实例一　铁皮枫斗颗粒剂对长期饮酒致高血压模型大鼠的影响 ^［14］

【原理】

根据人类饮酒无度的不良生活方式，采用长期饮酒造模法得到接近人类生活病症的高血压动物模型。铁皮石斛作为养阴的代表药物，具有补而不腻、清而不伤胃的特点，降压同时又可改善长期饮酒所致肾功能损伤及血脂异常现象，并具有抗疲劳、促消化、提高整体体质的功效。

【材料】

1.动物

SD大鼠，雌雄各半，体重180～220g。

2.器材

无创血压测量分析系统，全自动生化分析仪，电子计重秤，大小鼠抓力测定仪，平衡旋转仪。

3.药品及试剂

铁皮枫斗颗粒剂，酒石酸美托洛尔片，二锅头酒（酒精度52%）；血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）、血浆醛固酮（ALD）、血栓素B ₂ （TXB ₂ ）、尿酸（UA）、甘油三酯（TG）、肌酐（Cr）等试剂盒。

【方法】

1.造模及给药

SD大鼠，预适应一段时间后，按体重随机分为4组：正常对照组、模型对照组、铁皮枫斗组（700mg/kg）、阳性对照组（美托洛尔20mg/kg），每组10只。除正常对照组外，其余各组均采用递增饮酒法（酒精体积分数逐渐从5%递增至22%），每天自由饮用酒水造模，连续36周。饮酒造模4周后，给药组给予铁皮枫斗颗粒剂或美托洛尔，正常对照组、模型对照组分别给予等容量双蒸水，各组均按10ml/kg体积给药。

2.检测指标

①体重：每3天称大鼠体重，统计每周体重变化。②食量：每天定时称量每笼大鼠食物总重量，计算24小时内每只大鼠食量。③自主活动：将大鼠置于多功能自主活动记录仪预适应，记录10分钟内大鼠自主活动次数。④抓力：采用大小鼠抓力测定仪，抓持大鼠尾根处，测最大抓力，测两次取均值。⑤眩晕时间：将大鼠置平衡旋转仪，以45r/min转速旋转40秒，计时动物恢复正常状态所需时间。⑥血压：应用无创伤血压测量分析系统监测大鼠血压。预热，室内温度25～30℃。检测并确认各通道的气密性正常，大鼠装入恒温鼠笼（恒温系统温度调节在27～30℃），鼠尾固定。将脉搏传感器有感应面（圆形小胶块）向上，插入脉搏传感器插孔，推到底，保证传感器位置正确后测压。定期测量给药2小时清醒状态下大鼠收缩压（SBP）、舒张压（DBP）、平均动脉压（MAP）。⑦血生化指标：给药第32周，禁食12小时，眼底静脉丛取血，测ALD、 AngⅡ、 TXB ₂ 、 Cr、 UA、 TG、 TC等含量。

【结果】

①饮酒大鼠出现体重、食欲降低、精神萎靡等症状，长期服用铁皮枫斗颗粒剂可以改善以上症状。②铁皮枫斗颗粒剂可降低饮酒大鼠血压，且具有持续降压作用；长期服用铁皮枫斗颗粒剂对饮酒大鼠的肾功能及血脂异常具有一定的改善作用。③铁皮枫斗颗粒剂的降压机制可能与减少ALD、TXB ₂ 等水平有关。

注：与模型对照组比较， ^* P <0.05， ^** P <0.01

注：与模型对照组比较， ^* P <0.05， ^** P <0.01

注：与模型对照组比较， ^* P <0.05

【注意】

①本实验是采用饮酒诱导大鼠形成高血压。国外也有学者报道，通过雄性成年Wistar大鼠的饮用水逐渐增加乙醇摄入（第1周5%，第2周10%，第3、4周20%）。乙醇摄入降低血浆容量、尿量、体质量和液体摄入；升高血浆渗透压、血清钠和尿渗透压。另外，乙醇摄入可导致平均动脉压进行性增高，但不影响心率。第1周后，MAP的增加与增加的肾上腺素和去甲肾上腺素血浆浓度相关；第2周后，血浆儿茶酚胺回到基线水平，而血管加压素和血管紧张素Ⅱ浓度升高。结论：增加的交感神经活性可能导致摄入乙醇大鼠MAP早期升高，然而，血压的持续升高还与其他因子，如循环中AVP和血管紧张素Ⅱ浓度升高有关，乙醇摄入导致的脱水可刺激两种激素生成。②本实验根据人类饮酒无度的不良生活方式，采用长期饮酒法造模法得到接近人类生活病症的高血压动物模型。观察了给药对血压（SBP、DBP、MAP）的影响，及与血压相关的肝肾功能指标和一般行为学指标。可以作为慢性疾病高血压病长期服药调养康复模型。③关于饮酒诱导大鼠形成高血压，酒精的增加梯度不能太快，以免对大鼠伤害太大。④实验室还采用应激、高糖高脂和高嘌呤等单因素及复合因素建立多种生活性高血压模型，用于中药抗高血压病的药效研究。

