显微镜各项性能要保持良好。光学显微镜应做好日常保养,尤其是油镜,用后要清洁油镜头,可用二己酸酯或酒精乙醚清除香柏油,防止镜头潮湿霉变。
质控样本制备要进行登记,登记内容包括制备日期、试剂及批号、实验样本、阴阳性对照来源、制备人等。
刮取溃疡渗出液约10μl,均匀地涂布于洁净载玻片上,空气干燥15分钟,-20℃存放。
仔细切取一小块兔睾丸的感染部位或坏死组织,将组织块在玻片上滚动,确保含有螺旋体的组织表面印迹在玻片上,空气干燥15分钟,-20℃存放。
根据试剂盒说明加入复溶液,振荡器振荡10秒钟充分混匀螺旋体悬液,经暗视野显微镜检查菌液浓度是否适宜,用接种环取菌悬液,均匀的涂布于洁净载玻片上,涂布成5~8mm大小圆圈,空气干燥15分钟,-20℃存放。
用大肠埃希菌涂片作阴性对照片,-20℃存放。
银氨染液应在临用前配制,不可预先配制,以免影响螺旋体着色效果,并做好染液配制记录,包括试剂厂家、批号、配方、配制日期、配制人等。染色液配制好后用阴阳性对照片染色作质控,观察染色液质量。
1.将阴性与阳性质控标本自冰箱取出并恢复至室温。
2.每一批样本检测时应加入阴性和阳性对照,严格按照标准操作在相同条件下平行进行染色。
3.阳性质控片染色看见染成棕褐色典型螺旋体,阴性质控片未见染成棕褐色的螺旋体。
4.记录实验原始登记表,包括实验日期、试剂及批号、实验样本、阳性对照、阴性对照、操作者等。
5.所有染色涂片标本应编号登记置于标本盒保存一年以上。