3）参考范围：≤15μmol/L。
（4）临床诊断价值、方法学评价、问题：有学者研究发现，CADASIL患者的HCY水平明显高于正常对照组，说明高同型半胱氨酸血症与CADASIL的发病病程有一定的关系。
1.病理学分析
（1）检测方法：显微镜检。
（2）标本：病变组织。
（3）临床诊断价值和评价：CADASIL病理改变为脑深部多发的腔隙梗死和白质脑病，以及小动脉中层平滑肌细胞表面GOM的沉积，这些特征性的病理改变是诊断CADASIL的“金标准”。
2. Notch-3 基因突变
（1）检测方法
1）盐析法提取患者外周血基因组DNA，酚/氯仿法提取肌肉组织基因组DNA。
2）聚合酶链反应（PCR）：①引物覆盖了 Notch-3 基因编码区的外显子1～12及其两旁的内含子序列；②25μl PCR反应体系中含引物各0.2μmol/L，dNTP 100μmol/，Tris-HCl 10mmol/L，KCl 50mmol/L，Mg 2+ 1.5mmol/L，0.1%TritonX-100，Taq酶1U，DNA模板50～100ng；③PCR反应条件：94℃预变性5分钟，94℃变性45秒，56℃退火45秒，72℃延伸45秒，共30个循环，最后1个循环后72℃延伸10分钟；④反应结束后，以1.5%琼脂糖凝胶（内含0.5μg/ml的溴化乙啶）电泳检测PCR产物。
3）取100μl PCR产物进行扩增、纯化，然后用DNA全自动测序仪测序，对发现的突变再进行反向测序证实。
（2）标本类型：2ml EDTA-K 2 静脉血、脑活检组织。
（3）临床诊断价值、方法学评价、问题
1）有学者利用正、反向测序证实先证者存在 Notch-3 基因的杂合性突变，且突变位点各不相同，有的突变位于外显子3，分别为268C→T、322C→T和328C→T突变（核苷酸的位置从翻译起始密码子ATG的A算起），造成Notch-3蛋白质突变分别为R90C、C108R和R110C；有的先证者突变位于外显子11为1819C→T，造成R607C。其他常见基因的错义突变如表1-7。
表1-7 CADASIL患者 Notch-3 基因的错义突变
续表
2）CADASIL是由 Notch-3 基因突变引起， Notch-3 基因突变所致的血管平滑肌细胞的变性可能在CADASIL的发病机制中起重要作用。
3）基因检测（即DNA测序）可以十分有效地诊断该病，但若基因突变的部位不发生在最常见的第4号外显子或较常见的第3、5、6号外显子时，测序十分耗时，同时因外显子数量多而使检测费用昂贵。
4）病理改变为脑深部多发的腔隙梗死和白质脑病，以及小动脉中层平滑肌细胞表面GOM的沉积，这些特征性的病理改变是诊断CADASIL的“金标准”。
5）该病PCR方法检测成功的关键在于引物的设计，建议用primer软件设计引物。CADASIL诊断用的常用引物如表1-8。
表1-8 Notch-3 基因PCR扩增引物
续表
1.怀疑CADASIL时，首选检验组合建议为病理学分析+同型半胱氨酸（HCY）+脑脊液细胞计数及分类。
2.CADASIL的分子生物学诊断检验组合建议为病理学分析+ Notch-3 基因突变检测。
（李小龙 王汉旻）