第三章

离体培养大鼠原代心肌细胞模型的建立与培养条件的优化

高温应激、运输应激可导致热应激鸡或运输应激猪的急性死亡，而这种猝死可能与应激状态下发生的心力衰竭有关，也给畜牧养殖业及动物贸易带来了巨大的经济损失（Yubao，2008；Bao，2009）。

应激过程中，动物心脏的氧化损伤及其程度与热休克蛋白的保护性表达具有一定的相关性。大量的研究结果表明，在应激过程中，常伴随着热休克蛋白（Hsp27、Hsp70、Hsp110等）表达量的升高，从而维持细胞结构的完整。但是，由于生物有机体对应激反应产生的防御作用是在神经系统、体液及内分泌系统的网络调节下发生的，其作用及保护机理十分复杂，所以，在活体状态下对应激、应激损伤机理的阐明造成诸多不便。然而，如果对离体培养的细胞进行相关应激试验研究，则容易施加单一应激因素并进行试验条件的控制，开展热休克蛋白表达与应激损伤相关性研究。自1960年Harary等成功进行了大鼠原代心肌细胞的体外培养之后，国内外学者对原代心肌细胞的体外培养进行了不断的探索与改进，使之保持较好的自律性伸缩活性并达到较高的纯度（Galaris，1980；张琳，2008），从而使得离体培养的心肌细胞在心血管系统疾病及心脏组织工程学等方面的研究得到了较广泛的应用，成为单因素对心血管方面影响研究的理想模型（Simpson，1982；董丰，2005）。本试验是在前人研究的基础上，对原代心肌细胞进行离体培养并对其培养条件进行优化，以期为应激状态下心脏病理性损伤以及热休克蛋白保护性研究提供理想的实验模型。