【评价】

本实验是根据人类饮酒无度的不良生活方式，采用长期饮酒造模法得到接近人类生活病症的高血压动物模型。对研究中药抗高血压病是一个创新方法。

（浙江中医药大学　吕圭源　苏洁）

实例二　芍药提取物对老年自发性高血压大鼠血压、血脂以及肝功能的影响 ^［15］

【原理】

实验以老年自发性高血压大鼠，大鼠伴有一定的血脂及肝肾损伤，观察药物在降低大鼠血压同时，对大鼠肝血脂及肝、肾指标的影响。

【材料】

1.动物

老年自发性高血压大鼠，雄性，体重300～400g；Wistar大鼠，雄性。

2.器材

低速冷冻多管离心机，无创血压测量分析系统，恒温器，电子天平，数控超声波清洗器，高速分散器，全自动生化分析仪，离心机。

3.药品及试剂

芍药提取物，卡托普利片；总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-c）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-c）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）、肾素（PRA）、醛固酮（ALD）、内皮素（ET）、一氧化氮（NO）等试剂盒。

【方法】

1.实验分组及给药

15月龄老年自发性高血压大鼠50只，实验前测量各大鼠血压基础值，随机分为5组，即模型对照组、阳性对照组（卡托普利）、受试药高剂量（50mg/kg）组、中剂量（25mg/kg）组、低剂量（12.5mg/kg）组，每组10只。另Wistar雄性大鼠10只，为正常对照组。

2.检测指标

①单次给药血压：应用无创血压测量系统，监测单次给药后不同时间点（0h、1h、2h、3h、4h、6h、8h）血压，即收缩压（SBP）、舒张压（DBP）、平均动脉压血压（MBP），连续测量5次取平均值。②多次给药血压：连续给药6周，每周同一时间点平行测量大鼠血压。③血脂四项及肝功能指标：末次给药后眼眶取血，依法检测血清TC、TG、HDL-c、LDL-c、AST、ALT水平。④血液相关指标：末次给药后眼眶取血，依法检测血清AngII、PRA、ALD、ET、NO水平。

【结果】

①芍药提取物单次给药具有明显的降压作用，降压效果从给药2小时维持到给药6小时。②芍药提取物连续给药具有较明显而稳定的降压作用。③芍药提取物能显著降低大鼠血清TC、LDL-c、AST、ALT水平。④芍药提取物降压机制可能与降低血清AngⅡ、ET、PRA、ALD，升高血清NO水平有关。

注：与模型对照组比较， ^* P <0.05， ^** P <0.01

注：与模型对照组比较， ^* P <0.05， ^** P <0.01

【注意】

①老年自发性高血压大鼠由于血压偏高，在测量血压时，应严格控制预热和测量的温度及时间，以免造成大鼠死亡。②老年自发性高血压大鼠伴有一定血脂紊乱和肝肾损伤。

【评价】

采用老年自发性高血压大鼠，在研究中药抗高血压同时改善血脂水平和肝肾功能具有很高的价值。

（浙江工业大学　陈素红，浙江中医药大学　高建莉)

实例三　羚角降压方、天麻钩藤方对高血压肝阳上亢证模型大鼠的影响 ^［16］

【原理】

采用温里药、麻黄碱和盐水三因素联用造模。温里药为肝阳上亢证所设，麻黄碱可升压又有拟交感作用。三种因素联用后，大鼠除血压升高外，出现烦躁不安、易激怒、尖叫，同笼动物相互撕打、咬人等攻击行为，饮水量和排尿量增加，尿内儿茶酚胺类物质升高，具有交感-肾上腺髓质功能增强表现，以及cAMP升高、6-keto-PGF _1α /TXB ₂ 下降等指标改变，与临床上基本一致。造模无须手术，成功率约80%，时间约4周，此后血压趋向稳定。羚角降压方、天麻钩藤方对证治疗。

