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梅毒螺旋体直接免疫荧光试验（direct fluorescent antibody test，DFA）是将可疑的样本制成涂片作为抗原，加入荧光素（fluorescein isothiocyanate isomer I，FITC）标记的抗梅毒螺旋体单克隆抗体，或FITC标记的抗螺旋体多价球蛋白经密螺旋体（Reiter株）吸收后的抗体。如样本中存在梅毒螺旋体，即与荧光抗体特异性结合，在荧光显微镜下梅毒螺旋体显示苹果绿色荧光。DFA法可用于检测与鉴别组织液和溃疡渗出液中致病性螺旋体。
梅毒螺旋体侵入人体后，在皮肤黏膜下增殖形成一期梅毒的硬下疳，并很快沿着淋巴管到达附近淋巴结引起淋巴结肿大；梅毒螺旋体再由局部经淋巴结进入血液，播散后而出现二期梅毒的全身表现，主要为皮肤黏膜损害，有扁平湿疣、黏膜斑和玫瑰斑疹等；晚期梅毒时可引起组织病理改变。患梅毒的妊娠妇女可以通过胎盘使胎儿受染，引起新生儿皮损。因此，在皮损组织液，淋巴结和妊娠妇女羊水穿刺液以及病理组织中可以查到梅毒螺旋体。