四、结论 |
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通过体外培养心肌细胞培养条件的优化试验,结果表明,要得到细胞活性较佳的心肌细胞,必须遵守以下几点要求:选取2日龄SD乳大鼠,8只一组,取心脏,剪碎,4℃保存,循环操作,同一时间添加胶原酶Ι,消化14h,1mL吸头轻柔吹打7~9次,铺细胞操作应迅速,差速贴壁时间为60min,差速贴壁后应立即加入BRDU,浓度应为0.1~0.3mol/L;差速贴壁后铺心肌细胞时应采用逐点铺细胞法,免疫荧光定位试验需要铺心肌细胞的量为(1.8~2.0)×10 6 个/mL,贴壁后细胞融合度为50%~60%;Western blot试验需要铺心肌细胞的量为(2.2~2.3)×10 6 个/mL,贴壁后细胞融合度为70%~90%。