家禽患寄生虫病后,除少数呈现典型症状外,家禽的多数寄生虫病在临床上仅表现消化机能障碍、消瘦、贫血、营养不良和发育受阻、生产性能降低等慢性、消耗性疾病的症状,虽不具特异性,但可作为早期发现疫病的参考。
调查寄生虫病的流行因素,了解发病情况,摸清寄生虫病的传播和流行动态,为确立诊断提供依据。
实验室诊断是确诊家禽寄生虫病的重要依据。主要包括如下内容。
1.粪便检查
粪便检查是家禽寄生虫病生前诊断的最基本、最常用的方法。多种寄生虫如吸虫、绦虫、线虫、棘头虫、球虫等,寄生于禽的消化系统或呼吸系统,某一发育阶段的病原体,常随禽的粪便排出,因此,检查粪便发现有寄生虫的虫卵、幼虫、虫体或虫体断片,可确诊禽消化系统(包括肝脏)、呼吸系统和泌尿生殖系统的寄生虫病。
检查粪便中的虫卵或幼虫等,常用涂片、浮集和沉淀等方法。
(1)直接涂片法 用镊子或小棒取少许新鲜粪便,置载玻片上,滴加清洁常水或50%甘油水数滴,混匀,除去粗渣,加盖玻片后,置显微镜下检查。制片厚度以通过粪便液膜能模糊识别片下字迹为宜。该法简便易行,适用于检查各种蠕虫的虫卵、球虫卵囊等,但检出率较低。
(2)饱和盐水漂浮法 该法的原理是利用比虫卵相对密度大的溶液作为检查用的漂浮液,使寄生虫的虫卵、球虫卵囊等浮聚于液体表面,取表膜液制片镜检,以提高检出率。该法适用于检查粪便中的线虫卵、绦虫卵和球虫卵囊。
方法:取5~10克粪便置于100毫升烧杯中,加入少量饱和食盐水搅拌混匀后,继续加入10~20倍的饱和食盐水,用玻棒搅匀,经细网筛或两层纱布过滤,将滤液置平底试管内,静置30分钟左右,用直径0.5~1.0厘米的金属圈平着接触滤液表面,提起后将粘于金属圈上的液膜抖落于载玻片上。如此多次蘸取不同部位的液面后,加盖玻片镜检。也可将粪便滤液倒入直立的直径1.5~2厘米的平口试管或青霉素瓶中,直到液面接近管口时为止,然后用滴管补加粪液,滴至液面凸出管口为止,上放清洁盖玻片,静置30分钟后,平移此盖玻片于事先放有一滴甘油水的载玻片上镜检。也可将粪便滤液置离心管内,按每分钟2500~3000转离心漂浮5~10分钟,取上浮物制片镜检。
(3)反复洗涤沉淀法 该法的原理是虫卵比水重,可自然沉于水底,便于集中检查和提高检出率。主要用于吸虫卵和棘头虫卵的检查,也可用于其他寄生虫卵和球虫卵囊等的检查。
方法:取粪便5~10克置于烧杯中,加入少量水捣成泥状,再加入10~20倍水充分搅合,用金属网筛或两层纱布滤入另一烧杯中,静置滤液15~20分钟后倾去上层液,保留沉渣,再加水与沉淀物重新搅合,静置,如此反复操作,直至上层液透明为止,最后倾去上清液,用滴管或吸管吸取沉淀物滴于载玻片上,加盖玻片后镜检。也可将粪便滤液置离心管中,以每分钟2500~3000转离心沉淀3~5分钟,取出后倾去上层液,再加水搅合,离心沉淀,如此反复操作,直到上层液透明为止,最后倒掉上清液,取沉淀物制片镜检。制片厚度要求同直接涂片法。
(4)幼虫检查法 适用于随粪排出的幼虫或粪便培养物、器官组织及土壤、饲料中的幼虫的检查。
方法:在固定于漏斗架上的漏斗下端接一根10~15厘米长的胶皮管,其下端用止水夹固定。取10~20克粪便放在漏斗里的金属网筛上,沿漏斗边缘缓缓加入40℃左右的温水,直到把粪便淹没为止,静置0.5~3小时,幼虫从粪便中游出,沉于底部;小心打开止水夹,使底部的液体流入离心管内,离心沉淀1分钟,吸去离心管内的上层液,把底部的沉淀物摇匀,用滴管移至载玻片上,或全部倒入小平皿内,用放大镜或在低倍显微镜下检查有无活动的幼虫。检查时需计数发现的幼虫数目,用以估计动物受侵袭的程度。
2.血液检查
用于检查寄生于血液内的寄生虫,如鸡住白细胞原虫等。将采出的血滴于载玻片一端,按常规推制成血片,姬姆萨或瑞氏染色法染色,用油浸镜头检查。
3.体表及皮肤刮下物检查
适用于诊断各种外寄生虫病。蜱、虱、刺皮螨寄生于体表,肉眼可见,不难诊断。
4.免疫学诊断
寄生虫病免疫诊断的方法很多,其中,有些方法如酶联免疫吸附试验、间接血凝试验等,已在某些寄生虫病的生前诊断及流行病学调查中得到较为广泛的应用,为某些寄生虫病的早期诊断、流行病学调查乃至及时制定有效的防制措施提供了重要的科学依据。
在初步怀疑的基础上,采用针对一些寄生虫的特效药进行驱虫试验,然后观察疾病是否好转。当临床症状渐轻或消失,或患禽体内有虫体排出时,就可以进行检查鉴定,达到确诊目的。