【材料】

1.动物

SD大鼠，雄性，350～400g。

2.器材

多通道无创测压系统，大小鼠抓力测定仪，红外线非接触式额温量测器，电子天平。

3.药品及试剂

天麻钩藤颗粒，羚角降压片，金匮肾气丸；血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）、肾素（PRA）、醛固酮（ALD）、心钠素（ANP）、降钙素基因相关蛋白（cGRP）等试剂盒。

【方法】

1.实验分组及给药

SD大鼠50只，按体重随机分成正常对照组、模型对照组、天麻钩藤方组（20g/kg）、羚角降压方组（5.6g/kg）、金匮肾气方（5.3g/kg），每组10只。除正常对照组外，其余各组造模，造模同时灌服相应药液，正常对照组与模型对照组给予蒸馏水，灌胃容积均为1ml/100g，持续4周。

2.模型建立

第1周大鼠每天按10g生药/kg灌服附子汤（含麻黄碱3.25mg/ml），第2～4周每天灌服附子汤（含麻黄碱5.00mg/ml），灌胃容积均为1ml/100g，并且自由饮用1%盐水。

3.检测指标：

分别于给药后1、2、3、4周，测定大鼠抓力、面部温度、收缩压。观察并记录大鼠一般体征（其中，狂躁易怒分级统计，Ⅰ级为尖叫；Ⅱ级为不易抓取、惊跳；Ⅲ级为咬人、同笼打斗）。末次给药后，眼眶取血，采用放免法测定PRA、AngⅡ、ALD、ANP、cGRP等血管调节因子。

【结果】

①给药后2～3周，天麻钩藤方、羚角降压方组大鼠面部温度降低，说明这两个方可改善肝阳上亢证模型大鼠之 “面部烘热”。②给药后3～4周，天麻钩藤方、羚角降压方、金匮肾气方组大鼠抓力明显升高，表明这三个方均有改善腰膝酸软的作用。③给药后2～3周，羚角降压方组大鼠收缩压明显降低，天麻钩藤方组大鼠收缩压在第2周明显下降。④天麻钩藤方可降低 AngⅡ、ALD含量，升高cGRP含量；羚角降压方可增强PRL活性，降低ALD，升高cGRP含量；金匮肾气方能升高cGRP含量。天麻钩藤方和天麻钩藤方主要是通过调节肾素-血管紧张素-醛固酮系统（RAAS）而起作用的。⑤天麻钩藤方、羚角降压方，能平抑阳亢，滋补阴虚，润毛发，缓解高血压肝阳上亢证之“面部烘热”“狂躁易怒”，降低收缩压。从而证明了三个复方与肝阳上亢证之间具有对应性，可能主要是通过调节RAAS系统而起作用的。而金匮肾气方仅能改善肝阳上亢证后期阴阳互损而导致的阴阳两虚之 “腰膝酸软”，不能下调肝阳上亢相关因子水平，可能与高血压肝阳上亢证方不对证。

注：与模型对照组比较， ^* P <0.05， ^** P <0.01

注：与模型对照组比较， ^* P <0.05， ^** P <0.01

【注意】

①本实验选用面部温度来量化 “面部烘热”，用抓力量化 “腰膝酸软”，用一般行为观察的等级计数来显示 “狂躁易怒”；“肾，其华在发”，肝阳上亢实为肾阴不制阳，故同时观察毛发色泽。证候指标测量时要注意动物应激反应。②选用5个血管调节因子与肝阳上亢证的相关性进行探讨，AngⅡ使全身微动脉收缩，并促进ALD合成与释放；PR可激活血管紧张素原，是促进AngⅡ生成的主要因素之一。这3个指标的异常升高可能与高血压肝阳上亢证呈正相关。cGRP具有强烈舒张血管活性，与高血压肝阳上亢证呈负相关。

【评价】

中药抗高血压研究要遵循方证相应性，对证治疗。

（浙江工业大学　陈素红，浙江中医药大学　苏洁） elfz4nu+VznaflOVry7i4yzZJXmki1C5/7+D0Q6wH0evjrrhBNI8jtBH1pXGkR3C