实验二　基本组织观察

【实验内容】

观察人体基本组织。

【实验目的】

观察单层柱状上皮、疏松结缔组织、骨组织、骨骼肌组织，多极神经元的组织切片（铺片、涂片）标本，加深对其显微结构的认识。

【实验材料】

显微镜，动物组织切片标本：小肠切片标本（HE染色），疏松结缔组织（皮下组织HE染色），长骨横磨片（大丽紫染色），跟腱纵切片标本（HE染色），骨骼肌纵/横切片（HE染色），脊髓灰质涂片（苯胺蓝染色），脊髓横切片（Cajal镀银法）。

【实验方法与步骤】

（一）观察单层柱状上皮

取小肠切片（HE染色）观察。肉眼观察，在肠壁上找到具有突起的黏膜面。用低倍镜观察，找到黏膜表面覆盖的一层柱状上皮细胞。换高倍镜观察，见柱状的上皮细胞细胞核呈卵圆形，蓝紫色，位于细胞基底部，细胞质呈淡红色，在柱状细胞之间寻找杯状细胞，杯状细胞呈上粗下细的高脚酒杯形，核呈三角形或卵圆形，位于细胞基底部，在细胞游离端的细胞质内可见呈空泡状的黏液颗粒。

（二）观察疏松结缔组织

取皮下组织铺片（经台盼蓝活体注射及HE染色法复染）观察。选择较为透明的部位进行低倍镜观察，可见交织成网的纤维与散在于纤维之间的细胞。选择薄而均匀的部位换高倍镜观察，区分胶原纤维与弹性纤维，并重点寻找成纤维细胞与巨噬细胞。

1．胶原纤维：染为红色，为粗细不等的带状，相互交叉分布，分支吻合成网状。

2．弹性纤维：染成紫褐色，比胶原纤维细，分支吻合成网状，有时其断端呈卷曲状。

3．成纤维细胞：分布于胶原纤维附近，胞体呈扁平的不规则圆形，具有分叉状突起，细胞轮廓不太明显，细胞质染色淡，细胞核大呈卵圆形，染为较淡的蓝紫色。

4．巨噬细胞：呈不规则形，有短而钝的突起，细胞轮廓清楚，细胞质染色较深，其内有蓝色的吞噬颗粒，细胞核较小，呈深蓝紫色。

（三）观察骨组织

取长骨横磨片（大丽紫染色）观察。低倍镜观察：可见许多个同心圆排列的环层结构即哈佛系统，中央有一黑色圆形管道横断面即哈佛管，其周围的环层骨板为哈佛骨板。在哈佛系统之间有不完整的环层排列的间骨板。有的标本上尚可见黑色的横向连通哈佛管的管道，即伏克曼管。选一哈佛系统换高倍镜观察，可见哈佛骨板之间的黑色的卵圆形的骨陷窝（其内的骨细胞已被破坏而不存在）。骨陷窝向四周呈反射状伸出许多紫色的分支小管为骨小管，与附近骨陷窝发出的骨小管连通，靠近哈佛管的骨小管通入哈佛管内。

（四）观察骨骼肌组织

用低倍镜辨认肌纤维，肌纤维为长圆柱形，靠近肌纤维的边缘有很多细胞核，肌纤维之间有结缔组织。用高倍镜分辨肌原纤维及明暗带组成的横纹。细胞核长椭圆形，沿肌纤维的边缘排列。

（五）观察多极神经元

取脊髓灰质涂片（苯胺蓝染色）观察。在低倍镜下找到深蓝色的具有多突起的神经元，即多极神经元。每一神经元有多个树突和一个轴突，但因轴突只有一个，所以很难找到。选一清晰的神经元换高倍镜观察，细胞体内有染色较淡的圆形细胞核，核内有一深蓝色的核仁，细胞质内有许多不规则的蓝色斑块，即尼氏体，轴突及其起始部的细胞质内则不含尼氏体，可以此来区别树突与轴突。

取脊髓横切片（Cajal镀银法）观察。低倍镜下可见脊髓灰质呈H形，其粗大的一端为脊髓灰质前角。在脊髓灰质前角内找到多极神经元（因在切片标本上的神经元突起被切断，故不易看到完整的神经元）。换高倍镜观察，可见胞体内的细胞核，核内有一个染成棕黑色的核仁，在细胞质内可见棕褐色细丝状结构，呈网状排列，即神经元纤维。

上述实验内容亦可结合各种模型进行观察。

【实验作业】

1．在作业图1、2填写各结构名称。

2．在作业图3（骨骼肌超微结构）填写：Z线，粗肌丝，细肌丝，明带，暗带。

3．在作业图4（神经元模式图）填写各结构名称。