第五节
方法学应用与评价

梅毒螺旋体无法在人工合成的培养基中生长，动物实验不能作为常规的检测方法，因此，暗视野检查无疑是梅毒病原学检查中最经典的方法之一。在早期梅毒如一期梅毒、二期梅毒和早期先天梅毒有皮损存在的情况下，暗视野检查是唯一能够确诊的床边快速检验方法。直至今天，虽然先进的分子生物学技术已广泛应用，但对于梅毒早期诊断来说，暗视野检查仍是一个基本的检测方法，已被各国推荐应用。美国CDC和中国国家梅毒诊断标准等均将暗视野检查列为梅毒病原学检查的常规方法。

暗视野检查的临床应用受多方面因素影响。其中暗视野显微镜性能、训练有素的技术人员以及样本采集质量均对该试验结果是否满意具有决定性作用。因此，该检查限于在专业的实验室开展。

暗视野检查的临床应用研究国内外有较多报道，但国外文献主要集中在20世纪90年代以前，国内则集中在近10～20年，究其原因可能与梅毒在国内外的流行情况密切相关。相关文献从方法学评价对暗视野检查的敏感性和特异性进行研究。Daniels和Romanowski等研究表明暗视野检查的敏感性分别是73.8%和78.8%，也有文献研究暗视野检查的敏感性和特异性分别为74%～86%和85%～100%。国内顾伟鸣等对456例一期梅毒的研究结果显示，暗视野检查一期梅毒的敏感性为72.8%，低于TPPA的83.6%，但高于RPR的62.7%；而黄澍杰等的研究结果的敏感性只有54.84%。尽管不同研究结果之间的差异无法用统计学方法进行比较，但其敏感性与不同实验室间的综合检测能力，包括暗视野显微镜、人员素质及样本采集等因素是否达到最佳状态有关。

暗视野检查作为早期梅毒重要的检测方法之一，理应发挥积极作用，但是事实却并非如此，国内许多医疗机构实验室并没有将暗视野检查作为早期梅毒常规的检查项目。主要原因，首先是皮肤性病科医生对该检查的意义未引起重视；其次是该检查对实验室人员的技术要求较高，普通实验室技术人员如果没有接受过严格的暗视野检查技术培训，难以掌握该检查技术；再次是部分实验室多采用简易光栅式暗视野聚光器或配置较低、性能较差暗视野显微镜，无法确保观察到梅毒螺旋体，就算条件较好的实验室，也极少采用专用的100×物镜确认螺旋体形态和运动性，因此一般实验室普遍无法达到所需要求并且难以获得满意的检出率；最后是早期梅毒在梅毒总报病数中所占比例较低，一些早期梅毒病例临床表现不典型，也容易被忽视。

综上所述，梅毒病原体检查是确诊的重要指标，特别是对于一期梅毒的硬下疳期、血清学反应为阴性或弱反应，故暗视野检查作为诊断早期梅毒的重要方法。临床上应提高专科医生的认识，实验室要配置较好的暗视野显微镜，培训技术人员掌握检测技术，确保获得满意的检测敏感性和特异性，才能充分发挥其早期确诊梅毒的作用。

（黄澍杰　郑和平） qNbwGscki+peEPlGVq7pE+3kPhlb7jic/EOvI2ndgJPzHrNIqyZeRUxh9B0NEwJ9